195917. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibiotikumtartalmú micélium felhasználásával gyógypremixek előállítására
4 195917 5 Mint a táblázatból leolvasható, a szűrt, nedves micélium tömegére számítottan 0,1-0,3%-os propionsav koncentráció megbízhatóan stabilizálja bármelyik micéliúmmasszát. A gyógypremixekkel kapcsolatos további fontos követelmény az állandó hatóanyaglartalom, azaz folyamatosan azonos minŐBcgű készítmény előállítása. Ismert az a tény, bőgj- a fermentációk hal.óariyagtiterei nem minden esetben azonosak. Ennek továbbá az alkalmazott szűrési eljárások hiányosságainak következtében a szűrt, nedves micélium hatóanyagtartnlma sem azonos az egymást követő sarzsok esetében. A hatóanyagtartalom különbségek kiküszöbölésére eljárásokat dolgoztunk ki. Egyik eljárásunk szerint a micéliumol propionsav-kénsav eleggye! kezelt takarmányliszttel keverjük össze. A keverés hatására a micélium állaga kedvezően változik, és makroszkopikusan homogén anyagot kapunk. Az apró mirelium golyócskákat takarmányliszt veszi körül, emiatt. ;i keverék száraznnyagtartalmn a valódi értéknél magasabbnak tűnik. Ebből a keverékből biológiai módszorrrel (F. KavanagVi 5 {1975) Methods in Enzymology vol. 43., p. 55-69. Ed.l J. M. Mash, Acad. Tress, New York) határoztuk meg az antihiotikus aktivitást. Az .antibiotikum aktivitás mértékét n különböző micéliumok esetén oxiletraciklin- 10 -hidroklorid, neomicin-szulfát, és apramicin-szulfát meg/g értékben fejeztük ki. A biológiai aktivitás értékek birtokában a keverékhez annyi további takarmánylisztet kevertünk, hogy az előre meghatározott ható- 15 anyagszint beálljon. Az így nyert kukoricaliszt. tartalmi! gyógypremix polietilén zsákban, levegőtől elzárva, szobahőmérsékleten több hónapon keresztül biológiailag stabil marad, nem fertőződik. 20 A stabilitási vizsgálatok eredményeit a takarmánylisztes keverékben a 2. táblázat mutalja. 2. táblázat micclium kezdés tárolás ideje (hónap) fajta I. 2. 3* kukoricaliszt OTC +0.5% propionsav stabil stabil stabil micélium +0.5% propionsav “) + 1.0% kén sav (46%) } stabil stabil stabil szójaliszt neomicin +0.5% propionsav stabil stabil stabil micélium +0.5% propionsav + 1.0% kénsav (48%)J stabil stabil stabil kukoricaliszt kezdődő nebramicin +0.5% propionsav romlás romlott romlott micélium +0.5% propionsav + 1.0% kénsav (48%)J stabil stabil stabil A micélium és a savakkal kezelt takarmányliszt összemérését az alábbiak szerint végeztük: 1 tömegresz takarmánylisztben elkevertünk 10% propionsaval és 2,0 t% kénsavat (48%-os). Az ily módon előállított savas takarmánylisztet 1 tömegrész szűrt, nedves micéliummal kevertük össze. Mint az a táblázatból leolvasható, a kénsavas kezelés a nebramicín komplexet tartalmazó keverék esetén a pH savasra állítása révén teszi lehetővé a propionsav hatásénak kifejeződését. A stabilitás vizsgálatot olyan mintákon íb elvégeztük, ahol takarmányliszt helyett propionsavat tartalmazó perlitet kevertünk a micéliumhoz. Penészedést egyik esetben sem tapasztaltunk. A perül jó nedvszívó hatása következtében kis mennyiségben is kedvezően befolyásolja a micélium állagát, ezáltal a gyógypremix kezelhetőségét. 45 A másik eljárás szerint a szűrt, nedves micéüumot a fermentáció titerétől függő mennyiségű vízben suszpendáljuk fel, hogy az újraszüréskor keletkező micélium hatóanyagtartalma az előírt tartományon belül lo- 50 gyen. Ebben az esetben a propionsaval vagy más alkalmazott szerves savat az újraszűréskor porlasztjuk a micéliumra. Az ily módon nyert tartósított micélium kénsavas kukoricaliszttel vagy perlittel keverhető, de adott 55 esetben közvetlenül önmagában is csomagolható. Ezen eljárásunk alkalmazása esetén a második szűrésnél keletkező szőriét sok esetben olyan mennyiségű hatóanyagot tnr- 60 lalmaz, amelynek kinyerése a feldolgozási folyamat hatékonyságát növeli. Ilyen esetekben a reBzuszpendálsst az újra szűrést gyakran célszerű a főműveletektől eltérő körülmények között végezni (pl. savazás, melegítés). 65 4