195234. lajstromszámú szabadalom • Eljárás luteinizáló hormont felszabadító hormont antagonizáló hatású nonapeptid és dekapeptid hormonanalógok és e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
195234 Az elegyet szűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot vízben oldjuk és etanollal mossuk. A vizes fázis pH-ját ecetsavval 4-re állítjuk. A savas oldatot etil - -acetáttal mossuk. A terméket tartalmazó, vizes fázist anionos ioncserélő gyantával (AG-3 acetát, BioRad) kezeljük, majd szárazra pároljuk. A nyersterméket hidrofób kromatográfiás oszlopon, vezetjük át (Amberlite XAD-2, Rohm and Haas), és gradienselúciós eljárással eluáljuk, víz — 25%-os etanol gradienssel. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítve 2,7 g Na-Boc-N,N’-guanidino-etano-D-homoarginint kapunk, [a]» = —19,7° (c = 0,1 metanol). Hasonló eljárással, 2-metil-tio-2-imidazolin-hidrogén-jodid helyett S-met il-diet il-izotiokarb amid -hidrogén -jodidot, S-metil-dipropil-izotiokarbamid-hidrogén-jodidot, S-metil-dibutil-izotiokarbamid-hidrogén-jodidot, S-metil-dipentil-izotiokarbamid-hidrogén-jodidôt, vagy S-metil-dihexil-izotiokarbamid-hidrogén-jodidot használva az alábbi vegyületeket állítjuk elő: N“-Boc-N,N’-guanidino-dietil-D-homoariginin, Na-Boc-N,N’-guanidino-dipropil-D-homoarginin, Na-Boc-N,N’-guanidino-dibutil-D-homoarginin, NaBoc-N,N’-guanidino-dipentii-D-homoarginin, Nr'-Boc-N,N’-guanidino-dihexil-D-homoarginin, D. példa N,N’-guanidino-diszubsztituált-D-homoargininek IMMerc-butoxi-karbonil-származékainak előállítása toluolszulfonsavas só prekurzoraikból 3,25 g N,N’-guanidino-diizopropil-D-homoargininát-toluolszulfonát és 100 mg 10% fémtartalmú szénhordozós palládium katalizátor elegyét 50 ml jégecetben 4 órán keresztül atmoszférikus nyomású hidrogéngázzal kezel-17 10 15 20 25 30 35 40 45 50-guanidino-diizopropil-D-homoarginin-toluolszulfonátot kapunk. A vegyület 2,13 g-ját 60 m! 50%-os vizes dioxánban oldjuk, és az oldatot 10 ml 1 n nátrium-hidroxiddal és 0,4 g magnézium-oxiddal kezeljük. Az elegyet ezután 1,1 g di(terc-butil)-dikarbonáttal kezeljük és szobahőmérsékleten 2 órán keresztül keverjük. A magnéziumsót leszűrjük és a szdrletet vákuumban bepároljuk. A bázikus oldatot etanollal mossuk, majd pH-ját nátrium-szulfáttal 2,5-re állítjuk. A savas oldatot etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot vízmentes magnézium--szulfát felett szárítjuk. A szárítóanyagot leszűrjük, és a szúrletet bepároljuk. Etil-acetát--hexán elegyből végzett átkristályosítással N“-terc-butoxikarbonil-N,N’-guánidino-diizopropil-D-homoarginin-toluolszulíonátot kapunk. Hasonló módon eljárva, a megfelelő toluolszulfonát prekurzorokból kiindulva állíthatjuk elő a többi N“-terc-butoxi-karbonil-N,N’-guanidino-diszubsztituált-D-homoarginint vagy -D-arginint is. E. példa 4,9 g Boc-glicint 50 ml etanol és 50 ml desztillált víz elegyében oldunk. Az oldat pH-ját vizes cézium-hidrogén-karbonát-oldattal 7-re állítjuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Nagy vákuumban 18 árán keresztül szárítjuk a maradékot, majd 150 ml vízmentes dimetil-formamidban oldjuk. 25 g klór-metilezett polisztirol — 1% divinil-benzol gyantát (Merrifield) adunk hozzá (25 mmól (dóridnak felel meg). Az elegyet 50°C-on 24 órán keresztül rázatjuk, szűrjük, a gyantát egymást követően dimetil-formamiddal, vízzel és etanollal mossuk. A gyantát vákuumban 3 napon át szárítva 28,34 g Boc-Gly-O- gyantát kapunk. I. példa Beckman 990 peptidszintetizátor reakcióedényébe 7,29 g (5,5 mmól) Boc-Gly-O-gyantát viszünk, melyet száraz Boc-GlyOH-céziumsó és klór-metil-poiisztirol — 1% divinil benzol ekvimoláris mennyiségeinek reagáltatásával állítunk elő. A szintézis programm segítségével egymást követően amino-18 katalizátort Celite szűrőn leszűrjük, savakat letet szárazra párolva szilárd N,N’- szerint: adunk a gyantához, a következők 1 , lépés mosás CH2Cl2-näl 1-szer 1,5 perc 2. lépés vedőcsoport eltávolítás 50% cf3cooh/ch2ci2 1-szer 1,5 perc 3. lépés vedőcsoport eltávolítás 50% CF3C00H/CH2C12 1-szer 30 perc 4. lépés mosás CH2Cl2-nal 3-szor 1,5 perc 5. lépés 10% trietil-amin/CH2Cl2 2-szer 1,5 perc 6. lépés mosás CH2Cl2-nal 3-szor 1,5 perc 7. lépés N^-Boc-aminosav oldat 1-szer adagolás 8. lépés N,N’-diciklohexil-karbodiimid 1-szer adagolás 10
