194163. lajstromszámú szabadalom • Eljárás indolil és indazolil csoportot tartalmazó heterociklusos amidok és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 194.163 2 ahol az egyes betüjezések jelentése a következő: G » százalékos gátlás, A * tenziónövekedés a hatóanyag beadagolását megelőző vizsgálatban, B « tenziónövekedés a hatóanyag beadagolását követő vizsgálatban. A kontroli-csoportban meghatározott százalékos változás és a kezelt csoportban meghatározott százalékos gátlás átlagértékeit Student-féle t-próbával hasonlítottuk össze. Ezután a hatóanyaggal kezelt szövetpreparátumokat 25 percig mostuk, majd újból LTE4 , TLD4 vagy LTC4 hatásának tettük ki, és vizsgáltuk a szövetpreparátumok reakcióit. Azokat a preparátumokat, amelyeknél a reakció nagysága visszatért a hatóanyag beadagolása előtt mért értékre, további vizsgálatokhoz megőriztük, míg azokat a szövetpreparátumokat, amelyeknél a reakció nem tért vissza az alapértékre, eltávolítottuk a vizsgálatokból. Az összes vizsgálatot 5 x 10~6 mól indometacin (ciklooxigenáz-inhibitor) jelenlétében végeztük. A fenti kísérletben az (I) általános képletű vegyületek lCb* mólos vagy annál lényegesen kisebb koncentrációban is statisztikusan szignifikáns LTC4-, LTD4- és/vagy LTE4antagonists hatást fejtettek ki. A leukotrién-antagonista hatás szelektivitását nem specifikus simaizom-ernyesztőkkel összehasonlítva is vizsgálhatjuk; ebben az esetben a fenti kísérletekben nem-specifikus spazmogén anyagként bárium-kloridot használunk 1,5 x 10 3 mól/1 koncentrációban, ismét 5 x 10-* mól/1 indometacin jelenlétében. A leukotrién-antagonista hatást in vivo körülmények között tengerimalacokon vizsgáltuk. A tengerimalacoknak beadtuk a vizsgálandó hatóanyagot, majd 15-60 perc elteltével az állatok szájába 30 itg/ml LTD4-et tartalmazó aeroszolt fecskendeztünk. Mértük a leukotrién által okozott légzési rendellenesség (például nehéz légzés) fellépéséig eltelt időt, és a kapott értékeket összehasonlítottuk a hatóanyaggal nem Kezelt tengerimalacokon mért értékekkel. A fenti kísérletekben az (I) általános képletű vegyültek 100 mg/kg-os vagy lényegében kisebb orális, intravénás vagy intraperitoneális dózisban beadva jelentősen növelték a leukotrién-okozta légzési rendellenesség fellépéséig eltelt időt. A hatóanyagok a legkisebb hatásos dózis sokszorosában beadva sem idéztek elő az állatokon nem kívánt mellékhatásokat. Ebben a kísérletben a 262., 158. és 168 példa szerint előállított vegyület 5 mg/kg-os, 43 mg/kg-os, illetve 50 mg/kg-os dózisban 1-2 órával a leukotriénes kezelést megelőzően beadva jelentősen növelte a leukotrién-okozta nehéz légzés fellépéséig eltelt időt. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. Amennyiben a példákban egyebet nem közlünk, (i) a műveleteket szobahőmérsékleten (18—25 °C-on) végeztük, (ii) az oldószereket forgó bepárlókészülékben, csökkentett nyomáson, legfeljebb 50 °C fürdőhőmérsékleten pároltuk le, (iii) a flash-kromatográfiához Merck Kiese Igei 9385 szilikagélt (gyártja: E. Merck, Darmstadt, NSZK), az oszlopkromatográfiához Merck Kieselgel 60 7734 szilikagélt (gyártja: E. Merck, Darmstadt, NSZK), a vékonyrétegkromatográfiához pedig 0. 25 mm vastagságú Anaítech GHLF 21521 lemezeket (gyártja: Analtach, Newark, Delaware, USA) használtunk, íiv) az olvadáspontok korrigálatlan értékek; (v) a végtermékek vékonyrétegkroinatográfiás vizsgálat alapján lényegében tiszták; (vi) a hozam-adatok csupán tájékoztató jellegűek, és kristályos végtermék esetén (a csillaggal megjelölt eseteket kivéve) az átkristályosított anyag súlyára vonatkoznak; a karbonsav-típusú végtermékeket például etil-acetát/hexán elegyből kristály ősit ötjük át; (vii) az NMR-spektrumok adatait tetrametil-szilán belső standradhoz viszonyított 5 értékekben, ppm egységekben adtuk meg; a spektrumokat 80 MHz vagy 250 MHz frekvencián, deutero-kloroformban vagy hexadeutero-dimetil-szulfoxidban vettük fel. 1. példa 0,45 g 4-(6-amino-indol-l-il-metil)-3-metoxi-benzoesav-metil-észter ("A" vegyület) 10 ml metilén-klorlddal készített oldatához keverés közben, 0 °C-on 0,30 ml trietil-amint, majd 0,22 ml hexanoil-kloridot adunk. A kapott oldatot 15 percig 0 °C-on, majd 30 percig percig szobahőmérsékleten keverjük, ezután etil-acetáttal hígítjuk és hideg vízbe öntjük. A szerves fázist elválasztjuk, egymásután 10 térfogat %-osvizes sósavoldattal, vízzel és telített vizes nátrium-kiorid oldattal mossuk, magnézium-szulfát fölött szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot 4x18 cm méretű szilikagél oszlopon flash-kromatográfiás úton tisztítjuk, eluálószerként 35 térfogat % etil-acetátot tartalmazó hexánt használunk. 0,36 g (61%) fehér, szilárd 4-(6-hexánamido-indol-l-iJ-metil)-3-metoxi-benzoesav-metil-észtert kapunk. NMR-spektrum vonalai: 0,9 (t, 3H, CH3CHj), 1,4 (m, 4H, CH3CH2CHj), 1,7 (m, 2H, CO-CHj-CHj), 2,3 (t, 2H, CO-CHj), 3,9 (s, 3H, OCH3), 4,0 (s, 3H, OCH3), 5,3 (s, 2H, NCH2), 6,5 (d, 1H, indol-H3), 6.6 (d, 1H, m-MeO-C6H3), 6,9 (d, 1H, indol-H5), 7,1 (d, 1H, indol-H2), 7,2 (széles s, 1H, NH), 7,5 (d, 1H, p-MeO-C#H3), 7,6 (m, 2H), 8,0 (széles s, 1H, indol-H7). ( ( A kiindulási anyagként felhasznált " A" vegyületet a következőképpen állítjuk elő : (a) 4,0 g 6-nitro-indol és 6,71 ß 4- <bróm-metil)-3- -metoxi-benzoesav-metil-észter ( B" vegyület) 125 ml vízmentes acetonnal készített oldatához 4,0 g vízmentes kálium-karbonátot adunk, és a reakcióelegyet 48 órán át visszafolyatás közben forraljuk. A zavaros elegyet bepároljuk, a maradékot etil-acetátban szuSzpendáljuk, és a szilárd anyagot kiszűrjük. A szürletet bepároljuk, és az olajos maradékot 6 x 30 cm méretű szilikagél-oszlopon flash-kromatográfiás úton tisztítjuk. Eluálószerként 50 térfogat % metilén-kloridot tartalmazó hexánt használunk. 8,0 g (95%) élénksárga, porszerű 3-metoxi-4-(6-nitro-indiM-il-metil)-benzoesav-metil-észtert ("C vegyület) kapunk. NMR-spektrum vonalai: 3,9 (s, 3H, OCH3), 4,0 (s, 3H, OCH3), 5,4 (s, 2H, NCH2)„ 6,7 (dd, 1H, indol-H3), 6,8 (d, 1H, m-MeO-CÄH3), 7,4 (d, 1H, indol-H2), 7,5-7,7 (m, 3H), 8,0 (dd, 1H, indol-H5), 8,3 (széles s, 1H, indol-H7). (b) 0,34 g előredukált 10 súly %-os palládium/ csontszén katalizátor 5 ml etil-acetáttal készített szuszpenziójához 1,38 g "C" vegyület 15 ml etil-acetáttal készített, 2 csepp 20 térfogat % etil-acetátos ecetsav-oldatot is tartalmazó oldatát adjuk. A reak-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7
