195855. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tumorellenes hatású LL-E33288 jelű antibiotikum-komplex és komponensei előállítására

42

195855

43

kálium-kloridot leszűrjük és az oldatot szárazra pároljuk. Az elil-acet.átbari oldódó maradékot koncentráljuk és hexánból kicsapjuk. 135 mg nyers LL-E33288f.-z-]-t. kapunk.

Ezt a nyers cC2-l-l kromatográfiásan tisztítjuk 20-40 p 1,5 x 20 cm-es Bio-SlLB oszlopon. Diklór-metán és metanol 96 : 4 arányú elegycvel eluáljuk és 34 mg analitikai tisztaságú Ll.-E33288oc2-l-t kapunk. Az LL-E33288oc2-I kis mennyiségeit előzőleg izoláljuk az NRRL-15839 fermentációjából és az anyagot ezen példa szerint előállított Ll,-B33288oC2-I-vel azonosítjuk vékonyréteg és nagynyomású folyadékkromatográfiás analízisekkel.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás az alábbi komponensekből álló LL-E33288 jelű antibiotikum komplex

1) LL-E33288oci-Br vegyület, amely az alábbi oldószer-rendszerekben, szilikagél-leinezeken, vékonyrétegkromatográfiós meghatározás szerint az alábbi Rr értékeket mutatja:

a) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfáttal telitett ctil-acetátban, Rf = 0,67;

b) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfáttal telitett, 3% izopropanolt tartalmazó etilacetátban, Rt = 0,80; és

c) etil-acetát és metanol 95 : 5 arányú elegyében Rf = 0,79;

2) LL-E33288íC2-Br vegyület, amely az alábbi oldószer-rendszerekben szilikagél-lemczeken, vékonyrétcgkromatográfiás meghatározás szerint az alábbi Rr értékeket mutatja:

a) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogán-foszfáttal telített etil-acetátban Rr = 0,61;

■ b) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfáttal telített 3% izopropanolt tartalmazó etil-acetátban Rf = 0,75; és

17.60(q);

17.64(q);

22.4(q);

22.81 q);

36.9(t);

39.2(t/d);

52.7 {q);

54.6(d)

57.8(d);

61.0(q/d);

66.9(d);

68.4(d)

70.2(d);

71.1(d)

76.1(d);

81.0(d)

97.4(d);

99.7(d)

115.l(s);

123.4(d)

130.2(b

);

1 30.8 (s)

149.5(s);

191.7(s)

h) az alábbi oldószer-rendszerben, szilikagél-le mezeken, vékony rétegkromatográfiás

meghatározás szerint az alábbi Rí értékeket mutatja:

i) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogcrt-foszfáttal telitett etil-acetátban, Rf = 0,24;

ii) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogénc) etil-acetát és metanol 95 : 5 arányú elegyében Rf = 0,71;

3) LL-E33288oCa-Br vegyület, amely az alábbi oldószer-rendszerekben, szilikagél lemezeken, vékonyrétegkromatográfiós meghatározás szerint az alábbi Rf értékeket mutatja:

a) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfáttal telitett etil-acetátban , Rt 5 0,55;

b) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfáttal telitett, 3% izopropanolt tartalmazó etil-acetátban, Rr = 0,69; és

c) etil-acetát és metanol 95 : 5 arányú elegyében Rf = 0,61,

4) LL-E33288ccf-Br vegyület, amely az alábbi oldószer-rendszerekben, szilikagél-lemozeken, vékonyrétegkromatográfiós meghatározás szerint az alábbi Rf értékeket mutatja:

a) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfáttal telitett etil-acetátban, Rf = 0,49;

b) 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfáttal telített, 3% izopropanolt tartalmazó etil-acetátban, Rf = 0,64; és

c) etil-acetát és metanol 95 : 5 arányú elegyében Rf = 0,54;

5) LL-E33288ßi-Br vegyület, amelynek jellemző fizikai-kémiai állandó az alábbiak:

a) hozzávetőleges elemanalízis:

C% = 48,6; 11% = 5,6; N% = 2,9; S% = 9,1;

Br% = 5,5;

b) op.: 146-150 °C (bomlás)

c) fajlagos forgatóképesség [oc]j6d = --49 í 10 0 (c = 0,1 %, etanol);

d) UV adszorpcióé

spektrum az 1. ábrán

megadott;

e) ÍR adszorpcióé

spektrum a 2. ábrán

megadott;

f) proton mágneses

rezonancia spektrum

a 3. ábrán megadott;

g) 13C mágneses rezonancia spektrum a

4. ábrán megadott az

alábbi szignifikáns

csúcsokkal:

18.9 (q);

19.7(q);

23.5(q);

34.3(t);

47.8(d);

51.7 (q);

56.3(q);

57.2(q);

61.7(d);

62.4 (t);

69.1(d);

69.7(d);

71.9(d);

72.1 (s);

83.3 (s);

88.2(s);

100.8(e);

102.5(d);

124.4(d);

126.5(d);

144.6(b);

149.3(e);

192.4 (s);-foszfáttal telitett, 3% izopropanolt tartalmazó

etil-acetátban, Rr = 0,35; és

iii) etil-acetát és meLanol 95 : 5 arányú elegyében Rt = 0,36.

i) molekulatömeg: 1333 illetve 1335 7eBr illetve slBr-re, és

j) összegképlete: C5»lt8»N30 22S»Br,

5

1U

15

20

25

30

35

40

60

23