194496. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Marek-kór elleni élő vakcina előállítására
11 194496 12 MDV „C”’ kiónnal, CVI-988 CEF54 MDY „C” kiónnal és CVI-988 CEF65 MDV „C” kiónnal, összehasonlítva a CVI-988 CEF35 MDV kereskedelmi készítménnyel. A fertőzést RB/1B MDV-vel hajtjuk végre. Ez a vírus a nagyon virulens MD-izolátumok egyik képviselője, amelyet problémát okozó csirkenyájakból nyertek az Egyesült Államokban. Ezt a szóban forgó izolátumot az USA-ban egy HVT-vel vakcináit tojó csoportból izolálták. A PD50 értékek párjai közt - amely PD50 értékeket különböző meghatározásokban nyerjük - megfigyelt különbségek szignifikanciáját a log-valószínűség-hányados (log-likelihood-ratio) vizsgálatból származó számítógép-programmal határozzuk meg 50 [Kendall és Stuart, a „The Advanced Theory of Statistics” című kiadványban, 2. kötet, 3. kiadás Charles Griffin Co. Ltd. kiadása, 24, 234-272 (1973)1 A PD50 mérések akkor hasonlíthatók össze, ha a kísérleti csirkék azonos törzsét alkalmazzuk, ha az MD-tüneteket és elváltozásokat csak makroszkópos vizsgálattal jelöljük, és ha a fertőzés vagy virulens MDV-vel, vagy nagyon virulens MDV-biovariánssal történik. A statisztikai értékelés csak akkor valósítható meg, ha az összehasonlított probit regressziós vonalak és az MD kifejeződésére való rezisztencia meredekségei a két szériánál nem különböznek szignifikánsan. 3. TÁBLÁZAT Négy PD50 mérés összehasonlítása, CVI-988 DEFJ4 MDV „C”’ kiónnal, CVI-988 CEF54 MDV „C” kiónnal, CVI-988 CEF3S MDV-vel és HVT FC126+MDV SB-1 keverékkel végezve. Vakcina CVr-988 DEF54 CVI-988 CEF54CVI-988 CEF35HVT FC126 + MDV „C” klón MDV „C” klón MDV MDV SB-1 Fertőző vírus K K K K Legnagyobb dózis (FFU) 500 500 500 500 Sorozathígítások lépésekben 1:5 1:5 1:5 1:5 A megvédettek száma/összes szám Legnagyobb dózis: 28/30 29/29 30/30 27/27 17/30 26/29 25/29 26/29 13/28 25/30 22/29 24/29 Legkisebb dózis: 12/30 18/28 14/30 22/29 Vakcina nélkül 10/28 15/29 7/30 12/29 pd50* 26,5 12,9 10,3 6,4 PD50 95%-os konfidencia intervalluma 10,8-64,8 3,4-48,5 3,3-32,1 0,48-85,4 A probit regressziós vonal meredeksége 1,24 1.22 1,20 0,79 A meredekség standard hibája 0,34 0,42 0,29 0,30 * Az MD-re fogékony csirkék 50%-ának védelméhez szükséges FFU száma VII. PÉLDA PD50 kísérletet hajtunk végre egy találmány szerinti CEF-adaptált vírussal, a CVI-988 CEF59 MDV „C” kiónnal. Áz eredményeket az 5. táblázatban mutatjuk be. A VI. példában említett feltételek alapján ennek a vizsgálatnak az eredményei statisztikailag öszehasonlíthatók a CVI-988 CEF35 MDV-vel végrehajtott két PD5o viszgálattal, amelyet már a 2. és 3. táblázatban bemutattunk (és amely eredményeket itt ismét bemutatunk). Hasonló statisztikai összehasonlítást teszünk a CVI-988 CEF59 MD „C” klón PD5Ú értékével és CVI-988 CEF35 MDV-vel végrehajtott hat méréssel. Az utóbbi PD50 kísérletek a J. Biol. Standardization, 9, 15-22 (1981) irodalmi helyen vannak leírva. A VI. és VII. példákból az alábbi következtetéseket lehet levonni:- Statisztikai összehasonlítást végzünk kilenc pár PD50 méréssel, amelyben a vakcinálást vagy CVI-988 CEF35 MDV-vel, vagy CVI-988 MDV „C” klónnal végezzük.- A CEFS9 „C” klón cagy CEF65 „C” klón készítmények PD50 értékei mind alatta vannak a CVI-988 CEF35 MDV-vel nyert értékeknek.- A különbségek a PD50 értékek között négy összehasonlításban szignifikánsak (2xp<0,01, 2xp<0,05). Egy esetben a különbség nem szignifikáns. Négy esetben statisztikai értékelés nem hajtható végre az összehasonlított görbék meredekségei közti vagy a nem vakcináit csoportokban megfigyelt természetes rezisztenciák közti különbségek miatt. 4. TÁBLÁZAT Négy PD50 mérés összehasonlítása, CVI-988 DEF34 MDV „C”’ klónnal, CVI-988 CEF54 MDV „C” klónnal, CVI-988 CEF« MDV „C” klónnal és CVI-988 CEF35 MDV-vel. Vakcina CVI-988 CVI-988 CVI-988 CVI-988 DEF54 CEF54 CEF65 cef35 MDV MDV MDV MDV „C” klón „C” klón „C” klón Fertőző vírus RB/IB RB/IB RB/IB RB/IB Legnagyobb dózis (FFU) Sorozathígítások lépésekben A megvédettek száma/összes 2500 1:5 2500 1:5 560 1:5 2500 1:5 szám Legnagyobb dózis: 23/23 21/21 40/41 20/20 23/24 17/20 39/40 20/20 19/24 20/20 33/41 15/20 Legkisebb dózis; 9/24 16/19 17/38 9/20 Vakcina nélkül: 0/25 0/18 4/38 2/20 PD50* PD50 95%-os 31,6 ** 6,5*** 34,3 konfidencia intervalluma A probit regressziós vonal 6,9-144 2,0-21,5 5,6-211 meredeksége A meredekség standard 1,53 U9 1,73 hibája 0,34 0,22 0,48 * Az MD-re fogékony csirkék 50%-ának védelméhez szükséges FFU száma. ** A dózisválasz-görbe szabálytalan lefutása miatt a PD$q értéket nem tudjuk kiszámítani. *** A CVI-988 CEFí5 MDV „C” klón PD50 értéke szignifikánsan különbozik a másik két PD50 értéktől (p< 0,01). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
