193838. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új fiziológiailag aktív vegyületek mikrobiológiai úton való előállítására
193838 4 ahogyan itt ebben a leírásban használjuk, azokra a törzsekre vonatkozik, amelyek az (1) általános képletű vegyületek legalább egyikének termelésére képesek. Az ilyen törzsek közé tartozik a Bacillus cereus BMG302- -F67 törzs, amelyet földmintából izoláltak az Institute of Microbial Chemistry (Shinagawa-ku, Tokió) intézményében. A törzs a Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology-nál (Fermentációs Kutatóintézet, Ipari Tudományos és Technológiai Ügynökség) letétbe van helyezve 1984. 09.12. óta, ahol a FERM—P 7843 számot kapta. A törzs mikológiái tulajdonságait az alábbiakban írjuk le. A BMC 302-fF67(FERM P 7843) törzs mikológiái tulajdonságai 1. ) Sejt-morfológia (i) Pálcika, mintegy 1,0X2,6 mikron méretű (ii) Speciális polimorfizmus nem figyelhető meg. (iii) Mozgékony, peritrich csillókkal. (iv) Ellipszoid spórái vannak, amelyek mérete 0,6 X 2,0 mikron a központi helyzetben, és amelyek hőrezisztensek. A sejt duzzadása nem figyelhető meg. (v) Gram-festéssel pozitív (vi) Nem saválló 2. ) Növekedés különböző tápközegeken (30°C hőmérsékleten tenyésztve kivéve a húsleves-zselatin szúrt tenyészetet). (i) Húsleves-agar lemeztenyészet. Homályos, nem átlátszó, lényegében kerek telepek, amelyek szabálytalan, gyökérszerű perifériával rendelkeznek. Ráncok tűnnek fel a telepek felszínén a tenyésztés kb. 3. napja után. Diííundálható pigment nincs. (ii) Húsleves-agar ferde tenyészet A sejt diffúz módon nő a tápközeg felszínén, nem átlátszó, homályos, halvány-sárgásbarna telepeket alkotva. Ráncok tűnnek fel a tenyésztés kb. 3. napján, homályos felületet nyújtva. Diffundálható pigment nincs. (iii) Folyékony húsleves tenyészet A tápközeg felszínét szemcsék fedik a tenyésztés első napján, és a sejtek egy kémcső fenekén a tenyésztés 5. napján kezdenek kicsapódni. (iv) Húsleves-zselatin szúrt tenyészet. A tenyésztés első napján szemcsék képződnek a tápközeg felületén, és keskeny sávon zselatin elfolyósodás kezdődik mind 20°C, mind 30°C hőmérsékleten. Az elfolyósodás lényegében teljessé válik a tenyésztés 7. napján. (v) Lakmuszos tej. A BCP-tej tápközegen a peptonizálás a tenyésztés 2. napján kezdődik, és a 7. napon fejeződik be. A reakció alkálikus. Kicsapódás nincs. 3. ) Fiziológiai tulajdonságok (A tenyész tés hőmérséklete 30°C, hacsak másképpen nem jelezzük): 3 (i) Nitrát-redukció: pozitív (ii) Denitrifikálás (Komagata és munkatársainak módszerével): pozitív (iii) MR vizsgálat: negatív (iv) VP vizsgálat: pozitív (v) Indol-termelés: negatív (vi) Hidrogén-szulfid termelés: negatív (vii) Keményítő hidrolízis: pozitív (viii) Citromsav-hasznosítás (Koser-féle tápközegen és Christensen-féle tápközegen és Christensen-féle tápközegen): pozitív (ix) Szervetlen nitrogén-források hasznosítása (mind káliumnitrát, mind ammónium-szulfát) : pozitív (x) Festék-termelés [King-féle A és King-féle B tápközegen (Eiken)]: sárgás pigment gyenge termelése (xi) Ureáz [karbamid-tápközeg (Eiken) ]: negatív (xii) Oxidáz: negatív (xiii) Kataláz: pozitív (xiv) Növekedési tartomány: növekedés 10°C és 37°C között, nincs növekedés 50°C hőmérsékleten, optimális növekedés 27 és 37°C között; növekedés pH 5,0 és pH 9,0 között, optimális növekedés pH 6,0 és 8,0 között. (xv) Viselkedés oxigénnel szemben: fakultatív anaerob (xvi) O—F vizsgálat (Hugh-Leifson módszer szerint): fermentációs típus (de gázképződés nélkül) (xvii) Sav- és gázképződés szacharidokból (Hugh-Leifson tápközegben): negatív az összes szacharidnál Szacharidok BCP indikátor BTB indikátor___ L-arabinóz - ~ D-xilóz -D-glükóz - + D-mannóz - -D-fruktóz - + D-galaktóz Maltóz - -Szacharóz - + Laktóz - _ Trehalóz D-szorbit - -D-mannit - -Inozit Glicerin - -Keményítő - -(xviii) Növekedés 7% NaCl-t tartalmazó tápközegen: pozitív összefoglalva a fenti tulajdonságokat, a BMG 302-fF67 mikroorganizmus fakultatív anaerob gram-pozitív pálcák, amelyek spórákkal, peritrich csiliókkal és mozgékonysággal rendelkeznek. A spóra ellipszoid, és helyzete centrális. Ez hőrezisztens. A sejt duz-3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65