194583. lajstromszámú szabadalom • Készítmény takarmány és szemestermény silózására
1 19.4 583 2 ahhoz szükséges, hogy feleslegben levő oxigéntartalom mellett percenként 10 mikroliter oxigént használjon fel egy olyan s/.ubsztrátanyaggal, amely 35 °C hőmérsékletű és 5,9 pH értékű foszfát-pufferben 3,3 tömeg%-nyi mennyiségben tartalmaz glukózt. 5 Tehát a találmány szerinti készítmény a takarmány és a szemestermény silózásához alkalmazható, amelyre az jellemző, hogy előnyösen razes oldat alakjában 10.000—12.500 IU/ml aktivitású glukózoxidázt, valamint 2.250-2.750 Baker egység/ml aktivitású kataláz, 10 28.500-35.500 HEC egység/ml aktivitású celluláz ! és/vagy hemicelluláz és 1.350-1.750 nkat/ml aktivitású béta-glukozidáz enzimek közül legalább egyet, továbbá adott esetben egyéb szokásos adalékanyagokat tartalmaz. A glukózoxidáz mellett a többi enzimnek az a sze- 15 repe, hogy a glukóz képződését idézzék elő, amely azután a glukózoxidáz hatására glukonsawá alakuljon át. A celluláz-készítmények rendszerint tartalmaznak hemicellulázt is, amit egyébként külön is hozzá lehet adni a készítményhez, némely celluláz-készítmény pedig béta- 20 glukozidázt is tartalmaz. Az enzimféleségek lehetnek : tisztított enzim-készítmények vagy pedig szárított sejttömegek is. Az is előnyös, hogy a találmány szerinti készítmény cukortermékeket is tartalmazzon. Az ilyen cukortermé- 25 kék fogalma alá tartoznak például a cukorrépa- és nád- ' cukor-melasz, vagy keményítő-és tejsavó-hidrolizátumok, illetve a fa-hidrolizátumok, amelyek szabad hexózokat és/vagy pentózokat tartalmaznak. A készítménynek egyéb, adott esetbeni adalékanyagai 30 lehetnek még szervetlen- és/vagy szerves savak, így kénsav, sósav, foszforsav, hangyasav, ecetsav, tejsav vagy1 glukonsav is, amelyek alkalmazásának az a célja, hogy a silózandó anyag kezdeti pH-ját az optimális 4—6 értékek közé csökkentsék. Hasonló adalékanyagként a készít- 35 mény tartalmazhat még különféle sókat is, így például magnézium-, kalcium- vagy ammónium-foszfátot, illetve kalcium- vagy nátrium-formiátot, továbbá tartósító szereket, mint például szorbátot, benzoátot vagy nátriumnitritet. 40 A készítményt előnyösen úgy készítjük el, hogy az enzimek meghatározott mennyiségeit, valamint az egyéb alkotórészeket tartalmazza, amelyeknek a zömét a már említett répacukor- vagy nádcukor-melaszok, vagy tejsavó-, illetve fa-hidrolizátumok teszik ki. A készítmény 45 úgy készíthető el, hogy megfeleljen a takarmány, a szemes termény vagy bármilyen más silózandó egyéb anyag számára. A készítmény lehet oldat vagy szárított, porított vagy granulált formában. A benne levő enzimek lehetnek tisztított enzim-készítmények vagy pedig szári- 50 tott sejttömegek is. A silózandó anyagok egy tonnájához hozzáadandó készítményben jelenlevő fenti alkotórészek megfelelő mennyiségei a következők: Glukózoxidáz Kataláz Celluláz Béta-glukozidáz 10.000 - 10,000.000 IU 500 - 5,000.000 Baker-egység, ami egyenlő 0,064 — 640 IU-val 1,000.000 -100,000.000 HEC- egység, ami egyenlő 1,67 -167 X 60 107 IU-val 100.000 - 10,000.000 nkat-egység, ami egyenlő- 1,67 —167 X 106 IU-val Melasz-féleségek, fa- és tejsavó-hidrolizátum, illetve keményítő-hidrolizátum akár egyike, akár többje együttesen 0,5—20 kg (szárazanyagtartalomra számítva) Ásványi vagy szerves savak a szokásos kereskedelmi töménységben és minőségben 1 -2 liter Sék 1-5 kg Tartósítószerek 0,2—1 kg A különféle enzimek aktivitásegységei tekintetében ufalás található a következő szakirodalmi helyeken: A kataláz Baker-féle egységére vonatkozólag: Scott D. és Hammer F. közleménye az Enzymologia 22 (1960) 194—200. oldalain; A celluláz HEC-egységére vonatkozólag: Locwenberg J. és Chapman C. közleménye az Arch. Microbiol. 113 (1977)61-64. oldalain; A béta-glukozidáz nkat-egységére vonatkozólag: Bailey M. és Nevalainen K,. közleménye az Enzyme Microb. Technoi. 3 (1981) 153-157. oldalain. A találmány szerinti készítmény felhasználásakor célszerűen azt olyan mennyiségben adjuk a silózandó anyaghoz, hogy a hordozó közegen levő glukózoxidáz elegendő legyen ahhoz, hogy glukonsavat képezzen, az anyag pH-ját kellőképpen csökkentse és az oxigént elfogyassza. Amint az már az előzőekből látható volt, a glukózoxidáz hatásos mennyisége 10.000 IU-tól 10,000.000 IU-ig terjedő határok között van a silózandó anyag 1 tonnájára számítva. A találmány szerinti készítmény egyes változatainál a fentiekben már említett egyéb alkotórészek kombinációit is használhatjuk a jelzett mennyiségek figyelembe vételével. A találmány szerinti készítményt és annak az alkalmazási módját, illetőleg eredményeit részletesen ismertetjük a következő kiviteli példák révén. 1. példa A frissen felszecskázott zöld takarmányhoz 0,005 tömeg%-nyi mennyiségben hozzáadunk egy Finnish Sugar Co. Ltd. által gyártott glukózoxidáz készítményt, amelynek az aktivitása 11.250 IU/ml és a kataláz-aktivitása 2.500 Baker-féle egység/ml. Az 1. táblázat mutatja a glukonsav képződését, valamint a pH értékének a csökkenését 24 óra alatt. 1. táblázat A glukonsav képződése és a silózott zöld takarmány pB-jának a csökkenése 24 óra alatt. A minta megnevezése: Glukonsav tömeg%: pH: Vakpróba 0,01 6,3 0,005 tömeg% GOD 1,20 5,1 A fenti példában felhasznált enzim-készítmény sűrűsége 1,3 g/ml volt. 3