195802. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-ciklopropil-6-fluor-7-(pirrol-1-il)-1,4-dihidro-3-karboxi-4-oxo kinolin és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1 05KOS

6

lyatás mellett melegítünk, majd h-hütjük, ? n .sósavval megsavanyítjuk, a kapott csapadékot szűrjük, vízzel mossuk, szárítjuk. A kapott anyagot acetonitrilbő] át kristályosít va 0,16 g terméket nyerünk, o.p-ju 258-260 ®C.

Spektroszkópiai adniuk:

Proteus morganii CHSP-16 Pseudomonas aeruginosa 25115 Pseudomonas aeruginosa ADSA 47 Salmonella typhimurium AMES 98 Salmonella typhimurium AMES 100 Serratia marcesoens ATCC 13880 Shigella floxnerii

■H NMR <5 (DMSO-dt): 1,4 (m, 111); 4,0 (m, 111):

6,4 (m, 2H); 7,35 (m, 211); 8,2 (d, 111,

J = 12 Hz); 8,35 (d, 1H, .1 = 6 Hz); 8,8 (s,

Hi); 14,5 (s, 1H).

IR (KBr): 1725, 1625, 14G0 cnr'.

Antibakteriális hatás vizsgálata

A vizsgálatokat a következő irodalmi helyeken leírtak Bzerint végeztük: G. L. Daquet és Y. A. Chabbect, Techiques an bacteriologia, 3. kötet, Flammarion Medicines Sciences, Párizs, 1972, és W. B. Hitgo és A. D. Russell, Pharmaceutical Microbiology, Blackwell Scientific Publications, London, 1977.

Tenyészközeg és oldószer:

Antibiotikus agar no. 1 (Oxoid CM 327) Tripton-szója húsleves (Oxoid CM 129) Ringer-féle 1/4 fiziológiás oldat (Oxoid BR 52)

Dextróz agar (BBL-11165)

0,1 n NaOH

Mikroorganizmusok:

Bacillus subtilis ATCC 6633 Micrococcus flavus ATCC 10240 Sarcina lutea ATCC 9341 Staphylococcus aureus ATCC 5488/23 Staphylococcus aureus ATCC 25178 Streptococcus faecalis ATCC 10541 Enterobacter aerogenes ATCC 15038 Enterobacter cloacae CHSP-20 Escherichia coli ATCC 10536 Enscherichia coli R-1513 Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 Citrobacter frundii ATCC 11606 Proteus mirabilis ATCC 4675

Inokulum készítése:

10

Mindegyik mikroorganizmusból kikent tenyészetet készítünk no. 1 antibiotikus agaron és 20 órán át 37 "C-on inkubáljuk. Ekkor kacsnyi mennyiséget tripton-szója^ -húslevesben tenyésztünk 20 órán át 37 “C- on, majd 1 /4-szeresére hígítjuk Ringer-féle fiziológiás oldattal, ily módon mindegyik mikroorganizmusból 105 ufc/ml/standard (kolóniái egység/ml) szuszpenziót kapunk.

20

(I) általános képlet vizsgálandó vegyülelet tartalmazó közeg készítése

Megömlesztett és 50 °C-on tartott dext^ rózzal 1000 qg/ml töménységű 0,1 n NaOH-dal készíteti oldatot, úgy hígítunk, hogy a következő hígítás) sort nyerjük: 64-32-16-8-4-2-1-0,5-0,25-0,125 pg vegyület/inl közeg.

Ezután a vizsgálandó vegyület minden koncentrációjú oldatából 10 ml-t 10 cm átmérőjű Petri csészébe teszünk, (minden fenti mikroorganizmust vizsgálunk).

Miután a minták lehűltek mindegyik csészébe 0,4 ml inokulumot teszünk, Drigalßki hurokkal szétoszlatjuk és a felülűszót összegyűjtjük. A beoltott csészéket 37 °C-on 20 órán át inkubáljuk.

40

Eredmények

A kapott eredményeket az I táblázatban foglaljuk össze, amelyek azt mutatják, hogy 45 a találmány szerinti eljárással nyert új vegyület hatása az összes vizsgált baktérium esetében nagyobb volt, mint a nalidixinsav hatása.

1. Táblázat

.In vitro" nyert MIC értékek összehasonlítva nalidixinsavval A koncentrációértékeket ug/ml-ben adtuk meg

Mikroorganizmus

1.

példa

2.

példa

3,

példa

4.

példa

5.

példa

6.

példa

7.

példa

8.

példa

Nalidixinsav

Bacillus subtilis ATCC 6633

0.125

<0.062

<0.002

0.125

0.125

£0.031

£0.062

£0.062

1

Micrococcus flavus ATCC 10240

4

16

4

1

8

1

4

2

128

Találménj

szerinti

vegyület

0.25

0.5

4