193887. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enkefalináz-gátló szubsztituált alanin-származékok és e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193887 szilárd maradékot metanol és víz elegyéből átkristályosítjuk. A fehér bolyhos tűk alakjában kivált terméket kiszűrjük és vákuumban szárítjuk, így 3,00 g terméket kapunk, amely 122—124°C-on olvad. A vékonyrétegkromatogrammon lényegében egy folt látható, Rg.0,2 (kloroform : metanol : viz = 100 : 1 : 0,05). F) N-[L-l-(Pivaloil-oxi-metil)-karbonil-2-fenil-etil]-L-fenil-alanil-ß-alanin-pivaloil-oxi - -metil-észter A 3E) példában kapott termék 1,0 g-jának (2,3 mmól) és a 3B) példában kapott termék 0,89 g-jának (2,3 mmól) elegyéhez 25 ml dimetil-formamidban 1,01 ml (8 mmól) N-etil-morfolint, majd 352 g (2,3 mmól) 1 -hidroxi-benzotriazol-hidrátot és 439 mg (2,3 mmól) 1- (3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidrokloridot adunk és az elegyet szobahőmérsékleten éjszakán át keverjük. A vékonyrétegkromatográfiás analízis még kiindulási anyag jelen'étét mutatja. A reakcióelegyet 40—50°C-on melegítjük 6 óra hosszat, majd szobahőmérsékleten nagyjuk állni egy éjszakán át. Az elegyet vízbe öntjük és néhány alkalommal éterrel extraháljuk, majd az éteres fázist vízzel alaposan mossuk, szárítjuk és bepároljuk. így 1,2 g olajat kapunk, amit Merck vékonyrétegkromatográfiás célra készült kovasavgélen (silicagél G) kromatografálunk, így 0,9 g olajat különítünk el, ami egykomponensü: R/= 0,4 (etil-acetát : hexán = 1:2) (ugyanezt a rendszert használjuk az oszlopkromatográfiás tisztításhoz is). Analízis a C33H44N209 összegképlet alapján: számított: C: 64,69; H: 7,24; N: 4,57%; talált: C: 64,47; H: 7,20; N: 4,29%. [a]^6 = —21,7° (c = 1,0, DMF). 4 4. példa N- [N- [L- [1- [(2,2-Dimetil-l-oxo-propoxi)-metoxi] -karbonil] -2-(4-fenil)-feniI-etil] -L-fenil-alanil] -ß-alanin A( N-[DL-l-Karboxi-2-(4-fenil)-fenil-etiI] - -L-fenil-alanin-benzil-észter 24,0 g 4-fenil-fenil-piroszőlősav és 23,2 g L-fenil-alanin-benzil-észter-hidroklorid 1 liter, tetrahidrofurán és víz 9:1 arányú elegyével készült szuszpenziójának pH-ját trietil-amin fokozatos adagolásával 6,6-re állítjuk, keverés közben. Ezalatt minden szilárd anyag feloldódik. A kapott oldatot szobahőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük, majd 3,5 g nátrium-ciano-bór-hidridnek a fenti oldószerben készült oldatát csepegtetjük hozzá keverés közben. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten keverjük egy éjszakán át. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson 200 ml-re bepároljuk. A maradékot 600 ml 0,3 n sósavba öntjük hűtés és keverés közben. Gumiszerű anyag különül el. A vizes anyagot dekantáljuk, és a szilárd anyagot 120 ml etanollal keverjük. A szilárd anyagot kiszűrjük és a nedves szilárd anyagot 100 ml friss etanollal keverjük. Egy éjszakán át való állás után a szilárd anyagot kiszűrjük és szárítás után 22,3 g szilárd terméket kapunk. 11 B) N- [DL- [I- [(2,2-Dimetil-I-oxo-propoxi)-metoxi]-karbonil] -2-(4-feni!)-fenil-etfl] -L - -fenil-alanin-benzil-észter 9,6 g N-[DL-l-karboxi-2-(4-fenil)-fenil - -etil]-L-fenil-alanin-benzil-észter 30 ml dimetil-formamiddal készült oldatához 3,05 ml trietil-amint adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten keverjük 20 percig és 3,15. ml klór-metil-pivalátot adunk hozzá. A kapott elegyet keverés közben egy fürdőben 45—55°C-on tartjuk, majd szobahőmérsékleten keverjük egy éjszakán át. A kapott elegyet 300 ml vízzel hígítjuk és háromszor 150 ml éterrel extraháljuk. Az egyesített éteres rétegeket kétszer 100 ml vízzel extraháljuk és az éteres oldatot vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. Szűrés és vákuumban való bepárlás után. 7,5 g szirupos terméket kapunk. Ezt az anyagot 135 g kovasavgélen kromatografáljuk, eluáló szerként "“etil-acetát: :ciklohexán = 85:15 arányú elegyét használva. A termék kívánt diasztereomer elegyét taralmazó frakciókat vékonyrétegkromatográfiás úton azonosítjuk, egyesítjük és vákuumban szárazra pároljuk, így 5,9 g terméket kapunk szirup formájában. C) N- [DL- [1- [(2,2-Dimetil-l-oxo-propoxi)-metoxi] -karbonil] -2-(4-fenil)-fenil-etil] -L - -fenil-alanin \ fenti termék 5,9 g-jának 175 ml etanolla! készült oldatát 750 mg 10%-os palládium-szén jelenlétében 1,05—2,11 bar nyomáson hidrogénezzük. A reakcióelegyet 250 ml etanollal hígítjuk és 45°C-ra melegítjük, hogy a kvált termék feloldódjék. A meleg oldatból a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet bepárolva 4,4 g terméket kapunk. D) N- [N- [L- [1- [(2,2-Dimetil-l-oxo-propoxi)-metoxi] -karbonil] -2-(4-feniI)-fenil-etll] -L - -fenl-alanil] -ß-alanin-benzil-eszter A fenti termék 3,25 g-ját, 1,7 g N-(N,N-dimetil-amino-propil) -N’-etil-karbodiimid-hidrokbridot, 1,3 g hidroxi-benzotriazolt és 3,0 g ß-al anin-benzil-észter-p-toluol-szül foná tot 25 ml dimetil-formamidban tartalmazó elegyhez 1,2 ml N-etil-moríolint adunk keverés közben, majd szobahőmérsékleten keverjük 3 óra hosszat. Ezután 200 ml jeges vízzel hígítjuk és kétszer 125 ml éterrel extraháljuk. Az egyesített éteres extraktumokat 250 ml vízzel mossuk és vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. Szűrés és bepárlás után 5,25g maradékot kapunk. Kovasavgélen, kloroform : :etil-acetát =10:1 oldószerelegyben vékonyrétegkromatográfiásan vizsgálva a termék két fő komponenst tartalmaz, amelyek R; értéke 0,36 és 0,32 (a foltok részben átfedik egymást). Ezt az anyagot 350 g (vékonyrétegkromatográfiás célra készült) kovasavgélen kloroform : etil-acetát = 100 : 5 eluálószert alkalmazva kromatografáljuk. Az egyes komponenseket tisztán tartalmazó franciókat vékonyrétegkromatográfiás úton azonosítjuk, egyesítjük és bepároljuk. Ily módon a gyorsabban mozgó komponensből 650 mg-ot (L,L-diasztereoizomer), a másik komponensből 12 7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
