194267. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás a 4'-epi-doxorubicin-hidroklorid előállítására
1 194.267 2 sítjük, majd 300 ml diklór-metánba öntjük. A szerves részt 0,1 normál vizes sósav-oldattal, utána vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Az így kapott nyersterméket szllikagélen kromatografálva tisztítjuk eluensként kloroform és aceton 98:2 térfogatarányú elegyét használjuk. Ily módon 4,8 g (hozam: 77%)4’-oxo-N-trifluor-acetil-daunoribicint kapunk. Térdeszorpciós tömegspektrum: molekualion: M* = * 621. 1 H-NMR-spektrum (CDC13) delta: 1,37 (d, CH3-C-5'), 2,38 (s, CH3CO), 3,95 (s, CH30), 4,78 (széles q, C-5'-H), 5,20 (széles s, C-7-H), 5,58 (széles s, C-l'-H), 12,93 és 13,81 (s, fenolos protonok). 2. példa 4'-Epi-daunorubicin-hidroklorid (IV képlet) 1,5 g 4'-oxo-trifluor-acetil-daunorubicin 150 ml metanollal készült oldatát -10 °C hőmérsékletre hűtjük, és hozzáadjuk 0,035 g nátrium-bór-hidrod 5 ml metanollal készült oldatát. A redukció 10 perc alatt lejátszódik, utána az elegyet 0,1 normál vizes sósav-oldattal semlegesítjük, csökkentett nyomáson kis térfogatra (30 ml) betöményítjük, és 200 ml diklór-metánnal hígítjuk. Az oldatot vízzel mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot, a nyers (III) képletű 4'-epi-N-trifluor-acetil-daunorubicint feloldjuk 50 ml 0,1 normál vizes nátrium-hidroxid-oldatban, az oldatot félórán át 5 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, majd pll-ját 0,1 normál vizes sósav-oldattal 4,5-re állítjuk. Ezután az elegyet az aglikonok eltávolítása céljából kloroformmal kirázzuk. Utána a vizes rész pHját 8,6-ra állítjuk, és újra kirázzuk kloroformmal. Ez utóbbi kloroformos részeket egyesítjük, nátrium-szulfáton megszárítjuk, kis térfogatúra betöményítjük, majd 0,1 normál metanolos sósav-oldattal pH = 4,5-re savanyítva a terméket kikristályosítjuk. Ily módon 1,3 g (hozam: 87%) (IV) képletű 4'-epi-daunorubicin-hidrokloridot kapunk, op.: 199-201 °C, [alfaV* = +320 (c = 0,045, metanol). 3. példa 4'-Epi-doxorubicin-hidroklorid (V képlet) 0,35 g (IV) képletű 4'-epi-daunorubicin-hidrokloridot feloldunk 5 ml vízmentes metanol, 14 ml dioxán és 0,35 ml ortohangyasav-etil-észter elegyében, és hozzáadjuk 0,93 g bróm 10 ml klorformmal készült oldatának 1,4 ml térfogatú tészletét. Az elegyet 3 órán át 10 °C hőmérsékleten tartjuk, majd 70 ml dietil-éter és 35 ml petroléter elegyébe öntjük. A kivált vörös színű csapadékot kiszűrjük, és a savnyomok tökéletes eltávolítása céljából dietil-éterrel többször kimossuk. Utána a csapadékot feloldjuk 10 ml aceton és 10 ml 0,025 normál vizes bróm-hidrogénsav-oldat elegyében. A reakcióelegyet 15 órán át szobahőmérsékleten tartjuk, majd hozzáadunk 6 m) vizet, és az így kapott oldatot az aglikonok eltávolítása céljából kloroformmal többször kirázzuk. Ezután a vizes részt n-butanollal többször kirázzuk, egészen addig, míg a butanolos rész színtelen nem marad. Az egyesített butanolos részeket csökkentett nyomáson kis g térfogatra (körülbelül 6 ml) betöményítjük, és dietil-étert adunk hozzá. így 0,30 g 14-bróm-származékot kapunk. Ezt a köztiterméket feloldjuk 7 ml 0,25 normál vizes bróm-hidrogénsav-oldatban, és hozzáadjuk 0,5 g nátrium-formiát 5 ml vízzel készült oldatát. A reakcióelegyet 48 órán át szobahőmérsékleten kever- 10 jük, majd pH-ját 1 normál sósav-oldattal 4-re állítjuk. Ezután az elegyet a lipoftl szennyezések eltávolítása céljából dietil-éter és etil-acetát 1:1 arányú elegyével kirázzuk. Utána a vizes rész pH-ját vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal 7,6-ra állítjuk, és kloroformmal többször kirázzuk, egészen addig, míg a kloroformos rész színtelen nem marad. Az egyesített kloroformos részeket nátrium-szulfáton megszárítjuk, és csökkentett nyomáson kis térfogatra (körülbelül 30 ml) betöményítjük. Az így kapott, vörös színű oldatot vízmentes, metanolos sósav-oldattal pH = no = 3,5-re savanyítjuk, és fölös mennyiségű dietil-étert ' adunk hozzá. Ily módon 0,20 g (V) képletű 4'-epi-doxorubicin-hidrokloridot kapunk (hozam: 55%), op.: 185 °C (bomlik), [alfa]2= -274 ° (c =0,01, metanol). Vékonyréteg-kromatográfiás rf-értéke:0,55 (0,067 25 mólos foszfát-oldattal pH = 7-re pufferolt szilikagél lemezen, futtató elegy: kloroform, metanol és víz 130:60:10 térfogatarányú elegye). 30 35 40 45 50 55 Szabadalmi igénypont 1. Eljárás az (V) képletű 4'-epi-doxorubicin és e vegyület hidrokloridjának előállítására, azzal jellemezve, hogy az (I) képletű N-trifluor-acetil-daunorubicin 4'-helyzetű hidroxilcsoportját oldószerben, célszerűen vízmentes diklór-metánban -65 — -60 °C hőmérsékleten oxidáljuk, előnyösen trifluor-ecetsav-anhidriddel aktivált dimetil-szulfoxid segítségével, majd a reakcióelegyet meglugosítjuk, előnyösen l,5-diazabicikIo-[4.3.0]non-5-énneI, majd a kapott (II) képletű 4 -oxo-N-trifluor-acetil-daunorubicint oldószeres, előnyösen metanolos oldatban — célszerűen -10 °C hőmérsékleten, nátríum-bór-hidrid segítségével — szelektíven és sztereospeciflkus módon redukáljuk, majd a kapott megfelelő, (III) képletű 4*-hidroxi-származékról az N-trifluor-acetil-csoportot enyhe körülmények között, előnyösen 0,1 normál vizes nátrium-hidroxid-oldattal végzett hidrolízis útján lehasítjuk, és a kapott szabad glikozid bázist, a 4'-epi-daunorubicint előnyösen a (IV) képletű, megfelelő sósavas só formájában elkülönítjük, majd ez utóbbit oldószerben, célszerűen metanol és dioxán elegyében oldva, ortohangyasav-etil-észter jelenlétében kloroformos bróm-oldattal kezeljük, és így a megfelelő 14-bróm-származékot kapjuk, és végül a fenti 14-bróm-származékot — előnyösen szobahőmérsékleten, vizes nátrium-fonniát-oldattal - elhidrolizáliuk, és a kapott - előnyösen hidroklorid formában tévő - (V) képletű 4'epi-doxorubicint elkülönítjük. 3 db rajz Kiadja : Országos Találmányi Hivatal Felelős : Himer Zoltán KÓDEX 3
