195825. lajstromszámú szabadalom • Eljárás olaj és/vagy foszfatidil-etanolamin elválasztására ilyeneket tartalmazó alkoholos foszfatidilkolin termékekből
4 195825 5 Jelen találmány céljául tűzte ki olyan eljárás kidolgozását, amellyel olaj és/vagy foszfatidil-etanol-amin elkülöníthető az ezeket tartalmazó, alkoholban oldódó foszfatidil-kolin-termékekből, olyan foszfatidil-kolin termékek előállítása mellett, amelyek ezen szennyeződések egyikót vagy mindkettőt meghatározott, a kereskedelemben szokványos foszfatidil-kolin-nyerstermókhez képest csökkentett mennyiségben tartalmazzák, attól függően, amint azt az élelmiszeripari vagy kozmetikai iparban igénylik. Azt tapasztaltuk, hogy az alkoholban oldódó, olaj és/vagy foszfatidil-etanol-amin tartalmú foBzfatid frakciókból kovasavgéles oszlop-kromatografálással, magasabb hőmérsékleten ilyen fajta foszfatidil-kolin termékeket elő lehet állítani. A találmány szerinti eljárást, mely olaj és/vagy foszfatidil-etanol-amin elkülönítésére irányul, ezeket tartalmazó, alkoholban oldódó foszfatidil-kolin termékeket tartalmazó szója-foszfatidokból, olajat és foszfatidil-etanol-amint meghatározott, csökkentett mennyiségben tartalmazó foszfatidil-kolin előállítása mellett, az jellemzi, hogy az olajat és/vagy foszfatidil-etanol-amint tartalmazó, alkoholban oldódó foszfatidil-kolin-termék 1-4 szénatomos alkanolos oldatát, adott esetben 15 tömegszázalékig terjedő mennyiségű vízzel keverve, magasabb, 60 °C alatti, így 30-60 ®C hőmérsékleten kovasavgél-oszlopra visszük, az oszlopot ezen a hőmérsékleten 1-4 szénatomos alkanollal eluáljuk és ennek során előír akciót különítettünk el, amely az olajat és/vagy foszfatidil-etanol-amint olyan mértékben tartalmazza, amennyivel a foszfatidil-kolin olaj- és/vagy foszfatidil-etanol-amin-tartalmát csökkenteni kell és ettől elkülönítve a főfrakciót összegyűjtjük és az oldószert a főfrakcióból szokásos módon eltávolítjuk. Eluálószerként előnyösen az oldószerként alkalmazott anyagot használhatjuk, ami az eljárást különösen leegyszerűsíti. A legelőnyösebben felhasználható 1-4 szénatomos alkanol az etanol. Az előfrakció mennyisége függ az alkalmazott foszfatidil-kolin terméktől, valamint az olaj és/vagy foszfatidil-etanol-amin kívánt, elkülönítendő mennyiségétől. Az előfrakcióban vannak az - ugyancsak a felhasznált foszfatidil-kolin-terméktól függő - egyéb, szokásosan jelenlévő kÍBérőanyagok is, így a szterinek, szterinszármazékok, glikolipidek és foszfolipidek, amelyek továbbfeldolgozásra kerülhetnek. Egyszerű analitikai módszerekkel meg lehet állapítani, hogy a . mindenkori megnövelt hőmérsékleten mikortól kezdődően tartalmazza az előfrakció azt a mennyiséget, amennyivel a foszfatidil-kolinban - a kiindulási foszfatidil-kolin termékhez képest - a mennyiség lecsökkent, és így az ezt követő, főfrakciókónt keletkező eluátum összmennyisége az oldószer eltávolítása után olyan foszfatidil-kolin terméket eredményez, amely az olajat és/ /vagy foszfatidil-etanol-amint a kívánt mértékben csökkentett mennyiségben tartalmazza a kiindulási termékhez képest. Kovasavgélként a kromatografáláshoz szokásos termékeket használhatjuk, különböző szemcsenagyságú vagy sajtolt kovasavgélt is, mely aktivált vagy dezaktivált lehet. Előnyösen semleges kovaBavgólt használunk. A találmány szerinti eljárÓB normál nyomáson vagy túlnyomáson végezhető. A találmány szerinti eljárás külön előnye, hogy a kovasavgélt a kromatografálás után újra fel lehet használni. A fófrakció utón mór csak kis mennyiségű foszfatidil-kolin marad viszsza. További előnye a kovasavgélnek az adszorpcióé anyag nagy terhelhetősége. így oszlop-kromatográfiás szétválasztásnál 100 rész kovasavgéllel körülbelül 60 rész szilárd anyagot lehet az alkoholos foszfatid-frakcióból elkülöníteni. Példák Analízis A foszfatidokat vékonyréteg-kromatográfiás úton elemezzük. Az olajtartalmat egyenlőnek vettük a dializálhatókkal. A vizet Karl Fischer szerint, a maradék elanoltartalmat gózkromatografás analízissel határoztuk meg. Oszlop-kromatografáláa Kettős köpenyű kromatografóló oszlopot (belső átmérő 4,5 cm, magasság 37 cm) használunk. Az oszlop elé hőcserélőt kapcsolunk, hogy az oszlop és a felhordás hőmérsékletét egyenlővé tudjuk tenni. Az oszlopot 200 g kovasavgélnek (Merck) a mindenkori oldószerrel készített szuszpenziójával töltjük meg. A kromatografálás után a kovasavgélt újra felhasználhatjuk. Kiindulási anyag Szója-nyersfoBzfatidot 35 °C hőmérsékleten 95 tfX-os etanollal 1:2,5 tömegarányban (nyersfoszfatid:etanol) extrahálunk. Az üledéket szobahőmérsékleten elkülönítjük a felette lévő etanol-fázistól. Az etanol-fázist bepároljuk. Az így kapott szilárdanyag összetétele a következő: foszfatidil-kolin (PC): 43% foszfatidil-etanol-amin (PE): 12% olaj: 21% egyéb: 24% Ezt a sziládanyagot használjuk fel az 1. példában. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
