196123. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antitumor hatású antraciklin-glikozidot tartalmazó injektálhato oldat előállítására
1 2 196.123 a példákra korlátoznánk. A példákban a stabilitásvizsgálatokat nagynyomású folyadékkromatográfiával (HPLC) végeztük, az alább következő kísérleti körülmények között: Folyadékkromatográf: Varian 5010 modell, Spektrofotometriás detektor: Knauer 8700 modell Integráló regisztráló: Varian CDS 401 modell Injekciós szelep: Rheodyne 7125 modell, 10 indes mintahurokkal felszerelve Kromatográfiás oszlop: Waters p-Bondapack C 18 (hosszúság: 300 mm, belső átmérő: 3,9 mm, átlagos részecskeméret: 10 mm) Oszlop hőmérséklet: környezeti (körülbelül 22 °C ± 2 °C) Mozgó fázis: víz/acetonitril (69:31 v/v) a pH pH= 2 értékre foszforsavval beállítva, szűrt (színtereit üveg szűrő, 1 mcm vagy finomabb porozitás) és légtelenített A mozgó fázis folyási sebessége: 1,5 ml/perc Analitikai hullámhossz: 254 ± 1 nm Integráló regisztráló érzékenység: 512 A szalag sebessége: 1 cm/perc Ilyen körülmények között az antraciklin glikozid csúcs körülbelül 6 perces retenciós időt mutat. A kapott eredmények a példákhoz csatolt táblázatokban láthatók. Az analitikai adagok extrapolációja annak az időnek a meghatározása céljából, amikor még az eredeti elemzési minta 90%-a változatlan (t90 érték) egy Arrhenius görbe segítségével történt. Ez az analitikai adatkezelési módszer jól ismert és széles körben használt. Ismertetése például al alábbi irodalomban található: Chemical Stability of Pharmaceuticals, Kennet A. Connors, Gordon L. Amidon, Lloyd Kennon, John Wiley és Fia kiadása, New York, N.Y., 1979. TM A „teflon” elnevezés „Teflon1 M”-et jelent. A mellékelt ábrákon az „E+3” jelölés ,,.103”-t jelent. 1, ábra: a doxorubicin.HCl bomlás K0jjS-pH görbéje 55 °C-on, steril vízben (14. példa), 2. ábra: a doxorubicin.HCl bomlás K0^s-pH görbéje 55 °C-on 5%-os dextrózos oldatban (14. példa), 5 10 3. ábra: a doxorubicin.HCl bomlás K^g-pH görbéje 55 °C-on, 0,9%-os (fiziológiás) sóoldatban (14. példa), 4. ábra: az epirubicin.HCl bomlás Kçt,s-pH görbéi' 55 °C-on steril vízben (injekciós készítményhez val< vízben) (20, példa), » 5. ábra: az epirubicin.HCl bomlás K0v,s-pH görbéje 55 °C-on, 0,9%-os (fiziológiás) sóoiaatban (20. példa), és 6. ábra: az epirubicin.HCl bomlás K0bs-pH görbéje 55 °C-on, 5%-os dextrózos oldatban (20. példa). 1. példa 15 összetétel 80 fiola esetén (1 fiola esetében) Doxorubicin hidroklorid 0,8 g (10 mg) 20 0,1 n sósav pH=3 eléréséig szükséges mennyiségben (pH=3-ig) Injekciós készít-0,4—1-ig . (5 ml-ig) ményekhez való víz 25 A 0,8 g doxorubicin hidrokloridot a nitrogén!;áz átbuborékoltatásával légtelenített víz 90%-ában eloldjuk. Ezután cseppenként adjuk hozzá a sósavat, amíg a pH=3 értéket elérjük. Végül hozzáadjuk a 0,41 végtérfogat eléréséhez szükséges légtelenített víz- 30 mennyiséget. Az oldatot nitrogén nyomás alatt átszflijük egy 0,22 p-os mikropórusos membránon. Az oldat 5 ml-es mennyiségeit 5/7 ml-es I-színtélén típusú üvegfiolákba töltjük. A fiolákat teflonbevonatú klórbutilkaucsuk dugókkal, majd alumínium kupakokkal lezáijuk. 35 Vizsgáljuk a fiolákban lévő oldatok stabilitását. A fiolákat 55°C, 45°C és 35°C (gyorsított stabilitási vizsgálatok), valamint 4°C hőmérsékleten tároljuk: 55°C-on 3 hétig, 45 és 35 °C-on 4 hétig, 4 °C-on 12 hétig. An A HPLC-vel kapott stabilitási adatok az alább köu vetkező 1. táblázatban láthatók: 4
