195827. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acilezett foszfolipidek elválasztására, az ilyeneket tartalmazó foszfatidilkolin termékekből
2 195827 3 A találmány új eljárásra vonatkozik, amellyel acilezett foazfolipideket, különösen acilezett foszfatidil-etanol-amint és adott esetben olajat lehet elkülöníteni az említett komponenseket tartalmazó, foszfatidil-kolinlermékekből, szilikagélen végzett kroraatografálással, nagytisztaságú foszfatidil-kolin előállítása mellett. Ismertek a kereskedelemben az olyan foszfatidil-kolin-lermékek, melyek acilezett foazfolipideket, különösen acilezett foBzfatidil-etanol-smint tartalmaznak és amelyeket emulgeátorként használnak (1 492 974 számú, 1 543 937 számú német szövetségi köztársaságban nyilvánossógrahozatali iratok). Az ilyen termékeket úgy kapják, hogy foszfatidil-etanol-amint tartalmazó természetes foszfatid-keverékeket például ecetsavanhidriddel kezelnek magasabb hőmérsékleten (lásd például: 1 812 204 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírás, 2 147 327 számú német szövetségi kőztársaságbeli nyilvánosságrahozatali irat, 3 359 201 és 3 704 254 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások). Az acilezést egyébként más acilezószerekkel is el lehet végezni. Foszfatidil-kolint jelentős mennyiségben használnak fel a gyógyszeriparban. Ilyen alkalmazási célra nagytisztaságú foszfatidil-kolin szükséges. Különösen fontos, hogy a foszfatidil-kolin a természetes foszfatid-keverékben jelenlévő mono-, di és trigliceridektöl (olaj), valamint az acilezett foszfalidil-etanol-aminoktól, vagy a jelenlévő nem acilezett foszfatidil-etanol-aminoktól mentes legyen. A foszfatidil-etanol-aminokat tartalmazó természetes foszfatid-keverékek acilezését már alkalmazták olaj és foszfatidil-etanol-amin foszfatidil-kolintól való elválasztására [lásd: Fett, Seifen, Anstrichmittel, 73, (1971), 643-651. oldal). Ennek Borán azt a körülményt hasznosították, hogy a foszfatidil-kolin és a foszfatidil-etanol-amin acetonban oldhatatlan, míg az olaj és az acilezett foszfatidil-etanol-amin acetonban oldódik, és ily módon az olaj és az acilezett alakban jelenlévő foszfatidil-etanol-amin az oldhatatlan foszfatidil-kolintól extrahálással elkülöníthető. Ennek az eljárásnak azonban az a hátránya, hogy ezen folyamat során azt acetonból, mint ismeretes, kis mennyiségben acetonsorbeli termékek, mint mezitil-oxid, diaceton-alkohol, foron, stb. keletkeznek, amelyek mérgezőek és ezért az ilyen úton nyert foszfatidilkolinból, gyógyszerészeti felhasználás esetén, ezeket el kell távolítani; ezeknek a mérgező és jellemzően sajátos szaguk miatt zavaró anyagoknak az eltávolítása azonban rendkívül költséges, sót, részben nem is valósítható meg. Ezenkívül az acetonos extrahálós a peroxidok növekedésével is jár, melyeknek hátrányos fiziológiai hatása ismert. Az eljárás további hátránya, hogy az ecetsavanhidriddel való acetilezés a foBzfatidil-etanol-amin kettős jellege miatt, továbbá a reakció folyamán keletkezett ecetsav. miatt, mely az aminocsoportol sóképződós közben ammóniumcsoporttá alakítja, nem tökéletesen megy végbe, ugyanakkor a tökéletes acilezés biztosítása céljából protonakceptorként alkalmazott, lei— cier amin fiziológiásán nem közömbös. Ezen túlmenően ennél az eljárásnál a foszfatidil-kolin kiséróanyagainak az elkülönítése is igen költséges. Jelen találmány célkitűzése az volt, hogy egyszerűsített eljárást biztosítson acetilezelt foszfolipidek, így acilezett foszfatidil-etanol-ainin és adott esetben jelenlévő nem acilezett foszfatidil-etanol-amin és/vagy olaj elkülönítésére az ezeket tartalmazó foszfatidil-kolinból, nagytisztaságú foszfatidil-kolin kinyerése mellett. Az acilezett foszfolipideknek és adott esetben jelenlévő, nem acilezett foszfolipideknek és/vagy olajnak az ezeket tartalmazó foszfatidil-kolin-termékekböl való elkülönítésére szolgáló találmány szerinti eljárást az jellemzi, hogy a foszfatidil-kolin-terméket, az adott esetben jelenlévő oldhatatlan alkotók elkülönítése mellett, legfeljebb 15 térfogatszázalék vizet tartalmazó, 1-4 szénatomos alkanolban oldjuk, ezt az oldatot 60-90 °C tartományú megnövelt hőmérsékleten kovasavgél-oszlopra visszük, ezen a hőmérsékleten egy, adott esetben legfeljebb 15 térfogatszázalék vizet tartalmazó 1-4 szénatomos alkanollal az oszlopot eluáljuk és ennek során összegyűjtjük az elkülönítendő termékeket tartalmazó elöfrakciót, valamint ettől elkülönítetten a tiszta foszfatidil-kolint tartalmazó maradékfrakciót ób a maradék frakcióból az oldószert szokásos módon eltávolítjuk. A feladatot kovasavgél-oszlopon és annak eluálását célszerűen 60-70 °C hőmérsékleten végezzük. Eluálószerként előnyösen használt oldószert alkalmazunk, ami az eljárást különösen egyszerűvé teszi. Előnyösen használható 1-4 szénalomos alkanoi az etanol. Az elöfrakció mennyisége függ a felhasznált foszfatidil-kolin-terméktől. Egyszerű analitikai eljárással megállapítható, hogy az eluátum mikortól kezdve mentes a foszfatidil-kolin elkülönítendő kísérőanyagaitól és, hogy gyakorlatilag mór cBak foszfatidil-kolinl tartalmaz. Tapasztalat Bzerinl az elöfrakció az eluátum össztérfogatának 20-25%-át teszi ki. Kívánt esetben az oldószer az elöfrakcióból is elkülöníthető és az így kapott terméket, vagy az elöfrakciót oldószerrel együtt, továbbfeldolgozásra lehet felhasználni. Kovasavgélként kromatográfiai célra használatos, különböző szemcsenagyságú terméket vagy Bajtolt kovasavgélt használhatunk, amely aktivált vagy dezaktiváll lehel. Célszerűen semleges kovasavgélt alkalmazunk. A találmány szerinti eljárás normál nyomáson vagy túlnyomáson végezhető. Egészen 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
