193791. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-helyettesített-1,3-propilidén-difoszfonát származékok és gyógyászati készítmények előállítására
193791 b. ) Az 1,3-difoszfonát-származékokból általában 0,9%-os nátrium-kloriddal készítünk törzsoldatot. A vízben nem oldódó vegyületeket 50%-os etanolban oldjuk. Azt tapasztaltuk, hogy az etanol a vizsgálatnál alkalmazott végkoncentrációban nem gyakorolt észlelhető hatás a pitvar ritmusára. 5,0:10® mól/1 vizsgálandó vegyület alkalmazásakor a pitvar ritmusa több mint 5%-kal csökkent. Ez a különbség szignifikánsnak tekinthető. c. ) Eredményeinket a 4. táblázatban ismertetjük. Az értékek a kezdeti pitvar-ritmus %-ában vannak megadva, (átlag±SEM). Valamennyi vizsgált vegyületet hatásos ritmuscsökkentőnek találtuk. A vizsgálatban kapott eredmények azt igazolják, hogy az 1,3- -difoszfonát-származékok szívbetegségek és aritmia kezelésére használhatók. 55 4. Táblázat 1,3-difoszfonát-származékok Vegyület száma Kronótrop hatása patkány pitvarra 55. I7,5±4,6 73. 18,8+11,2 74. 8,3±4,5 75. 14,8±4,8 83. 4,4±0,6 D. 1,3-difoszfonát-származékok vérnyomáscsökkentő hatása patkányon Vérnyomáscsökkentő hatás intravénás adagolásnál a) Módszerek Him Wistar patkányokat pentobarbitállal (Nembutal, 60 mg/kg i.p.) anesztetizálunk, majd 5 mg/kg i.p. heparinnal kezeljük őket. Légcsősipolyt készítünk, majd a jobb nyaki verőérbe kanült vezetünk (PE 50 katéter); a vérnyomást Statham P 23 db nyomás transzduktorral mérjük és Beckman frószerkezeten regisztráljuk. b) A vizsgálandó vegyületeket és gyógyszereket 0,5-1,5 mg/kg mennyiségben adjuk be az állatoknak. A nyaki vénába injektáljuk a vizsgálandó vegyület 0,9%-os nátrium-kloridban készült oldatát. A beinjektált mennyiség legfeljebb 100 pl. A vízben nagyon rosszul oldódó vegyületeket 2% Tween-80-ban szuszpendáljuk. A vívőanyagot önmagában beinjektálva nem észlelhető vérnyomáscsökkentő hatás. c) Eredményeinket az 5. táblázatban ismertetjük. Az eredményeket a kezdeti vérnyomás %-ában kifejezve (átlag ± SEM) adjuk meg. Határozott akut vérnyomáscsökkentő hatást észleltünk minden vizsgált 1,3-difoszfonát-származéknál. Megjegyezzük, hogy a 73., 74. és 82. számú vegyületek erősebb vérnyomáscsökkentő hatással bírnak, mint a klasszikus vérnyomáscsökkentő gyógyszerek és a referencia anyagként alkalmazott kalciumantagonisták. 5. Táblázat 1,3-difoszfonát-származékok és ismert vérnyomáscsökkentő szerek akut vérnyomáscsökkentő hatása patkányon, intravénás adagolás mellett 56 Vegyület Az átlagos vérnyomás csökkenése száma (%) 0,5 mg/kg 1,5 mg/kg 25. 23,2 ±2,2 41,4± 1,0 26. 18,1 ±3,0 41,6 ± 1,3 27. 25,6 ±2,2 35,0 ±4,7 30. 17,0 ±0,0 34,4 ±5,1 36. 39,9 ±1,6 33. 13,2 ±0,0 16,0 ±0,6 55. 28,2 ±0,7 31,1 ±6,4 73. 50,0 ±3,8 74. 50,8 ±2,7 75. 22,8 + 1,6 83. 10,6 ±0,5 82. 40,1 ±3,2 Ismert Az átlagos vérnyomás csökkenészerek se (%) 1,0 mg/kg Captopril 0 Propranolol ll,8±l,l Metil Dopa 0 Diltiazem 47,9±0,0 Vérnyomáscsökkentő hatás patkányon orális adagolás esetén Mivel a kalcium-antagonisták vérnyomáscsökkentő gyógyszereknek mutatkoztak, további állatkísérletes modellként vizsgáltuk az orálisan adagolt 1,3-difoszfonát-származékok vérnyomáscsökkentő hatását spontán magasvérnyomású patkányokon (SHR). Néhány kiválasztott vizsgálandó vegyületet orálisan adagoltunk éber patkányoknak, és a farkukon mért vérnyomást nyomonkövettük. Minden kezelt patkányon jelentős és tartós vérnyomáscsökkentő hatást észleltünk. Az eredmények a szer beadását követően 2 óra múlva mért értékeket mutatják. Az eredményeket a 6. táblázatban ismertetjük. Az eredmények azt a nyilvánvaló lehetőséget mutatják, hogy az 1,3-difoszfonát-származékok emberek magas vérnyomásának klinikai kezelésében orálisan alkalmazhatók. Egyes vizsgált vegyületek, így a 79., 90., 93., 92., 89. és 91. számú vegyületek olyan jelentősen csökkentik a vérnyomást, mint a referencia anyagként alkalmazott kalcium-antagonisták, amely utóbbiak magas vérnyomás elleni klinikai használatának lehetőségét már igazolták. 6. Táblázat Egyes 1,3-difoszfonát-származékok és referencia vegyületek hatása magas vérnyomásű patkányok vérnyomására Vegyület Vérnyomás csökkenése (%) száma W. Ï5 74. 12 75. 37-41 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 29
