194822. lajstromszámú szabadalom • Eljárás O-szulfatált béta-laktám hidroxámsavak és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
194822 zel. 5 % os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és sóoldattal mossuk. Az oldatot vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, majd bepároljuk, így olajat kapunk Az olajat LPS-1-en kromatografáljuk, az eluálást hexán:dietil-éter:metilén diklorid (1.1:1) keverékével végezzük. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és bepároljuk, így 0,82 g szilárd terméket kapunk E) 1-(Benzil-oxi)-3-[(terc-buloxi-karbonil)-amino)-2-oxo-1 -aza-spiro[3.4]oktán 0,82 g (2,16 mmól) N-(benzil-oxi) N2-(terebutoxi-karbonil)-« -{ 1 -hidroxi-ciklopentil)-glicin-amid 15 ml piridinnel készített oldatához argonatomszférában 0,47 g (29,5 mmól) piridin-kéntrioxid-komplexet adunk A reakciókeveréket 50-55 C-ra melegítjük, majd 1,5 óra múlva még 0,150 g (0,9 mmól) piridin-kéntrioxidkomplexet adunk hozzá és még 1 órán át melegítjük Ezután a reakciókeveréket vákuumban acetonitrillel háromszor azeotrop koncentráljuk A maradékhoz 3,32 g kálium-karbonát 9 ml vízzel készített oldatának és 25 ml etil-acetátnak a hideg keverékét adjuk. A reakcióelegyet 2 órán át visszafolyatás közben erélyesen keverjük, ekkor a vekonyréteg-kromatográfia szerint a reakció csaknem tökéletesen végbement A reakciókeveréket lehűtjük, vízzel és etil-aceláttal hígítjuk és a fázisokat szétválasztjuk A szerves fázist 5 %-os kálium-hidrogénszulfát-oldattal és sóoldattal mossuk és vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk Az oldatot bepároljuk, a nyers benzil-étert LPS 1-en kromatografaljuk és hexán:etil-acetát, 3:1 arányú keverékével eluálva így 550 mg tiszta anyagot kapunk. F) 3-[(terc-Butoxi-karbonil)-amino]-2- oxo -1-(szulíoxi)-1-aza-spiro[3 4]oktán-monokáliumsó 0,45 g (1,29 mmól) 1 -(benzil-oxi)-3-(tercbutoxi karbonil)-aminoj-2-oxo-1-aza-spiro|3 4joktán 25 ml vízmentes etanollal készített oldatát 100 mg 10 °/o-os palládium/szén jelenlétében, keverés közben, szobahőmérsékleten 1 órán at hidrogénezzük, ekkor a vékonyrétegkromatogram jelzi, hogy kiindulási anyag már nincs jelen A katalizátort Celite-rétegen kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékhoz 10 ml piridint adunk, és az oldatot keverés közben argonatmoszférában 0‘C-ra lehűtjük Ezután az oldathoz három ekvivalens (643 mg) piridin kéntrioxid-komplexet adunk, és a reakciókeveréket szobahőmérsékleten keverjük Két óra múlva a vékonyréteg-kromatogram jelzi, hogy a reakció befejeződött A reakciókeveréket vákuumban koncentráljuk, a maradékot 10 % os dikálium hidrogén-foszfát-oldattal felvesszük, kismennyíségű acetont adunk hozzá, hogy szolubilizáljuk, Dowex AG50 (K^) oszlopra visszük, és vízzel, majd 20 % acetont tartalmazó vízzel eluáljuk A terméket tartalmazó frakciókat liofilizáljuk, majd HP-20 oszlopon vízzel, majd 0-10 % aceton/víz grádienssel eluálva tisztítjuk A terméket tartalmazó frakciókat liofilizáljuk, így összesen 259 mg terméket kapunk 4 5 (Z)-{[ 1 (2 Amino 4 tiazolil) 2 oxo 2 -[2-oxo- 1-(szulfoxi)-1 -aza-spiro[3.4Jokt-3 -il - -amino]-etiiidén]-amino-oxi) ecetsav-difenil-metil-észter-monokáliumsó 280 mg (0,75 mmól) 3-[(terc-butoxi-karboni!)-aminoj-2 -oxo-1-(szulfoxi)-1 -aza -spiro[3.4]oktán-monokáliumsót 2 ml száraz diklórmetánnal befedünk, 0,8 ml anizolt adunk hozzá, és a keveréket -lO“C-on lehűtjük. A reakciókeverékhez 3 ml trifluor-ecetsavat adunk, és az oldatot 1,5 órán át -(10-5)°C-on keverjük. 0,75 óra múlva szilárd anyag képződik, ami 1,5 óra múlva tekintélyes mennyiségű lesz Az illő anyagokat vákuumban lepároljuk, és a szilárd maradékot éterrel eldörzsöljük, így kapjuk a 3-amino-2-oxo-1-(szulfoxi)-1 -aza-spiro[3.4joktánt. 310 mg (0,75 mmól) (Z)-2-amino-a-[(difenii-metil)-oxi-karbonil-metil-oxi-imino]-4 tiazol-ecetsav-difenil metil-észtert 4 ml száraz dimetil-formamidban 115 p.l (0,82 mmól) trietil-aminnal kezelünk, és a keveréket argonatmoszférában -30“C-ra lehűtjük. A keverékhez 155 jil (0,75 mmól) difenil-klór-foszfátot adunk, és 1 órán át-(30-20)“C-on keverjük, ekkor a kiindulási sav vegyes anhidridjének az oldatát kapjuk. 3-Amino-2 -oxo-1-(szulfoxi)-1 -aza -spiro[3.4]oktánból 2,5 ml dimetil-formamiddal oldatot készítünk. 500 ^l (3,6 mmól) trietil-amint adunk -30üC-on a vegyes anhidrid oldatához, majd hozzáadjuk a p-laktám-oldatot. A reakcióelegyet argonatmoszférában 0,5 óra alatt hagyjuk -5 C-ra felmelegedni. A reakciókeveréket ezután vákuumban bepároljúk, így gumiszerű anyagot kapunk. Ezt acetonnal felveszszük és egyenlő térfogatú vízzel hígítjuk. A pH- értékét 3,45-ről kálium-hidrogén-karbonáttal 6,85-re beállítjuk, és az oldatot Dowex AG50 (K + ) oszlopon átengedjük, az eluálást 50 %-os acetonnal végezve. A terméket tartalmazó frakciókat bepároljuk, így szuszpenziót kapunk, amit 80 ml HP-20 oszlopra viszünk, vízzel, majd 50%-ig növekvő mennyiségű acetont tartalmazó aceton-grádienssel eluáljuk A terméket tartalmazó frakciókat (37,5-50% aceton) egyesítjük és liofilizáljuk. így 0,31 g terméket kapunk, mint fehér7szilárd anyagot. IFW1780 cm 1 H) (2) {[ 1-(2-Amino-4-tiazolil)-2-oxo-2- -[2-oxo-1 -(szulfoxi)—1 -aza-spiro[3.4]okt-3-il-amino- etilidén) -amino-oxi}-ecetsav-dikálijmsó 0,31 g (0,46 mmól) (Z)-[[1-(2-amino-4-tia zolil)-2-oxo-2-[2-oxo-1-(szulfoxi)-1-aza-spi ro[3.4]okt-3-il-amino]-etilidén]-amino-oxi}ecetsav difenil-metil-észter dikáliumsót 6 ml száraz diklór-metánban és 0,8 ml anizolban szuszpendálunk, a szuszpenziót -10“C-ra lehűtjük, és 10 ml trifluor-ecetsavat adunk hozzá A reakciókeveréket 1 órán át -(10-5)°C-on hagyjuk állni, majd 10 ml száraz toluolt adunk hozzá, és vákuumban csaknem szárazra pároljuk. A maradékot hexánnal mossuk, vízzel felvesszük (pH=1,8) és a pH-értékét hígított káli— 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
