195480. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenil nonatetraénsav-származékok és azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
31 195 480 32 42. példa A-vcgyület hatása impregnált szivacs granuloma teszten patkányon Állatok: AHH/R nősténypatkányokat (PVG ere- 5 det) alkalmazunk; induló testsúly 120— 140 g. Anyagok: Szivacs készítmény. Cellulózi szivacs szövetből („Wettex” ) 6,5 mm átmérőjű szemcséket készítünk és minden szemesé- 10 re 0,1 ml szuszpenziót juttatunk, amely 0,5 mg/ml hővel elölt M. tubcrculosist (humán C, DT és PN törzsek) tartalmaz, steril nátriuin-kiorid-oídatban. A szemcséket szárítjuk, megmérjük az autoklávoz- 15 zuk. Módszer: Az állatokat véletlen elosztásban ötös csoportokba soroljuk és a teszt-vegyületek naponta történő beadását megkezdjük. Az 5. dózis beadása után a patkányo- 20 kát Sagatalial (45 mg/kg i.p.) érzéstelenítjük, hátukon a szőrzetet leborotváljuk és minden patkányba a hát középvonalán ejtett kis bevágást alkalmazva szubkutáns 2—2 szemcsét transzplantálunk (egy-egy oldalra). A vágást lczáijuk és a patkányokat az anesztéziából magukhoz térni hagyjuk. A patkányokat hét nappal az implantáció után leüljük, a szemcséket eltávolítjuk, a külső szövetektől megszabadítjuk és leméijük. Minden szemcsét 4 ml-es desztillált víz aliquot részbe helyezzük, finom ollóval felvágjuk és szonifikáljuk. Centrifugálás után a felül elhelyezkedő folyadék Na+ és K+ tartalmát lángfotometriás úton meghatározzuk. Minden patkányból kivágjuk a mellékvese- és csecsemőmirigyet, a mirigyeket lemérjük és az alsó hátsó végtagokat a sípcsont törőszilárdságának meghatározása céljából eltávolítjuk. A kísérlet ideje alatt a testsúlyokat feljegyezzük. Eredmények: Az eredményeket a VI. táblázat tartalmazza VI. táblázat A-vcgyület, etretindt és dexamethansone hatása impregnált szivacs granuloma tesztben, patkányon Kezelés Dózis Patká-Granuloma %-os c sökkenése %-os változása Testsúly válmg/kg'1 nyok Nedves Na K+ mellékvese csecsemősípcsont tozás száma súly súly mirigy törőszi(g) súly lárdság Kontroll-8-+9,6 ±1,3 A-vcgyület 15 p.o. 5 15,1xx 14,5 xx 6,9XX + 17,6XX-4,4 4,0 +7,2 ±0,74 45 p.o. 5 10,8 11 0,8 +29,0XX +14,3-1,12 +11,4 ±98 Etrctinát 15 p.o. 4 2,7 5,9-3,9 +22,9XX + 15,2 4.6 +13,3 ±2,6 Dexamethasone 0,5 s.e. 5 65,5XXX ^ j '■jXXX ^^ -^xxx 49,5XXX-79xxx-11,5X-10,2 ±1,59 ---------------. x p = <"0,05; xx p= <0,02; XXX p =<0.01 Az eredmények értékelése 45 Minden paraméterre kiszámítjuk az ,.átlag ± szórás” értéket és a kontroli-értékekből való eltérést aStudentféle „t" teszttel (kétfarkas) határozzuk meg. A granuloma súly, Na+ és K+ tartalom százalékos csökkenését, 50 valamint a mellékvese- és csecsemőmirigy, testsúly és sípcsont-töró'szilárdság százalékos változását meghatározzuk. Megjegyzés: két kontroll patkány és 1 etrctináttal ke- 55 zeit patkány az aneszthézia alatt elpusztult Állatok: a kísérlethez Charles River törzsbe tartozó hím Lewis patkányokat alkalmazunk. 50 Anyagok: hővel elölt szárított Mycobacterium butyricum. Módszer: Adjuváns arthritist idézünk elő oly módon, hogy az állatok farktövébe 0,1 ml adjuvánst fecskendezünk (hővel elölt, szá- 55 rított Mycobacterium butyricum szuszpenziója, 0,5% tömeg/térfogat, 0,2% digitonint tartalmazó nehéz ásványolaj-frakcióval képezett szuszpenziója). Az arthritist 21 nap alatt kifejlődni hagyjuk, majd mindkét hátsó mancs térfogatát higany pietizmográffal megmérjük. A patkányokat nyolcas csoportokba osztjuk (azonos átlagos mancstérfogat), majd az állatokat A-vegyülettel, indomethacinnal (referens hatóanyag) vagy hordozóanyaggal 7 napon át kezeljük. A kezelési időszak végén a gyulladásgáíló hatás meghatározása céljából mindkét hátsó mancs térfogatát újra megmérjük. A testsúlyváltozást nyomon követjük és a kísérlet végén a plazma fibrinogen meghatározás céljából plazmát gyűjtünk (Exner és tsai: Amer. J. Clin. Path. 71, 521-527). Eredmények: Az eredményeket a VII. táblázatban foglaljuk össze. 17
