193677. lajstromszámú szabadalom • Eljárás növények viroidfertőzései ellen
193677 2. Vizsgálat A vizsgálatot az 1. vizsgálatnál leírtak szerint végeztük. Mindegyik vizsgálathoz — egészséges kezeletlen; PSTV-vel fertőzött kezeletlen, tiaminnal kezelt egészséges, illetve PSTV-vel fertőzött és tiaminnal kezelt — 15-15 cserép növényt használtunk. Kertészeti sterilizált földkeverékkel töltött 12 cm átmérőjű cserépbe szikleveles kor utáni állapotban két-két paradicsompalántát ültettünk. Az 1. vizsgálattól eltérően a tiamin kezelést nem permetezéssel végeztük, hanem a tiamin vizes oldatát (100 mg/liter) a talajra öntöztük. Cserepenként 20 ml oldatot használtunk. Az öntözést három egymást követő napon megismételtük. A kezelés hatása csak lasabban, a harmadik nap után jelentkezett, de hasonló volt az 1. vizsgálatban tapasztaltakhoz. A leveleken keresztül való felvétel tehát gyorsabb, mint a gyökereken keresztül. 3. Vizsgálat A vizsgálatot az 1. vizsgálatnak megfelelően hajtottuk végre, de a tiaminnal való kezelést csak a fertőzés után egy héttel, egy alkalommal végeztük. A hatás hasonló volt az 1. vizsgálatban tapasztaltakkal, de a kezelés után két hét elteltével a növények friss csúcslevelein sárgulásos tünetek jelentkeztek. A tünetek újabb kezelés hatására megszűntek és a növények hasonlókká váltak az egészséges növényekhez. 4. Vizsgálat A vizsgálatot az 1. vizsgálattal megegyező módon végeztük, de a tiaminnal való kezelést közvetlenül a klímakamrába való helyezéskor elkezdtük és 10 naponként megismételtük. A fertőzött és kezelt növényeken a sárgulásos tünetek egyáltalán nem jelentkeztek, míg a kezeletlen fertőzött növények kisárgultak, nekrotizálódtak. 5. Vizsgálat A vizsgálatot az 1. vizsgálatnak megfelelően hajtottuk végre, de a 15 cserepet három, öt-öt cserépből álló csoportra osztottuk szét és a kezelést 1 mg/liter, 10 mg/liter és 100 mg/liter töménységű tiamin oldattal végeztük. A 10 mg/literes tiamin oldattal való kezelés hatására a növények hasonló módon kizöldültek, mint a 100 mg/literes tiamin oldat hatására, de a folyamat lassúbb volt, az első napon — 24 óra alatt — nem volt olyan intenzív. Az I mg/literes tiamin oldat hatására a növények csak halványzöldek lettek és később sem érték el a kontroll növények színét. 6. Vizsgálat A vizsgálatot az 1. vizsgálatnak megfelelően hajtottuk végre, de a paradicsom K 3 fajta volt és a növényeket üvegházban 25°C-on (±5°C) nappali fényviszonyok mellett (októberben) neveltük. Az első kezelést a fertőzés után két héttel 100 mg/literes tiamin oldat5 4 tál való permetezéssel végeztük és 5 naponként háromszor megismételtük. Az eredményeket a fertőzés után öt héttel értékeltük. A növények magasságát a talajba állított mérőpálcával mértük. Az adatokat statisztikai módszerekkel dolgoztuk fel. 6 Kezelés Növénymagasság ________________________(cm]_______ egészséges, nem kezelt 47,3 fertőzött, nem kezelt 37,2 egészséges, kezelt 46,2 fertőzött, kezelt 44,1 A fertőzött, kezeletlen növények levelei halványabbak voltak, mint a kontroll növényeké. A levélcsavarodás és deformáció jellegzetes tünetei azonban nagyon enyhén és nem minden növényen jelentkeztek, ami részben a közepesen erős PSTV törzsnek, részben a környezeti feltételeknek tulajdonítható. 7. Vizsgálat Burgonya szövettenyészeteket tartottunk fenn folyadékkultúrában, hetenkénti passzálással folyékony táptalajon (Bioscience reports, 1. kötet, 1. szám, 1980). A táptalaj mikro és makroelemeket — 1 mg/liter tiamint is— és növekedési hormonokat tartalmazott, de nem tartalmazott kókusztejet. Vattadugóval lezárt 100 ml-es Erlenmayer-lombikokban 30-30 ml táptalajon centrifugálva ülepített (1000/perc 5 percig) 2-2 ml fertőzött, illetve egészséges sejtet tenyésztettünk (5-5 párhuzamos vizsgálat). A lombikok sejttartalmát osztott centrifugacsövekben való ülepítéssel két naponként mértük és az eredményeket grafikusan értékeltük. Azonos tenyésztési feltételek mellett a fertőzött sejtek szaporodása az egészséges sejtek szaporodásához képest 4 nap elteltével csökkent. A fertőzött tenyészetek egy részét (5 lombik) és azonos számú egészséges tenyészetet a 4. napon tiaminnal kezeltünk oly módon, hogy a lombikok tartalmához kétszer desztillált vízzel készült, steril 1-1 ml, mg/literes tiamin oldatot adtunk. A kezelés hatására a fertőzött tenyészetek növekedése helyreállt, az egészséges tenyészeteket a kezelés lényegében nem befolyásolta. A kísérlet kezdetétől számított 18. napon az egészséges kezeletlen tenyészetek átlagosan 21,6 ml, az egészséges kezelt tenyészetek átlagosan 24,6 ml, a kezeletlen fertőzött tenyészetek átlagosan 16,1 ml, a kezelt fertőzött tenyészetek 23,3 ml ülepített sejtet tartalmaztak. A vizsgálati eredmények igazolják a tiaminnal való kezelés hatékonyságát a növények viroidfertőzéseinek megelőzésében és gyógyításában. A kezelést önmagában ismert módon, például permetezéssel, porlasztással, porozással, szórással, csávázással, a talajba való bedolgozással a viroid fertőzés előtt vagy után vé-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
