196236. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hepatitis B vírus antigenicitást mutató polipeptidek előállítására
1 196236 2 II. az így kialakított rekombináns klónképző hordozóval valamely egysejtű gazdasejtet transzformálunk, majd III. a transzformált gazdasejtet tenyésztjük, és IY. a megfelelő polipeptidet izoláljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a legalább egy, HBV antigenicitást mutató polipeptidet kódoló DNS szekvenciát egy klónozó hordozó első és második endonukleáz felismerő helye közé iktatjuk be, hogy az említett rekombináns molekulát létrehozzuk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy legalább egy, HBV antigenicitást mutató polipeptidet kódoló DNS szekvenciaként egy Dane-részecske endogén DNS-ét vagy ennek olyan fragmentumait vagy ezek szintetikusan előállított ekvivalenseit alkalmazzuk, amelyek HBV antigenicitást mutató polipepíidekeí kódolnak. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy egysejtű gazdaszervezetként Escherichia coli-t, Bacillus subtilist vagy más Bacillust, élesztőt, gombát, vagy állati- vagy növényi sejttenyészetet alkalmazunk. 5. Az 1—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a kifejezést szabályzó szekvencia további endonukleáz felismerő helyek közé van beiktatva a klónozó nordozóban. 6. Az 1—5, igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy kifejezést szabályozó szekvenciaként lac-rendszert, trp-rendszert, vagy a K fág fő operátor és promoter területeit « vagy az fd fág burkolati fehérje szabályozó területeit alkalmazzuk. ® 7. Az 1—6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az említett, HBV antigenicitást mutató polipeptidet kódoló DNS szekvenciát úgy állítjuk elő, hogy ® I. egy, a HBV antigenicitást mutató polipeptidet kódoló DNS molekulát tartalmazó rekombináns DNS molekulát egy más, ezzel transzformált tenyészetből kinyerjük, es II. a kinyert rekombináns DNS molekulából kimetszük az említett HBV antigenicitást mutató polipeptidet kódoló szekvenciát vagy olyan fragmenseit, amelyek HBV antigenicitást mutató polipeptideket kódolnak. 8. Az 1—7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kódoló DNS szekvenciaként az ATGGACATTGACCCTTATAAAG AATTTGGAGCTACTGTGGAGTT ACTCTCGTTTTTGCCTTCTGACT TCTTTCCTTCCGTACGAG ATCTT CTAGATACCGCCGCAGCTCTGT ATCGGGATGCCTTAGAGTCTCC TGAGCATTGTTCACCTCACCATA CTGCACTCAGGCA AG CAATTCT. TTGCTGGGGAGACTTAATGACT CTAGCTACCTGGGTGGGTACTA ATTTAGAAGATCCAGCATCTAG GGACCTAGTAGTCAGTTATGTC AACACTAATGTGGGCCTAAAÜT TCAGACAATTATTGTGGTTTCAC ATTTCTTGTCTCACTTTTGGAAG* AGAAACGGTTCTAGAGTATTTG GTGTCTTTTGG AGTGTGG ATTCG CACTCCTCC AGCTTATAGACCAC CAAATGCCCCTATCCTATCAAC GCTTCCGG A G ACT ACTGTTGTTA GACGACGAGGCAGGTCCCCTAG AAGAAGAACTCCCTCGCCTCGC AGACGAAGATCTCAATCGCCGC GTCGCAG A AGATCTCAATCTCG GGAATCTCAATGT képletű DNS-t vagy ezek olyan fragmenseit, amelyek HBV antigenicitást mutató polipeptideket kódolnak, ligáljuk a klónképző hordozóba. 9. Az 1—7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kódoló DNS szekvenciaként az ATGGAGAA CATCACATCAGGATTCCTAGGA CCCCTGCTCGTGTTACAGGCGG GGTTTTTCTTGTTG ACAAGAATC CTCACAATACCGCAGAGTCTAG ACTCGTGGTGG ACTTCTCTCA AT TTTCTAí:GGGG A ACTACCGTGT GTCTTGGCCAAAATTCGCAGTC CCCAATCTCCAATCACTCACCAA CCTCCTGTCCTCCAACTTGTCCT GGTTATCGCTGGATGTGTCTGC GGCGTTTTATCATCTTCCTCTTC ATCCTGCTGCTATGCCTCATCTT CT TGTTGGTTCTTCTGGACTATC AAGGTATGTTGCCCGTTTGTCCT CTAATTCCAGGATCATCAACCA CCAGCACGGGATCCTGCAGAAC CTGCACGACTCCTGCTCAAGGA ATCTCTATGTATCCCTCCTGTTG CTCTACAAAACCTTCGGATGGA AACTGCACCTGTATTCCCATCCC ATCATCCTGGGCTTTCGGAAAA TTCCTATGGGAGTGGGCCTCAG CCCGTTTCTCTTGGCTCAGTTTA CTAGTGCCATTTGTTCAGTGGTT CGTAGGGCTTTCCCCCATTGTTT GGCTTTCAGTTATATGGATGAT GTGGTATTGGGGGCCAAGTCTG TACAGCATCTTG AGTCCCTTTTT, ACCGCTGTTACCAATTTTCTTTT GTCTTTGGGCATACATT képletü DNS-t, vagy ezek olyan fragmenseit, amelyek HBV antigenicitást mutató polipeptideket kódolnak, ligáljuk a klónképző hordozóba. 10. Az 1—9. Igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a rekombináns klónkén-’ö hordozó E. coli HB 101 törzsbe transzformáljuk, és az NCIB-nél 11548, 11549, 11550, 11551,11552,11553,11554,115555,11556,11557, 11558, 11559 vagy 11560 számon letétbe helyezett E. coli HB 301 törzseket kiválasztjuk. 11. Az 1—9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy az NCIB-nél H548, 11549, 11550, 11551,11552, 11553, 11554, 11555, 11556, 11557, 11558, 11559 vagy 11560 számon letétbe helyezett E. coli HB 101 törzseket tenyésztjük. 12. Az I - 11. igénypontok bármelyike szerinti . eljárás, a M e t G 1 u A s n 11 e T h r S e r G i y P h e L e u G 1 y P r o L e u L e u V a ! L e u G1 n A1 a G 1 y P h e P II e L e u L e u T h r A r g I le L e u T h r 11 e P r17 5 10 15 20 25 30 35 « 40 45 50 55 G0 65
