196192. lajstromszámú szabadalom • Eljárás [di(terc-butil)-benzilidén]-tiazolidinon származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
196)92 8 Analízis: a C20H29NO2S összegképletre: számított: C: 69,12, H: 8,41, N: 4,03, talált: C: 69,39, H: 8,52, N: 4,03. A következő vegyületek a megfelelő alkid jodidokból az 5. példában közölt eljárás szerint állíthatók elő: 6. 5-{[3,6-bisz(l,l-dimetil-etil)-4-hidroxi-fenil]-metilén)-3-propil-4-tiazolidinon, 60%-os kitermeléssel, op.: 145-146,5 °C. Analízis a C21H31NO2S összegképletre: számított: C: 69,76, H: 8,64, N: 3,87, talált: C: 70,05, H: 8,76, N: 4,01. 7. 5-([3,5-bisz(l,l-dimetil-etil)-4-hidroxi-fenill-metilénl-3-butil-4-tiazolídinon, 60%-os kitermeléssel, op.: 168,5-169,5 °C. Analízis a C22H33NO2S összegképletre: számított: C: 70,36, H: 8,86, N: 3,73, talált: C: 70,60, H: 8,81, N: 3,97. Az (III) általános képlettel jellemzett vegyületek az 5-lipoxigenázt valamint az A2 foszfolipázt in vitro körülmények között gátolják. Ezenfelül a vegyületek különböző - gyulladásgátló és artritisz-ellenes szerek hatásosságát vizsgáló - tesztpróbákban in vivo körülmények között is hatásosnak bizonyultak. A következő tesztrendszerek ezen farrnakokinetikai hatásokat demonstrálják. Carrageenin (talpödémal-teszA A vegyületek gyulladásgátló hatása a C. A. Winter által leírt ( Proc. Soc. Exp. Bioi. Aíed., 111, 544 (1962)] teszt szerint értékelhető. E szerint a módszer szerint carrageenin befecskendezésével a patkány hátsó talpába gyulladást idéznek elő. A kontroll állatokhoz viszonyított gyulladásgátló hatás meghatározására a vizsgálandó anyagokat a gyulladás kiváltását megelőzően beadják a kísérleti állatoknak. Az eredményeket az I. táblázat tartalmazza. 1 I. Táblázat GyulladáBgátló hatás a Carrageenin-tesztben Vizsgált vegyület Dózis mg/kg‘ Gátlás %-ban Ha 30 67 Ilb 50 46 IIc 50 12 * gyomorszondával, szájon át, közvetlenül a gyomorba Antigén-indukált sarjadzásos gyulladás tengeri malacban Az Andersson által leírt [Br. J. Pharmac., 69, 467 (1980)) általános eljárást követve mindkét nemű Hartley törzsbéli tengeri malacokat (250-300 g) ovalbuminra érzékenynyé tettek állatonként 1 meg ovalbuminnal kevert 50 mg alumínium-hidroxid egyszeri beinjektálásával, majd 21-26 nap múlva a talpukba agarózhoz kovalensen kötött ovalbumint fecskendeztek. Az érzékennyé tett tengeri malacok lábába injektált Affi-Gel Ovalbumin (Bio-Rad Laboratories, Richmond, California) 0,1 mi-e sarjadzásos gyulladást váltott ki. Három nappal később megmérték a beinjektált és a nem kezelt talpak térfogatát vízkiszorítés eljárását alkalmazva Statham nyomásátalakitó és digitális voltmérő segítségével. A talptérfogatok különbsége a gyulladás mértékére jellemző. A gyulladásos talpak hisztológiai vizsgálatai azt mutatják, hogy a neutrofilek az első és harmadik nap között, a makrofágok a harmadik napra szűrödnek be. A tizenegyedé napra jelentős kiterjedt gócú sarjképződéssel járó gyulladás figyelhető meg. Az Affi-Gel Ovalbumin területeket elsősorban mákrofágokból álló, kisebb számban többmagvú óriás sejteket, eozinofileket, plazmasejteket és limfocitákat tartalmazó gyulladt sejt-beszűrődés veszi körül. Tengeri malacok ötös csoportjait, melyeket három nappal korábban a talpukban Affi-Gel Ovalbuminnal beoltottak, 8 napon ét az ételükbe kevert, vagy négy napon át gyomorszondával közvetlenül a gyomorba juttatott tesztvegyületekkel, klinikai anti-reumás gyógyszerekkel, mint a penicillamin, valamint placebóval kezelték. A talptérfogatokat megmérték, és a kezelt és kezeletlen talpak közötti térfogatkülönbséget összevetették a harmadik napon, azaz a gyógyszeradogolás kezdetekor észlelt különbséggel. A sarjképzcdéssel járó gyulladás százalékos gátlása a következő képlet alapján határozható meg: térfogatkülönbségn %-os gátlás = (1 - ---------------------------------------) x 100 térfogatkülönbséga ahol a számlálóban ill. nevezőben a 11. ill. 3. napon mért kezelt és kezeletlen talptérfogatok különbségei szerepelnek. Az eredményeket a II. táblázat összegzi. IP. Táblázat Gyulladásgátló hatás az antigén-indukált Granulome-tesztben Vizsgált Dózis/Bevitel Százalékos vegyület módja gátlás Ha 0,1% étrenddel 64% 25 mg/kg P. 0. 5% 50 mg/kg P. 0. 23% 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
