195834. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tumorellenes hatású antibiotikumok és az ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

4

195834

r>

B. Akut loxicitás (LDso)

Az 5', G'-dehidrokidamicin LDso értéke egyszeri peritonealis injekció beadás cselén 100 ing/kg.

C. CiLotoxikus hatás

Az L 1210 leukémia sejt tenyészet szaporodását 0,07 pg/ml (1C») 5’,6’-dehidrokidamicin gátolja. Amint az az előzőekből látható, n találmány szerint előállított vegyületek L 1210 leukémia sejtekkel szemben erős tumor gátló hatást rejtenek ki, mig toxieitásuk alacsony. Ezért ezek a vegyületek várhatóan hasznos rák elleni szerek.

Az 5\G’-dchidrokidamicin, az 5\6'-dehidropluramicin és az 5',6'-dchidroneopIuramicin nagy hozammal állítható elő kidamicinből, pluramicinból, illetve neopluramicinból azokat ultraibolya fénnyel besugározva.

Ezeket a kiindulási antibiotikumokat például közömbös oldószerben oldjuk vagy szuszpondáljuk és ultraibolya Tény hatásának kitéve a megfelelő végtermékké alakítjuk. A kapott terméket a reakcióelegyből bármely ismert izolálási és tisztítási eljárással tiszta formában elkülöníthetjük.

Az ultraibolya kezelést végezhetjük például Tomy Seiko TV 40 (Tomy Seiko Co., Ltd.) UV besugárzó készülékkel, amelyet a hcsiigárzandó anyagtól 30 cm távolságra helyezünk el és az Uv fénnyel (100 V és 15 W)

1-2 órán át szobahőmérsékleten végezzük a besugárzást.

Az UV besugárzás intenzitását és időtartamát az alkalamazott oldószer és a kiindulási antibiotikum-koncentráció határozza meg, de ezek az értékek semmiképpen nem kritikusak a találmány célja szempontjából. Az UV besugárzás intenzitásának, és az alkalmazott hőmérsékletnek á megválasztáséval az előző bekezdésben megjelölt időtartamon belül 250-1000 ug/ml koncentrációtartományon belüli anlibiolikummennyiségct alakíthatunk át.

A következőkben a tAlálmányt példákban mulatjuk be.

i. példa

5’,6‘-dch id vök idamicin előállítása

5 mg kidamicin 20 ml metanolban készült oldatát 8,5 cm belső átmérőjű Petri csészébe töltjük és az oldatot 30 cm távolságról 2 órán át Tomy Seiko TV 40 (100 V, 15 W) készülék UV sugárzásával kezeljük. Ezután az oldatból a metanolt vákuumban lepároljuk és a visszamaradó anyagot nagynyomású folyadék kromatgráflAs eljárással Nucleosil sCi# oszlopon (d=20 mm, magasság 300 mm; Muolterey és Nagel) mozgó fázisként acctonitril, 0,1 mól/l-cs foszfát puffer 3:7 arányú, pH =3,0-as clegyét alkalmazva tisztítjuk. Az

cluálum pll-jál nátrium-hidrogén-karbonáttal

7,0 értékre állítjuk, majd az eluálumol kloroformmal exlraháljuk. A kloroformot vákuumban ledeszliiláljuk, a visszamaradó anyu- 5 got metanolban oldjuk, majd Scphadcx LII-20 oszlopra visszük (d = 15 mm, magasság 170 mm). Az anyagot az oszlopról metanollal eluáljuk, az aktív frakciókat összegyűjtjük és vákuumban szárazra pároljuk. Ily módon 10 3,6 mg 5’,G’-dehidrokidamicint nyerünk. A

kapott termék olvadáspontja 1G5-167 °C (bomlik).

KBr

ÍR (V.«} cm-‘:3420, 2965, 2930, 28G0,

15 2820, 2775, 1645, 1G35, 1G05, 1580, 1405, 1435,

1420, 1375, 1310, 1270, 1230, 1090, 1050, 840

NMR (CDClj) é:

20 13,9 (s, Ili), 7,93 (s, 111), 7,72 (s, 111), 7,47

(q, 111), .0,38 (s, lil), 5,43 (t, III), 5,00 (d, 111), 4,33 (dq, Ili), 4,08 (dq, 1H), 3,66 (t, III),

3,45 (dd, III), 3,42 (d, 111), 3,02 (s, 311), 2,40 (s, 311), 2,30 (dd, III), 2,25 (s, 311), 2,23 (dd, 25 1H), 2,03 (d, 311), 2,02 (s, 3H), 1,45 (d, 311),

1,42 (d, 311), 0,83 (s, 311}

2. példa 30

5\6‘~dclt id ropta ram iciu előállt Után

5,2 mg plurumicint 1 órán át az 1. példában ismertetett módon UV fénnyel sugárzunk 35 l,e. Ily módon 2 mg 5’,G'-dchidroplurumicinl nyerünk.

NMR (CDClj) 6:

13,7 (s, 111), 7,98 (s, lil), 7,78 (s, 111), G,52

(», HI), G,05 (dq, III), 5,52 (dd, 111), 5,41 (m,

III), 5,15 (d, Hl), 4,97 (d, 111), 4,3 (m, 211),

4,12 (d, 111), 3,77 (t, 111), 3,67 (dd, 111), 3,10

(k, 311), 2,58 (s, 311), 2,40 (s, 311), -2,6 (111),

1,5 2,2 (III), 2,18 (s, 311), 1,88 (dd, 311), 1,82 (s,

311), 1,55 (d, 311), 1,43 (d, 311), 0,96 (s, 311),

r>',G'-dchidroiiaopluramicin előállítása

10,8 mg ncopluramicint 1 órán át az 1. rr példában ismertetett módon UV fénnyel sugárzunk be. Ily módon 2,8 mg 5’,6'-dehidroncopluramicint nyerünk.

NMR (CDClj) é:

13,8 (s, 111), 7,93 (s, III), 7,78 (s, 111), 7,46

(q, III), 6,38 (s, Hí), 5,53 (dd, 111), 5,15 (d,

III), 4,97 (d, 111), 4,30 (m, 211), 3,73 (t, III),

3,57 (dd, III), 3,02 (s, 311), — 2,6 (111), 2,49 (s, 311), 2,37 (s, 311), 2,2 (111), 2,18 (s, 311),

gi; 2,03 (d, 311), 2,01 (s, 311), 1,54 (d, 311), 1,42

(d, 311), 0,9G (s, 311).