195839. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-21978 C jelzésű ciklusos peptid származékok előállítására
29 I Or,83!) liljuk toluol eluonsl használva. A frukeiokal TLC-vei ellenőrizzük, a detektáláshoz rövidhullámú UV főnyi használunk. A megfelelő frakciókat egyesítve ős vákuumban megszárítva 10,1 |f 2,4,5-triklór-fonil-n-dokanoálol kapunk. 0. N«,n-l.~BOC-A-21978C mag acilezése 2,4,5--l.rih lór-feiiil-n-dokanoáttal Norn-t-HOC-A-2.l978C mag (15,0 gj és 2,4,5-triklór-fenil-n-dokanoál (15,0 g) vízmentes DMF-dal (500 ml) készült oldalát nitrogéngáz alatt környezeti hőmérsékleten 25 óráig keverjük. íízután az elegyet 00_ "C-o/i 5 óráig, vagy pedig addig keverjük, amig a The: a reakció befejeződését jelzi. A reukcióelegyet vákuumban körülbelül 200 ml-re bepároljuk és 1,2 liter KtüO/toluol (5:1) elogygyel keverjük. A terméket szűréssel elkülöuiljük, KliO-val mossuk és vákuumban szárítjuk. 15,05 g NTi'i>~(n-dekarioi))-Nom-l-KOC-A-2I978C mag UözlitermékcL kapunk (4 általános képlet: R = n-dekanoil, H1 = II, R2 = t-1)00). 0. Az Nrn>-(n-dekanoil)-Noru-l-llOC-A-219780 mag tiszt/fása Az Nrrp-(n-dekanoil)-Norn-t-130C-A--2I978C mag küztitermókot a következő módon tisztítjuk: a nyers készítményt körülbelül 50 ml oluáló oldószerrondszerben oldjuk és az oldatot HPLC-vel tisztítjuk, fordított fázisú szilikngól/Cis adszorbonssel töltött patront tartalmazó Wutors Prop 500 rendszert használva. A rendszert HjO/MoOH/ CfbCN (50:15:35) clggyel eluáljuk, amely 0,2% piridint és 0,2% HOAc-ol tartalmaz. A frakciókat UV monitorral detektáljuk 280 rim-nól. A megfelelt» frakciókat egyesítve és vákuumban szárítva 8,56 g tisztítóit NTrP-/n-deknnoil/-Nor»,-t-BOC-A-21978C magot kapunk. 0. Az Norn-t-BOC csoport eltávolítása A 1-I30C csoport eítávolítáRa céljából az Nfn>-(n-do kanod )-Norn-t-BOC-A-21978C magot (1,47 g) 15 ml trifluor-ecel.sav/J ,2-otánditiol (10:1) elegy ben környezeti hőmérsékleten 3 percig keverjük. A reakcióologyel vákuumban megszán!tjük és a maradékot J3UO-val (50 ml) l.riluráljnk. 20 ml RtzO-val való mosás vitán a trituráit anyagot vákuumban megszorítva 2,59 g nyers Ntti» /ri-dokanoil/A-21978C magot kapunk (4 általános képlet: R : n-dekanoil; R1 és K1 = H). 15. Az Ntir-(n-ilekaiiojI)-A-2]978C mag tisztítása A nyers NTn,-{n-doknnoil)-A-21978C mugol. fordítoLt fázisú HPLC-vel tisztítjuk n következőképpen: a mintát (2,59 g) 4,0 ml 30 ILO/MeOíi/CliaCN/piridin/lIOAc (00:/5:35:2:2) elogybun oldva LP-l/Ci* adszorbonssel mogtöllőlt 83 x 2,54 crn-CG ro'zsdamontoa aeéioszlopba fecskendezzük be. Az oszlopot a fenti oklószorologgyc! eluáljuk. Az ohiciói 10- -12 ml/min áramlási sebességgel hajtjuk végié LDC kélduguUyús szivuttyút (Miiton-Roy) l.usználvn. Az cffluonsl UV-monitorral (lseo Model UA-5, Instrument Specialist Co., 4700 Superior Avenue, Lincoln, Nebraska 68504) detektáljuk 280 run-nél. 2 percenként frakciókat (20-24 ml) gyűjtünk. A kívánt frakciókat - mikrobuellones hatékonyságuk alapján - egyesítve ,és vákuumban szárítva 1,05 g ‘.érmékét kapunk. 15 tisztítást 4,35 g, 4,25 g, 2,14 g, 2,00 g és 1,75 g nyers kiindulási származékkal megismételve összesen 5,58 g tisztított NTn>-(n-dekanoil)-A-21978C magot kapunk. 7. példa 15 példában az, 5 általános képlelű vegyüld előállítását ismertetjük. Az eljárással olyan specifikus 5 általános képjelü vegyöleteket állítunk elő, ahol R jelentése N-(n-dokanoi!)-L-fenil-alanil-csopor (. és R1 l-ROC csoportot vagy hidrogénatomot jelent. (n-Daka nuil)-L-fon il-ula nil J-A-2.1978C mag előállítása A. N~ (n-De kanoilJ-L- fenil-alanil-2,4,5- Irih/or-íeaolát előállítása N-(n-Dekanoil)-L-fonil-alaninl (31,9 g, 0,1 mól) és 2,4,5-triklór-fenolt (19,7 g, 0,1 mol) 1 liter vízmentes éterben oldunk és az oldatot N,N'-dieik]ohexil-karbodiimiddol (20,6 g, 0,1 mól) kezeljük. A keveréket éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A kivált N,N’-diciklühexil-kurbumiclol leszűrjük és eldobjuk. A szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A kapott maradékot éterrel cldörzsöljük és a szilárd anyagot (muradók ciklohexil-karbamid) szűréssel eltávolítjuk. A szűrletet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot acolonilrilböl kristályosítva 36,9 g kristályos N-(n-dokanoil)-!,-fenil-nlanü-2,4,5-lriklór-f cnulétol kapunk; olvadáspont 122-124 "C. 15. NTrit-[N-{ri-Dektmoil)-L-fanil-aIanil]-Nur«-i-UOC-A-21978C mag előállítása N-(n-Dekanoil)-L-fenil-alunil-2,4,5-triklőr-fcnolálot (10 g, 0,02 mól) és Norn-l-BOC-A-21978C magot (10 g, 6 millimol) vízmentes DMF-ban (1 liter) okiunk és az oldatot szobahőmérsékleten, nitrogénatmoszféra alatt 96 óráig keverjük. Az oldószert csökkentőit nyomáson lepároljuk. A maradékot diotil-éler/kloroform eloggycl (800 111I + 200 mi) 2 óráig keverjük. A terméket szűréssel clkülö-5 10 15 20 25 30 35 40 45 5C 55 60 15 Ki
