195245. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés sejthalmazból meghatározott biológiai sejtek kiválasztására, a kiválasztott sejtek legalább egy tulajdonságának megfigyelésére
195245 den 101 vezetékben az elektromos potenciál szelektív szabályozására. A 100 sejt hordozóhoz a kiválasztott sejtek megtartására minden 101 vezetéket ugyanolyan potenciálértéken tarthatunk, amely ellenkező előjelű, mint a sejtek töltéspontenciálja és így vonzóerőt biztosítunk. Ha szükség van valamely A helyen levő sejt eltávolítására (17. ábra), a szomszédos Vx2, Vrs, V^i és Vy2 vezetékek együttesét megfelelő potenciálra kapcsoljuk, és ily módon elérhetjük, hogy az A helyen levő sejt a 100 sejthordozóból kiessen. A 100 sejthordozó az integrált áramkörök gyártásából jól ismert technikákkal állítható elő. Ionos oldatok, tehát például a PBS-oldat esetében a mérések során figyelembe kel! venni, hogy lehetségesek olyan felületi töltések, amelyek nemkívánatos befolyást gyakorolnak. Ebből a célból a 100 sejthordozó megfelelő módon szigetelő réteggel látható el, és a csatornába kivezetett vezetékeket tartalmaz. Ennek hatására az ionok semlegesítődnek, a felületen íonbevonat nem képződik, és így előnytelen potenciálváltozások nem alakulhatnak ki. Egy másik lehetőség olyan nem-ionos szerves oldatok alkalmazása, amelyek az eljárásnak ebben a szakaszában a 100 sejthordozó munkáját nem befolyásolják kedvezőtlenül. Ilyen oldatok készülhetnek például a lipidekből. A találmány szerinti eljárással lehetővé válik egy-egy sejt szelektív kiválasztása a többi sejt közül. Ez igen előnyös a klinikai eljárások során, a klónozás folyamatában. Kiválasztott sejtekből lehet kiónokat gyártani, és ehhez a sejteket a találmány szerinti eljárást alkalmazva kiválasztott kritériumok alapján lehet kiemelni. így például jól ismert, hogy bizonyos betegségektől, például bőrráktól szenvedő személyek teste különleges azonosítható sejteket állít elő, amelyek feladata a betegség legyőzése vagy leküzdése a kóros sejtek elpusztításával. A sikerhez azonban az kell, hogy ezekből a gyilkos sejtekből megfelelő mennyiségű legyen a beteg szervezetében. A találmány szerinti eljárás alkalmazásával a vér, a nyiroknedvek és más testnedvek felhasználhatók ilyen gyilkos sejtek nagyobb számú előállítására, ha egy-egy gyilkos sejt belőlük kiválasztható. Az eddigiekben leírt kiválasztási eljárást alkalmazva a gyilkos sejteket kiemeljük a többi sejtek közül, majd a jól ismert, alkalmas sejtszaporításos eljárások segítségével szaporítjuk őket, és nagyobb mennyiségben visszajuttatjuk a beteg szervezetébe, aki így saját szervezetétől nem ide.gen sejteket kap a betegség legyőzése céljából. Ebben az esetben semmiféle kilökődési reakciótól nem kell tartani, hiszen a sejtek a beteg szervezetéből származó sejtekkel azonosak. így tehát a találmány szerinti eljá27 rás alkalmas lehet a beteg szervezetbe olyan sejtek visszavezetésére, amellyel a fertőzés, betegség leküzdhető. Ki kell emelni, hogy bár az eddigiekben elmondottak szerint a vizsgálathoz szükséges sejtek kiválasztása a sejthordozón levő sejtek közül akár a kiválasztott sejtek kiemelésével és a többi sejteknek a sejthordozón való meghagyásával akár -pedig a sejthordozóról a vizsgálatok szempontjából érdektelen sejtek eltávolításával, és csak a szükséges sejteknek a sejthordozón való meghagyásával végezhető el, ha kívánatos, az elválasztás más módon is biztosítható, például úgy, hogy a vizsgálat szempontjából érdektelen sejteket a megfelelő nyílásokban a sejthordozón megöljük, és ily módon a nyílásokban csak a további vizsgálatokhoz szükséges sejtek maradnak. A sejteknek a nyílásokban történő, tehát, in situ megölése jól biztosítható lézersugárzással, amelyet meghatározott címeken levő sejtekre irányítunk. Természetesen hasonló vagy analóg eljárások is alkalmazhatók. A nyílásokban levő nagyobb sejtek vagy életképtelen sejtek úgy is tekinthetők, hogy azokat a sejthordozóból már eltávolítottuk vagy kiválasztottuk, mivel az életképtelen sejtek a vizsgálat szempontjából érdektelenek. Ennek megfelelően a sejtek eltávolítása a találmány értelmében a sejthordozóból való kiemelést vagy a sejtek in situ megölését is jelenti. Amikor a vizsgálat szempontjából érdekes sejt szaporításáról kell dönteni, lényeges lehet, hogy az többféle módon is elvégezhető: a) a szaporítandó sejteket eltávolítjuk a sejthordozóról, amely a vizsgálat szempontjából lényegtelen élő sejteket is tartalmaz; b) azokat a sejteket távolítjuk el a sejthordozóról, amelyek a vizsgálat szempontjából érdektelenek és ezután megfelelő módon ismert technikákkal a kiválasztott sejteket szaporítjuk; és c) megöljük azokat a sejteket, amelyek a vizsgálat szempontjából nem érdekesek, még amikor azok a sejthordozó nyílásaiban vannak és a kiválasztott sejteket in situ, vagyis a sejthordozó nyílásaiban szaporítjuk. Mivel a találmány alapelveit specifikus rendszerekkel, alkalmazásokkal és módszerekkel kapcsolatban írtuk le, nyilvánvalónak kell tekinteni, hogy a jelen leírás csak magyarázatul szolgálhat, és semmiféleképpen sem lehet a szabadalmi igény korlátozásának alapja. A biológiai kutatásban, a klinikai kezelésben és az ipari gyakorlatban a jelen találmány számos új alkalmazási lehetőséget teremt meg. Várható, és ezt az előzetes kísérletek kielégítő módon bizonyították, hogy vannak olyan optikai paraméterek, amelyek a sejtek ciklikus fázisaival kapcsolód-28 15 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
