193936. lajstromszámú szabadalom • Fusarium oxysporum lipázt tartalmazó mosószer adalékanyag
193936 4 Standart körülmények: hőmérséklet 30,0°C pH 7-0 reakcióidő 20 perc szubsztrát tributirin A módszert részletesebben az AF 95/4 (1982-08-18) leirat tartalmazza, amely kívánságra a NOVO Industrie A/S, Bagsvaerd, pánia, cégtől beszerezhető. A találmány szerinti eljárásban az enzimes mosószer adalékanyag előállítására előnyösen a DSM 2672 Fusarium oxysporum lipáztermelő törzset alkalmazzuk. A DSM 2672-t a Fusarium oxysporum Schlecht törzsként azonosítottuk. A DSM 2672 Fusarium oxysporum törzs moríológiai tulajdonságai pontosan meg. felelnek a Genus Fusarium, C. Booth, CMI, 1971, szerinti Fusarium oxysporum fajta leírásnak. A lipáz pH aktivitás görbéjét is meghatároztuk. A lipáz aktivitást az AF 95/4-GB szerint mértük, azzal a módosítással, hogy a normál 7 táptalaj pH érték mellett a táptalaj pH érték 4, 5, 6 és 8,9, 10 értékre is módosítottuk. Mivel a tributirin magas pH értékeken lipáz jelenléte nélkül is lebomlik, a pH görbét az autobomlásnak megfelelően korrigáltuk, fgy 10 pH érték körüli aktivitás optimumot kaptunk. Az enzim stabilitása széles pH intervallumban kiváló, és 5°C-on 4,5-11 pH intervallumban, illetve 25°C-on 5-10 pH intervallumban 18 óra után az aktivitás 80%-a fennmarad. A lipáz aktivitás hőmérséklet optimuma 40°C körüli érték. Az enzim 30 percig stabil 40°C-on, amely a fent említett 60°C körüli, vagy ez alatti hőmérsékleten végzett ún. alacsony hőmérsékletű mosási eljárásokban igen előnyös tulajdonság. A találmány szerint előnyösen az enzimes mosószer adalékanyag nem porlódó granulátum formájú.A granulátumot számos különböző módszerrel állíthatjuk efő. Ilyen például az 1,862,365 számú brit szabadalmi leírásban leírt eljárás, amely extruder és labdacs gyártó (MARUMERIZER név alatt forgalmazott) berendezések alkalmazásával és a 4,106,991 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerinti eljárás, amely dobgranulátor alkalmazásával állítja elő az enzimtartalmú granulátumot. A találmány különösen előnyös kiviteli alakja szerint az enzimes mosószer adalékanyag enzim stabilizáló segédanyagot tartalmazó folyadék formájú. A stabilizátor lehet propilénglikol vagy más enzimoldatot stabilizáló anyag. A folyékony adalékanyag alkalmazása egyre kedveltebbé válik, könnyű kivitelezhetősége miatt. A talámány szerint az enzimes mosószer adalékanyag lipáz aktivitása 20,000 és 100,000 LU/g adalékanyag közötti. így a mosóoldatban megfelelő lipáz aktivitás biztosítható abban az esetben, amikor 0,2-2 g mosószer adalékanyag/100 g mosószer és 1-5 g mosószer/1 mosóoldat mennyiséget alkalmazunk. 3 A találmány szerint az enzimes mosószer adalékanyag a lipáz mellett előnyösen proteolitikus enzimet is tartalmaz. Azt találtuk, hogy a proteolitikus mosószer adalékanyag nem rontja le a (fehérje) lipáz aktivitást sem az adalékanyagban, sem a mosószerben, sem pedig a mosóoldatban. Ennélfogva a proteolitikus és lipolitikus mosószer adalékanyagok ősszeférhetőek, és az ilyen mosószer adalékanyagok igen nagy AR értékű, magas tisztító hatásosságot mutatnak. A NOVO Industri A/S által Bacillus licheniformis segítségével termelt ALCALASE proteolitikus enzim kiváló eredménnyel alkalmazható az eljárásban. A kevert enzimes adalékanyagot vagy az előzetesen előállított proteináz granulátum és lipáz granulátum összekeverésével, vagy a proteináz koncentrátum és lipáz koncentrátum öszszekeverésével, majd a keveréket granuláló segédanyagokkal történő granulálásával állíthatjuk elő. A találmány szerinti enzimes mosószer adalékanyag proteolitikus aktivitása körülbelül 0,5-3,0 Anson egység/g adalékanyag értékű. Ilyen módon 0,2-2 g adalékanyag/100 g mosószer, és 1-5 g mosószer/1 mosóoldat adagolással megfelelő proteolitikus aktivitást lehet elérni. A találmány tárgya továbbá eljárás mosószer előállítására, azzal jellemezve, hogy a fenti találmány szerinti eljárással előállított enzimes mosószer adalékanyagot tartalmaz, amelynek aktív hatóanyaga mikrobiológiaiiag előállított lipáz. A találmány szerinti adalékanyagokat tartalmazó mosószerek előnyösen 0,2-2,0 tömeg% mennyiségű, találmány szerinti enzimes mosószer adalékanyagot tartalmaznak. Ezzel az eljárással az enzimhatás és az egyéb mosószer alkotó hatóanyagok hatása között megfelelő egyensúly tartható fenn. A fenti mosószerrel a mosást célszerűen 7-11 közötti pH-értéken és 60°C alatti hőmérsékleten végezzük. Az eljárásban a mosóoldat előnyösen 1-5 g mosószert tartalmaz 1 1 mosóoldatra vonatkoztatva. így megfelelő, jellemzően 1,000— 5,000 LU/1 mosóoldat közötti, enzim-aktivitás biztosítható a mosóoldatban. A fenti körülmények alkalmazásával normál mosási idő, körülbelül 20 perc alkalmazásával igen magas AR értéket kapunk. A találmány szerinti eljárás az alábbi példákon részletesen bemutatjuk. 1. példa A példa a találmány szerinti eljárásban előállított enzimes mosószer adalékanyag aktív hatóanyagának előállításához szükséges alap tápoldat előállítását mutatja be. A táptalaj az alábbi anyagokat tartalmazza (g/1): szójabab liszt 50 glükóz 50 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
