195245. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés sejthalmazból meghatározott biológiai sejtek kiválasztására, a kiválasztott sejtek legalább egy tulajdonságának megfigyelésére
5 195245 7B. ábra a 7A. ábra szerinti átfolyáskamra keresztmetszete vizsgálat közben, a 8. ábra a 7A. és 7B. ábra szerinti átfolyáskamra egy módosított változata keresztmetszetben, a 9. ábra a 2A. ... 2D. ábrán bemutatott tartóeszköz és a 7A., illetve 7B. ábra szerinti átfolyáskamra illesztése elemzőrendszerben, a 10. ábra a 6A., 6B. és 6C. ábra szerinti tartóeszközt befogadó elválasztó egység sejtekkel kitöltött hordozóeszközzel perspektivikus nézetben, a 11. ábra a 10. ábrán bemutatott elválasztó egység egy részletének keresztmetszete, a 12A. ábra a 9. ábra szerinti tartóeszközt tartalmazó elválasztó egység, amellyel sejtek a hordozóeszközbe juttathatók, a 12B. ábra a 12A. ábra szerinti elválasztó egység egy részlete keresztmetszetben, a 13A. ábra a I2A. és 12B. ábra szerinti elválasztó egység együttműködő vérbeadagoló eszköz perspektivikus néze te, a 13B. ábra a 13A. ábra szerinti vérbeadagoló eszköz egyik kiviteli alakjában egy részlet keresztmetszete, a 13C. ábra a 13A. ábra szerinti vérbeadagoló eszköz másik kiviteli alakjában egy részlet keresztmetszete, a 14. ábra a 12A. és 12B. ábra szerinti elválasztó egységgel együttműködő vérbeadagoló eszköz egy további kiviteli alakjának keresztmetszete, a 15A. ábra klinikai alkalmazásra kidolgozott többhordozós rendszer vázlata perspektivikus nézetben, ahol az elválasztás és a mérés kombinált módon végezhető, a 15B. ábra a 15A. ábra szerinti rendszer egy részletének oldalnézete, részben keresztmetszetben, a 16. ábra a találmány szerinti hordozóval kialakított optikai-diagnosztikai rendszer vázlatos képe, míg a 17. ábra kiválasztott sejtek megfogására vagy szelektív elengedésére alkalmas sejthordozó eszköz perspektivikus nézete. A találmányt először, lényegében korlátozása nélkül, biológiai folyadékban jelenlevő, adott típusú sejtek populációjának más sejtpopulációktól történő elválasztására és elemzésére irányuló eljárás kapcsán írjuk le. A kiválasztott populációból a találmány értelmében még további részpopuláció emelhető ki kívánt szempontok szerint. A találmányt emberi vérben jelenlevő lymphociták egy részpopulációjának kiválasztása és elemzése alapján ismertetjük, amikoris a lympocitákat a jelenlevő egyéb típusú sejtektől elválasztjuk, majd tesztvizsgálatnak vetjük alá, hogy a 4 részpopulációt vagy részcsoportot a lymphociták csoportján belül azonosíthassuk. L. Cerceck és B. Cerceck a European Journal of Cancer (17, 1981, 167...171. oldal és 13, 1977, 903...915. oldal), valamint a Biophysical Journal (23, 1978, 395...405. oldal) hasábjain közölt cikkeikben elemzik élő sejtekhez kötött fluoreszcein gerjesztési és emissziós-polarizációs spektrumait, abban a vonatkozásban, hogy mennyire alkalmazhatók a citoplazmikus mátrix struktúráltságában (SCM) bekövetkező változásokkal kapcsolatos jelenségek vizsgálata a vérképző szervek betegségeinek diagnosztizálásában. Az említett cikkek szerzői az ún. SCM-tesztvizsgálat elvégzését javasolták, miután a lymphocitákat egy meghatározott tulajdonság szerint el kívánják választani a lymphociták egy másik csoportjától, valamint a többi sejttől a bevezetőben említett gradienstechnika alkalmazásával. Mint már a bevezetőben is szó volt róla, a gradienstechnika alkalmazása nem hozza a kívánt eredményeket. Először is igen időigényes, amint az jól ismert a téma szakemberei előtt is kitűnik az említett cikkekből. Másodszor," mint az említett cikkek szerzői is megírják, a. végeredményben kapott sejtek nemcsak a vizsgálat szempontjából érdekes csoportba tartoznak, hanem más lymphocitákkal szennyezettek, amelyek száma igen magas, eléri a kiválasztott sejtek 50%-át. Ennek megfelelően az elválasztott sejtek által adott válaszokat a stimuláló hatások szerint elemezve csak korlátosán figyelembe vehető eredmények adódnak. Harmadszor és ez minden ismert stimulálás, valamint válaszmérés legnagyobb hibája, hogy az eredmények a sejtek egy nagyobb csoportjára vonatkoznak és belőlük nem lehet a kívánt tulajdonságú, típusú sejtekre vonatkozó egyedi eredményeket kiemelni. Az is nyilvánvaló, hogy a sejtről-sejtre végzett elemzés sokkal megbízhatóbb információt ad,és így az aktuálisan kutatott jelenség biológiai következményeinek megértése elmélyíthető. A jelen találmány értelmében éppen az ilyen elemzések igen gyors és pontos elvégzése válik lehetségessé. Ebben az esetben mind a sebesség, mind a pontosság rendkívül fontos, tekintetbe véve azoknak a rákdiagnosztikai tesztvizsgálatoknak a lehetséges számát, amit esetleg szükséges elvégezni. Hasonlóképpen fontos, hogy a találmány, mind az eljárás, mind pedig a berendezés lehetőséget teremt a biológiai sejtek oly módon történő elválasztására egymástól, aminek révén a kiválasztott sejtek ismert címre kerülnek, ahova újra vissza lehet térni megismételendő sejtvizsgálatok vagy stimulációk elvégzése céljából, miután egy elemzési folyamat befejeződött. összefoglalva, a jelen találmány'értelmében sejtek, így például vérben levő lymphociták hogy száma osztható szét oly módon. 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
