195658. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diszulfidcsopotot tartalmazó, szubsztituált 7-oxi-mitozánok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 195 658 kát kívánunk előállítani, amelyekben Alk jelentése etiléntől eltérő csoport, mint például trimetiléncsoport, vagy propiléncsoport, a megfelelő (III) általános képletű triazént alkalmazzuk az 1. reakcióvázlat szerinti eljárásban az (Ib) általános képlctű diszulfid-mitozánok előállítására, ahol az általános képletben Alk jelentése a fentiekben megadott. Az alábbiakban két általános szintetikus eljárást írunk le a lipofil és a hidrofil (la) általános képletű mitozánok előállítására. Az A. általános eljárásban (la) általános képletű lipofil vagy gyengén oldható diszulfidot állítunk elő, míg a B. általános eljárásban (la) általános képletű, vízoldható diszulfidokat nyerünk, amelyeket előnyösen nátriumsók vagy diionos sóik formájában izolálunk. Általában előnyösen az (Ib) általános képletű — Alk jelentése etiléncsoport — mitozánra vonatkoztatva legalább egy ekvivalens mennyiségű R-SH merkaptánt alkalmazunk, és a reakciót az R-SII merkaptánra vonatkoztatva körülbelül egy ekvivalens bázis jelenlétében hajtjuk végre. Előnyösen alkalmazható bázisok a tercier aminok, mint például a trietil-amin, az N-metil-morfolin, az N-mctil-pipcridin, a piridin, a 2,6-lutidin, valamint szervetlen bázisok, mint például a nátrium-hidrogen-karbonát, a kálium-karbonát, a kálium-hidrogén -karbonát és hasonlók. A reakcióban alkalmazható, a kiindulási (Ib) általános képletű vegyületet. és a R-SII merkaptánt oldó inert oldószerek a kis szénatomszámú alkanolok, a kis szénatomszámú alkanoil-(kis szénalomszámú)-alkil-észterck, a kis szénatomszámú alifás ketonok, a ciklusos alifás éterek, a kis szénatomszámú polihalogénezett alifás szénhidrogének és a víz. A szerves oldószerek maximálisan 8 szénatomot tartalmazhatnak, de előnyösen azok alkalmazhatók, amelyek forráspontja 100 °C alatti. Ilyen előnyösen alkalmazható oldószer a diklórmetán, a metanol, az aceton, a víz és ezek keverékei. A reakciót visszafolyatás melletti forrás hőmérsékletén vagy 60 °C alatti hőmérsékleten hajthatjuk végre. A reakciót előnyösen szobahőmérsékleten vagy ez alatti hőmérsékleten, például 0-25 °C közötti hőmérsékleten végezzük. A fenti reakciókörülmények általában alkalmazhatók más (la) és (Ib) általános képletű diszulfid-mitozánok előállítása során is, a 2. reakcióvázlatnak megfelelő eljárás során is. A nitropiridil-tiolok (V) általános képletű Bunte-só vagy (VI) általános képletű szulfenil-tiokarbonát alkalmazásával a találmány szerinti eljárásban (IV) általános képletű intermedierekké alakíthatók és ezután a találmány szerinti eljárással a kívánt végtermékké konvertálhatók. A találmány szerinti előnyös eljárásban a megadott tiolok túlnyomó része az (Ib) általános képletű mitozánokkal reagáltatható a kívánt (la) általános képletű termékké. Megjegyzendő, hogy a találmány szerinti eljárás egyetlen kikötése a benne alkalmazható tiolokkal szemben, hogy azok terminális primer aminocsoportot ne tartalmazzanak, mert termék-keverékhez vezethetnek, valamint nem lehetnek heteroaromás tiolok, mert azok az (Ib) általános képletű vegyülctekkel általában nem reagálnak. A találmány szerinti eljárásban alkalmazható tiolok például a képletrajzokon feltüntetett (XX)-(XXVIII) képletű vegyülctek. Az (1) általános képlctű, a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek daganatellenes terápiás alkalmazhatóságát in vivo vizsgálati eljárással mutattuk ki, amelynek során a vegyületeket különböző dózisban P-388 leukémiával, vagy B16 melanonával fertőzött egereknek adagoltuk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek baktériumellenes hatással rendelkeznek gram-pozitív és gram-negatív mikroorganizmusokkal szemben is, ugyanolyan hatásmechanizmussal, mint amilyent a természetesen előforuló mitomicinek esetében kimutattak. így emberek és állatok esetében baktériumos fertőzésekkel szembeni potenciális terápiás szerek lehetnek. P-388 cg ér-lei i k á tiia-ellei i es Itatás ■ Az I. táblázatban összefoglaljuk azoknak a laboratóriumi vizsgálatoknak az eredményeit, amelyeket intraperitoneálisan 106 P-388 egér-leukcmia-ascit-sejtet tartalmazó inokuiurnmal beoltott, és a találmány szerinti eljárással előállított (í) általános képletű hatóanyag, illetve mitomicin-C különböző dózisaival kezelt egerekkel kaptunk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket intraperitoneális injekció formájában adagoltuk. Minden dózis esetében hat egérből álló csoportokat kezeltünk és az inokulálás utáni napon egy dózist alkalmaztunk. A kísérlet-sorozatokban 10 egérből álló kontroll csoportokat fiziológiás sóoidattal kezeltünk. A mitomicin-C-vei kezelt állatcsoportot pozitív kontrollként alkalmaztuk. 30 napon át protokollt vezettünk, amelyben az egyes csoportok átlagos túlélési értékét adtuk meg az egyes napokon és a túlélők számát a 30. napon. Az egereket a kezelés előtt és a kezelés utáni 6. napon lemértük. A tömegváltozást tekintettük a toxieitás mértékének. 20 gramm tömegű egereket alkalmaztunk és körülbelül 2 g tömegcsökkenést nem tekintettünk túlzottnak. Az eredményeket % T/C értékben adjuk meg, amely a kezelt csoport (T) átlagos túlélési száma a fiziológiás sóoldattal kezelt kontroll csoport túlélési számára (C) vonatkoztatva százalékban kifejezve. A sóoidattal kezelt kontroll állatok általában 9 napon belül elhullottak. A „maximális hatás” értékét a táblázatban % T/C értékben adjuk meg és megadjuk az. ezt kiváltó dózis értékét is. A zárójelben megadott értékek a mitomicin-C pozitív kontrollal azonos kísérletekben elért eredmények. így a találmány szerinti eljárással előállított anyagok és a mitomicin-C között a hatás vonatkozásában összehasonlítást tehetünk. A % T/C értékben minimális hatásnak a 125-t tekintettük. A minimális hatásos dózis a táblázatban az a dózis, amely 125% T/C értéket eredményez. Az „átlagos töinegváltozás” alatt megadott értékek a maximális hatású dózis adagolása és a minimális hatásos dózis adagolása esetében tapasztalt átlagos tömegváltozások az egyes egerek esetében. 2 • 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 4
