196239. lajstromszámú szabadalom • Eljárás streptomyceshez és rokon mikroorganizmusokhoz használható klónozó vektorok előállítására
1 196239 2 insav szegmensként tiostreptonra, neomicinre vagy eritromicinre, vagy ezek kpziil többre mutatott rezisztenciát meghatározó szegmenst használunk. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a tiostrepton rezisztenciát meghatározó szegmensként a pLR2 plazmid 1,6 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét használjuk. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 7. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a neonácin rezisztenciát hordozó dezoxiribonukleinsav szegmensként a pLRl plazmid 3,4 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét használjuk. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 8. A 3. és 6. igénypont szerinti eljárás a pEL105 vagy pEL107 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pLR2 plazmid 1,6 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét hozzákapcsoljuk a pEL103 plazmid 2,8 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 9. A 3. és 7. igénypont szerinti eljárás pEL109 vagy pELl 10 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pLRl plazmid 3,4 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét hozzákapcsoljuk a pELl03 plazmid 2,8 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 10. A 3., 6. és 7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás a pEL113, 114 vagy 116 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pLR2 plazmid 1,6 kb. nagságú BamHI restrikciós fragmensét és a pLRl plazmid 3,4 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét hozzákapcsoljuk a pEL103 plazmid 2,8 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 11. A4. és6. igénypont szerinti eljárás a pEL104 vagy pEL108 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pLR2 plazmid 1,6 kb. nagyságú BamHI restrikciós fragmensét hozzákapcsoljuk a pEL103 plazmid 19,9 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 12. A 4. és 7, igénypont szerinti eljárás a pELl 11 vagy pEL112 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pLRl pkzmidot 3,4 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét hozzákapcsoljuk a pEL103 plazmid 19,9 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 13. A 4., 6. vagy 7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, a pEL117, pEL118, pEL119 vagy pELl20 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pLR2 plazmid 1,6 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét és a pLRl plazmid 3,4 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmensét hozzákapcsoljuk a pEL103 plazmid 19,9 kb nagyságú BamHI restrikciós fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 14. A 2—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás a pF.H24 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a 8. igénypont szerinti előállított pEL105 plazmid BamHI enzimmel való részleges emésztésekor kapott fraginenst hozzákapcsoljuk a 8. igénypont szerint előállított pEL105 plazmid Bell fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1982. 08. 02.) 15. A 2—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás a pFJ144és a pFJ145 plazmidok előállítására, azzal jellemezve, hogy a 14. igénypont szerint előállított pFJ124 plazmid BamHI fragmenseit hozzákapcsoljuk a pLTl plazmid BamHI 3,4 kb nagyságú fragmenséhez. (Elsőbbsége: 1982. 08. 02.) 16. A 2. vagy 5. igénypont szerinti eljárás ai pFJ145 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy t 15. igénypont szerinti előállított pFJ144 plazmid BamHI és Bell restrikciós enzimekkel részlegesen emésztett termékét önmagával kapcsoljuk. (Elsőbbsége: 1982. 08. 02.) 17. A 2—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás a pFJ!47 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pLJ43 plazmid 2,7 kb nagyságú Sáli- Bglíl fragmensét Egáljuk a 14. igénypont szerir t előállított pFJ124 plazmid BamHI restrikciós enzimmel és Sáli restrikciós enzimmel részlegesen emésztett fragmenseihez. (Elsőbbsége:! 1982.08.02.) 18. A 2—5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás a pFJ 148 és pFJ149 plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a pIJ43 plazmid Sail enzimmel részlegesen emésztett termékét ligáljuk a 14. igén) pont szerint előállított pFJ124 plazmid Sáli enzii miéi részlegesen emésztett fragmenseihez. (Elsőbbsége: 1982.08.02.) 19 A 2. igénypont szerinti eljárás bifunkcionális, vagy Streptoinycesben és E. coliban egyaránt! működőképes rekombináns dezoxiribonukleinsavj klón azó vektor előállítására, azzal jellemezve,', hogy j a) a pEL103 plazmid funkcionális replikációs) origint tartalmazó valamely restrikciós fragmensét, i b) érzékeny gazdasejtbe transzformálva legalább egy antibiotikummal szembeni rezisztenciát meghatározó egy vagy több dezoxiribonukleinsav szegmenst, amely gazdasejt transzformációra érzékeny, osztódik és tenyészthető, továbbá c) egy E. coli plazmid funkcionális replikont tartalmazó és antibiotikummal szembeni rezisztenciát meghatározó valamely restrikciós fragmensétj összekapcsoljuk, majd a kapott rekombináns dezoxiribonukleinsavat önmagával összezárjuk. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 20. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy E. coli plazmid fragmens kiindulási pia.anidjaként pBR322plazmidot használunk. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 21. A 20. igénypont szerinti eljárás a pEL121 vagy pEL122 bifunkcionális plazmid előállítására, azzal jellemezve, hogy a 8. igénypont szerint előállít! tt pEL107 plazmid BamHI enzimmel részleges emésztést követően kapott fragmensét hozzákapcsoljuk a pBR322 plazmid BamHI fragmenséhez. (E'sőbbsége: 1981. 10. 15.) 22. A 19. vagy 20. igénypont szerinti eljárás a pFJ 150 vagy pFJ 151 plazmidok előállítására, azzal jellemezve, hogy a pBR322 plazmid BamHI fragim n.sét ligáljuk a 17. igénypont szerinti előállított pb) 147 plazmid BamHI fragmenseihez. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 23. Eljárás transzformált Streptomyces vagy EJ coli gazdasejt előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely kompetenssé tett Streptomyces vagy E. ccü törzset a 2—22. igénypontok bármelyike szerinti módon előállított valamely rekombináns dezoxiribonukleinsav klónozó vektorral transzform ihink. (Elsőbbsége: 1981. 10. 15.) 24. A 23. igénypont szerinti eljárás, azzal jelle-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 16
