193738. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glioxilil-spermidin előállítására
193738 6 A találmány szerinti eljárást az alábbi példákon mutatjuk be, anélkül azonban, hogy igényünket azokra korlátoznánk. 1. példa l. N, - (N’-benzil-oxi-karbonil-L-szeril ) - N2-- (2-ciano-etil) -1,4-diamino-bután (VII) előállítása 47,8 g (0,2 mól) N-benzil-oxi-karbonil-L-szerint 200 ml dioxánban oldunk, majd az oldathoz 25,3 g (0,22 mól) N-hidroxi-borostyánkősav-imidet adunk 45,4 g (0,22 mól) diciklohexil-karbodiimid (DCCI) 50 ml dioxános oldatának becsöpögtetése közben, a reakcióelegy hűtését és keverését biztosítva. A reakcióelegyet egy napon keresztül állni hagyjuk, a kivált diciklohexil-karbamidot szűréssel elkülönítjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott párlási szilárd maradékot 150 ml etil-acetátban oldjuk, és a kapott oldatot cseppenként 42,36 g (0,3 mól) ciano-etil-putrescin (V) 300 ml etil-acetátban elkészített oldatához adjuk keverés közben. Ezután a reakcióelegyhez 300 ml etil - -acetátot adunk, majd az elegyet egy napon keresztül keverjük, majd 100 ml etil-acetátot, 100 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot és 50 ml vizet adagolunk és egy órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet szerves és vizes fázisokra választjuk szét, a szerves fázist 200 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot 50 ml etanolban oldjuk, a kapott oldatot tömény sósavval jeges hűtés közben megsavanyítjuk és egy napon keresztül 5°C hőmérsékleten állni hagyjuk, a kivált anyagot szűrve 26,7 g súlyú fehér kristály formájában N, - (N’-benzil-oxi-karbonil-L- szer il ) -N2- (2-ciano-etil ) -1,4-diamino-bután (VII) monokloridot kapunk. A vizes fázist hétszer 200 ml etil-acetáttal extraháljuk és az etil-acetátos fázist 200 ml telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot 65 ml etanolban oldjuk, a kapott oldatot jeges hűtés közben tömény sósavval megsavanyítjuk és egy napon keresztül 5°C hőmérsékleten állni hagyjuk. Ily módon 34,5 g (VII) képletű vegyület monokloridját kapjuk. A (VII) monoklorid súlya 61,2 g. Kitermelés: 76,7 % Olvadáspont: 147-149°C NMR (CD3OD) : 6 1,4-1,75 (CH2x2), 2,4-3,0 (CH2Nx2, CH2CN), 3,1-3,4 (CONHCH2, 3,7 (CH2OH, d), 4,1-4,3 (CHNH), 5,07 (<ó>CH2), 7,29 «5». IR (KBr): v (cin-1) 3290, 3060, 2940, 2870, 2240, 1700, 1640, 1540, 1475, 1365, 1300, 1240, 1140, 1100, 1020, 700. 2. N1-L-szeril-N2- (2-ciano-etil ) -1,4-diamino-bután (XIV) előállítása 5 20 g (0,05 mól) N,-(N’-benzil-oxi-karbonil-L-szeril) -N2- (2-ciano-etil) -1,4-diamino-bután (VII)- monohidrokloridot 400 ml metanolban melegítés közben oldunk, majd az oldathoz 1 g 10%os palládium/szenet adunk, a hidrogénezést 40°C hőmérsékleten, 3 órán keresztül, hidrogéngáz átáramoltatásával hajtjuk végre. A reakció befejezése után 30 percen keresztül nitrogéngázt buborékoltatunk át az elegyen, és a katalizátort szűréssel eltávolítjuk. A szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk, a párlási maradékot 100 ml meleg vízben oldjuk, az oldatot 250 ml DowexR 50Wx8 (H+ típus) (Dow Chemical Co.,) oszlopon vezetjük keresztül, majd az oszlopot 1 liter vízzel mossuk,és az anyagot 2n vizes ammóniával eluáljuk. Az aktív frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepárolva 9,18 g szirup formájú N,-L-szeri!-N2- (2-ciano-etil)-1,4-diamino-butánt (XVI) kapunk. Kitermelés: 80,4%. NMR (CD3OD): 6 1,4-1,8 (CH2x2), 2,5-3,05 (CH2Nx2, (CH2CN), 3,2-3,5 (CONHCH2, CHNH2), 3,65 (CH2OH, d) IR (KBr): v (cm-1) 3280, 3060, 2930, 2850, 2230, 1650, 1540, 1460, 1360, 1265, 1120, 1050. 3. N-szeril-spermidin előállítása (I) 8,82 g (38,6 mmól) NrL-szeril-N2-(2-ciano-etil)-l,4-diamino-bután (XIV) 200 ml metanolban oldunk, majd az oldathoz részletenként, jeges-hűtés közben 11,04 g (46,4 mmól) CoCl2.6H20-t és 8,77 g (231,8 mmól) nátrium-bórhidridet adunk. Az adagolás beíejeztében a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük, majd 200 ml vizet adagolunk, majd a pH-t 2N sósavval 6,0 értékre állítjuk. A kivált fekete terméket kiszűrjük, a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A szilárd párlási maradékot 200 ml vízben oldjuk, 2 liter CM-SephadexR (Pharmacia Co.) oszlopon kromatografáljuk, az oszlopot 2 liter vízzel mossuk, majd grádiens elűciót végzünk 3 liter víz és 3 liter 1M vizes nátrium-klorid oldat elegyével. Az aktív frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A párlási szilárd maradékot metanollal extraháljuk és a metanolos extraktumot 500 ml SephadexR lH-20-al töltött oszlopon bocsátjuk át és metanollal eluálunk. Az aktív frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepárolva szirup formában 5,759 g N-szeril-spermidin (I)- trihidrokloridot kapunk Kitermelés: 43,63%. NMR (CD3OD) : 6 1,5-2,5 (CH2x3), 2,9-3,5 (CH2Nx4), 3,95 (CHjOH), 4,1 (CHNH2) IR (KBr): v (cm'') 3410, 3030, 1670, 1620, 1560, 1460, 1270, 1160, 1060. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
