194808. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új alfa-allén-alfa-aminosavak és ilyen hatóanyagokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
194808 rendjének vonatkozásában. Bár kisebb változásokra szükség lehet, a találmány szerinti vegyületek előállítását általánosságban az 1. Reakcióvázlattal szemléltethetjük. A reakcióvázlaton szereplő képletekben R1, R2, R3, R\ R’ és R” a korábban megadott jelentésű. Az I. lépésben egy alfa-aminosavat egy olyan reagenssel visszük reakcióba, amely a savfunkció kivételével blokkolja a sav oldalláncának funkciós csoportjait. Alkalmas blokkolócsoport például a terc-butoxi-karbonil(Boc), benziloxi-karbonil-, bifenil-izopropoxi-karbonil-, terc-amiloxi-karbonil-, izoborniloxi -karbonil-, o-nitro-fenil-szulfenil-, 2-ciano-terc-butoxi-karbonil-, 9-fluoreniI-metiloxi-karbonil-csoport. Az arginin m-funkciós csoportjai nitro-, p-toluol-szulfonil-, 4-metoxi-benzol-szulfonil-, benziloxi-karbonil-, Boc- és adamantiloxi-karbonil-csoportokkal védhetők. Az oldallánc funkciós csoportjait a találmány szerinti eljárásban előnyösen úgy védjük, hogy az alfa-aminosavat a Schotten-Bauman reakció körülményei között benzoil-kloriddal reagáltatjuk [lásd Chemistry of the Amino Acids, Ed. Greenstein és Winitz John Wiley and Sons, 2, 1961]. Az amidot úgy állítjuk elő, hogy az oldallánc funkciós csoportjára számítva mintegy 1,1 mól-ekvivalens benzoil-kloridot csepegtetünk az aminosav lúgos vizes oldatához, alacsony hőmérsékleten, például —10°C és +10°C között. A pH-t egy híg vizes bázis hozzáadásával 9 és 10 között tartjuk. Reagensként és a pH kívánt értéken tartására előnyösen 1,0 mólos vizes nátrium-hidroxid oldatot használunk. A reakció körülbelül 1—4 óra alatt teljessé válik. Ezután a pH-t egy ásványi savval körülbelül 3-értékig csökkentjük, a kivált csapadékot összegyűjtjük, és szokásos módszerekkel tovább tisztítjuk. Ha az alfa-aminosav m- vagy p-tirozin, DOPA, lizin, ornitin, 5- -hidroxi-triptofán vagy hasonló, a további funkciós csoportokat ugyanezzel a módszerrel védjük, de a védéshez használt reagens ekvivalens kiszámításánál ezeket a csoportokat is figyelembe vesszük. A 2. lépésben az acetilén-észtereket Hassner módszere szerint állítjuk elő [A. Hassner és V. Alexanian, Tetrahedron Letters, 46, 4475 (1978)]. A védett aminosavat felveszszük egy vízmentes, poláros aprotikus oldószerben, és szobahőmérsékleten 1,0—1,15 ekvivalens diciklohexil-diimiddel (DCC) vagy 1- (dimetil-amino-propil) -3-etil-karbodiimid. HCl-dal és alkalmas acetilén-alkohollal, valamint 0,1—0,2 ekvivalens N,N-4-dimetil-amino-piridinnel (DMAP) kezeljük. A reagáltatást szobahőmérsékleten, körülbelül 6—16 órán át végezzük. Ezután az észtert kristályosítással, kromatográfiásan vagy más szokásos technikával tisztítjuk. Az alfa-amino védett hisztidin acetilén-észterei úgy készülnek, hogy az alkalmas acetilén-alkohol 2—5 ekvivalensnyi és a p-toluol-szulfpnsav 1 —1,4 ekvivalensnyi mennyiségét 7 nempoláros oldószerben, például benzolban, Dean-Stark feltéttel ellátott berendezésben visszafolyatás mellett forraljuk, míg sztöchiometrikus mennyiségű víz keletkezik. Az oldószert és a reagens feleslegét ezután vákuumban eltávolítjuk, és a kapott maradékot poláros oldószerből p-toluol-szulfonsav-só formájában kristátyosítjuk. A 3. lépésben a Claisen átrendeződést W. Steglich és munkatársai [Ang. Chem. Int. Ed., 14, 1, 58 (1975) vagy ugyanott, 16, 6, 394 (1977)] módszerével hozzuk létre. Az acetilén-észtert felvesszük egy vízmentes, poláros oldószerben, így acetonitrilben, szobahőmérsékleten, inertgáz-, például argonatmoszférában, és 3—3,5 mól-ekvivalens trietil-aminnal, 2,0—2,5 mól-ekvivalens szén-tetrakloriddal és körülbelül 2 mól-ekvivalens trifenil-foszfinnal kezeljük. A szén-tetraklorid és trifenil-foszfin helyett triklór-metil-kloroformátot is használhatunk. Az átrendeződés 4—24 óra alatt lejátszódik. Az olyan aminosavak átrendezéséhez, amelyek egy második védett amino funkciós csoportot is tartalmaznak, amilyen például az ornitin, lizin vagy hisztidin, dupla menyryiségű reagensre van szükség. A 4. lépésben az oxazolon gyűrűt metanolízissel vagy valamilyen más, egyszerű alkohol segítségével nyitjuk fel. Az alkoholt közvetlenül a reakcióedénybe adjuk, miután meggyőződtünk arról, hogy az átrendeződés teljesen lejátszódott, majd az oldatot szobahőmérsékleten egy éjszakán át állni hagyjuk. Ezalatt a gyűrű felnyílik, és az allén oldalláncot tartalmazó metil-észter vagy más, hasonló észter keletkezik, az alkalmazott alkoholtól függően. A hisztidin-vegyületek hidrolízisét egy erős ásványi sav híg oldatával, emelt hőmérsékleten végezzük. Például, az oxazolont 10— 30%-os, előnyösen 20%-os sósav-oldatban oldjuk, és néhány órán át 60 és 90°C közötti, előnyösen 80°C-os hőmérsékleten tartjuk. Más amidok hidrolízisét körülbelül 3 mól-ekvivalens trietil-oxonium-tetrafluor-borát felhasználásával, szobahőmérsékleten, legfeljebb 5 napig végezzük. Ezután az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot egy éjszakán át összeférhető szerves oldószerben, így tetrahidrofuránban, szobahőmérsékleten híg (5%-os) vizes sósav-oldattal kezeljük. A metil-észtert egy erős bázis alkohollal készült híg oldatával, például 1,0 n nátrium-hidroxid és metanol 1:2 arányú oldatával elszappanosítva a kívánt (I) általános képletű vegyületekhez jutunk. A védett (II) általános képletű vegyületek alternatív módon a védett alfa-acetilén-észterek Claisen átrendezésével is előállíthatok, Ireland enolát módszerét alkalmazva [R.E. Ireland és misai.; J.A.C.S., 98:10, 2868 (1976)]. A reakciót a következőképpen hajtjuk végre: Egy védett alfa-acetilén-észtert'vízmentes, szerves oldószerben, így tetrahidrofuránban 8 5 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
