193928. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bbm-1675 jelű daganatellenes hatású antibiotikumok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193928 25 26 Vékonyrétegkromatográfiás (VRK) és nagyteljesítményű folyadékkromatográfiás (NTFK)adatok a BBM komponensekről A. 1. sz. tanulmány - összefoglalás VIII. Táblázat BBM-1675 komponensek VRK és NTFK adatai VRK (Rf) NTFK (retenciós idő, perc) Szilikagél Ci8 fázisfordított szilikagél Lichtosorb RP-18 CHC13—MeOH CH3CN-H2O CH3CN-MeOH-O,1 m CH3COONH (5:1 tf/tf) (75:25 tf/tf) (5:2:3 tf/tf) BBM-1675Ai 0,74 0,18 13,3 BBM-16 7 5A2 0,71 0,21 17,3 BBM-1675A3 0,72 0,28 8,0 BBM-1675Ait 0,71 0,78 5,1 BBM-1675Bi 0,63 0,23-BBM-1675B2 0,60 0,16 B. 2. sz. tanulmány — A tisztított A, és A2 komponens VRK és NTFK adatai VRK Az összes normál fázisú kromatográfiás vizsgálatokhoz Analtech GHLF Silica Gel Uniplate márkájú lemezeket használtunk. Az egy dimenziós VRK-hoz használt lemezek 2,5 x 10 cm méretűek voltak. Ezeket 6,4 cm átmérőjű, 12 cm magas üveghengerekben hívtuk elő, amelyek az eluálószerből 10 ml-t tartalmaztak. A két dimenziós VRK vizsgálatokhoz 7,5 x 10 cm méretű lemezeket használtunk. A mintát a baloldali alsó saroknál vittük fel l cm távolságra az élektől. A lemez első előhívása 50 ml első eluálószert tartalmazó tartályokban (12,7 cm széles, 8,6 cm mély és 13 cm magas) történt. Ezután a lemezt levegővel megszárítottuk, az óra járásával ellenkező irányban 90°-kal elforgattuk és a második tartályban hívtuk elő, amely a második eluálószerből 50 ml-t tartalmazott. A fázisfordított kromatográfiás vizsgálatokhoz Whatman-féle előre bevont C-18 szilika gél lemezeket használtunk. A 2,5 cm x 7,6 cm méretű lemezeket 10 ml eluálószert tartalmazó üveghengerekben hívtuk elő. A normál fázisú lemezeket először 254 nm UV fény alatt vizsgáltuk. Ezután a lemezeket J2 kristályokat tartalmazó üveghengerekbe (6,4 cm átmérő, 12 cm magasság) tettük. Mintegy két perc elteltével a lemezeket újra megvizsgáltuk. A fázisfordított lemezeket csak 254 nm UV fényben vizsgáltuk. A zónákat ügy derítettük fel, hogy kerestük egy impregnált színezék fluoreszcenciájának kioltódását. Analitikai magasnyomású folyadékkromatográfia A következő alkotóelemekből állítottuk össze a rendszert: a Waters Associates 6000A típusú folyadékszállítási rendszer szivattyúja, 14 Varian Varichrom VUV-10 típusú UV/látható tartományban működő detektor 254 nm 0,1 OD-ra beállítva, Fisher Recördal sorozatá_0 nak 5000 típusjelzésű adatrögzítője, Waters Associates 660 model szerinti oldószer programozója, Waters Associates U6K model szerinti injektora, Alltech, p-Bondapak C../10 p oszlopa (4,6 mm belső átmérő x 25 cm hosszú) 35 egy Whatman Co. Pell ODS (0,03-0,038 mm), védőkolonna (4,6 belső átmérő x 5 cm). Az alkotóelemeket 316 jelzésű saválló acél csővel (1,6 mm külső átmérő - 0,13 mm belső átmérő) kötöttük össze. Az eluálószert az összes vizs- 40 gálatoknál 2 ml/perc sebességgel nyomtuk át. Preparatív nagynyomású folyadékkromatográfia Egy középnyomású folyadékkromatográfiás rendszer szerkesztéséhez a következő alko- 45 tó elemeket használtuk: Fluid Metering, Inc. RP-SY 2CSC FMI laboratóriumi szivattyú, Fluid Metering, Inc. PD-60 LF FMI pulzáló nedvesítő, polipropilén csőből (3,0 mm külső átmérő, 50 1,5 mm belső átmérő) készült 8,65 mm külső átmérő karton csőre felcsavart minta-hurok, Glenco 3500 szériájú univerzális LC oszlopai, Instrument Specialities Co. UA-5 típusú Abszorbció/Fluoreszcencia Monitor 6-os típusú 55 optikai egységgel, Instrumentation Specialities Co. 590 típusú áramlást megszakító szelep és egy Instrumentation Specialities Co. 328 típusú frakciokollektor. Az alkotóelemeket polietilén és teflon csővel (3,0 mm külső átmérő, 1,5 mm belső átmérő), valamint Glenco Multifit kapcsolókkal és szelepekkel kötöttük össze a felsorolás sorrendjében. A Glenco 3500 univerzális LC oszlopokat szokványos eljárással töltöttük meg a kijelölt abszorbensnek a meghatározott oldó- 65 szerrel képzett zagyával. A leülepedett ágy és
