195112. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ondó termékenyítőképességének fokozására

195112

0,05 mM-os koncentrációban tartalmazott GABA-t. Ebben az esetben az ismételt GABA adagolás hatására a motilitás a friss ejaculátummal azonos értékre növekedett (2. táblázat).

A testhőmérsékleten (38°C) végzett ún. hőtűrési vizsgálatok során a GABA nem befolyásolta szignifikánsan a spermium motilítást, bár tendenciájában fokozta azt, 0,05— 0,5 mM-os koncentrációban (1. táblázat). Ez a tendencia 1, 2 és 3 óránál egyaránt jelentkezett.

7

1. táblázat

GABA hatása kan sertés spermiumok kezdeti motilitására és hőtűrő képességére. A friss ejaculátumot 1:1 térfogatarányban hígítot- 5 tűk GABA-t nem tartalmazó (kontroll), ill. 0V001 —10 mM GABA-t tartalmazó kijevi hígítóval. A %-os motilitás értékeket 7 különböző kantól származó mintával végzett független kísérlet átlagaként ± S.E.M. adtuk 10 meg. Egyetlen érték sem tért el szignifikánsan a megfelelő kontrolitól.

8

Inkubációs

idő Motilitás %

38°C-on

/óra/ GABA végkoncentráció a hígított spermában /mM/

Kontroll

5

0.5

0.05

0.005

0.0005

0

70.0+3.1

71.7±3.1

68.3±4,8

71.7±3.1

66.7±6.1

68.3t4.8

1

46.7+4.9

50.0±3.7

53.3+4.2

53.3±4.2

53.3±4.2

38.3+5.4

2

35.0+3.4

38.3+4.8

40.0+2.6

35.0+3.4

36.7+3.4

31.7±1.7

3

31.7±4.0

33.4+4.2

35.0+2.2

33.4±4.2

30.0+3.7

28.3+4.0

2. táblázat

GABA jelenlétében történő eltartásain, eltartást követő ismételt GABA hozzáadás hatása kan sertés-spermiumok motilitására. Az eltartás 16—18°C-on, 24 óra hosszat, 0,0005— 5 nM GABA koncentráció jelenlétében, ill. távollétében (kontroll) történt. Az ismételt hozzáadáskor egységesen 0,5 ml 1 mM-os kijevi hígítóban oldott, GABA-t adtunk 0.5 ml

hígított spermamintához. A feltüntetett motilítás értékek 7 független kísérlet átlagaként ± S.E.M. adtuk meg. A megfelelő kontroll- 30 Tói való letérések szignifikancíáját az alábbi módon jelöltük

ap < 0,05 az ismételt GABA hozzáadás előtti értékhez viszonyítva

bp < 0,05 a GABA nélkül eltartott kontroll értékhez viszonyítva.

Eltartási

idő Motilitás %

16-18°C-on

óra GABA végkoncentráció az eltartás során /mM/

kontroll

5

0.5

0.05

0.005

0.0005

0

24

24+GABA

70.0+3.1 41.7+4.0 54.0+6.0

71.7±3.1 46.7+4/2 48.3+6.0

68.3±4.8 51.7±4.8 62.0+2.0a

71.7+3.1 50.0+3.7 70.0+5.5

66.7+6.1 36.7+5.6 ab52.0±8.6

68.3+4.8 41.7±4.8 46.0+5.1

Az eredmények értékelése

Megállapítható, hogy az optimális koncentráció tartományban GABA-t tartalmazó minták 24 órás eltartást követően ismételt GABA hozzáadásra visszanyerik a friss ejaculátumra jellemző motilitás értéket.

További kísérleteink, más állatfajokon, ill. humán spermán, azt mutatják, hogy a GABA hasonló mértékben fokozza a juh, a nyúl, a szarvasmarha, a ló, kecske, ill. a humán spermiumok motílítását is.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás ondó termékenyítőképességének fokozására adalékanyagokkal való kezeléssel, azzal jellemezve, hogy adalékanyagként gamma-amino-vajsavat használunk.

55 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kivitelezési módja, azzal jellemezve, hogy a frissen nyert ejakulátumot 0,1 ±0,01 mM gamma-amino-vajsavat tartalmazó hígítóval 1:2 és 2:1 arányú határérték között, előnyösen 1:1 aránygo ban hígítjuk, majd felhasználás előtt 1± ±0,1 mM gamma-amino-vajsavat tartalmazó hígítóval 1:2 és 2:1 arányú határ között, előnyösen 1:1 térfogatarányban hígítjuk.

50

Rajz nélkül

5