193607. lajstromszámú szabadalom • Eljárás természetes vagy mesterséges megtermékenyítésre alkalmas ivartermékek előállítására emlős állatokban
193607 kát adott arra vonatkozóan, hogy a petefészek további ciklusa fiziológiásán alakul. 20. példa Infantilis nőstény házimacska (Felis cattus domesticus) primordiális tüszőinek (stimulálása) 5 db 0,3 kg súlyú, 45-életnapos házimacska kölyköt D-Phe6, Gin8—GnRH analóggal kezeltünk úgy, hogy narkózisban a kezelés előtt a bal oldali petefészket kioperáltuk, majd a médiumot 3 napon át naponta háromszor az egyes kezelések között 4-órás időintervallumokat tartva, összesen 9 alkalommal esetenként 0.1 pg dózisú GnRH analóggal kezeltük. A hatóanyagot intramuszkulárisan adagoltuk fiziológiás NaCl és propilén-glikol szuszpenzióban. A kezelések után narkózisban a megmaradt petefészkeket kioperáltuk, vizuálisan értékeltük, majd fixálás után szövettani vizsgálatot végeztünk. Vizuálisan mindkét petefészek homogén, vajsárga színű volt, a kezelt petefészek kismértékben megnagyobbodott. A kezeletlen petefészekben csak primordiális tüszőket értékelhettünk szövettanilag, míg a kezelt petefészek metszéslapján nem számolható mennyiségű (több száz) fejlődésnek indult, az antrum-képződés különböző stádiumában lévő tüszőt regisztráltunk. A fenti eljárással megvalósítottuk a petefészek több száz primordiális tüszőjének egyidőben való stimulálását. 21. példa Szarvasmarha petesejtek előállítása in vitro embriótenyésztés céljára poszt mortem szervkultűrából Szarvasmarhákból, vágóhídon történt kábításuk és elvéreztetésük után 30—55 perccel éltávolítottuk az intakt petefészkeket, majd laboratóriumi körülmények között komplett adjuvánsban helyeztük el. A tápfolyadékhoz 15 D-Phe6, Gin8, desGly10—GnRH etil-amidot adtunk 10-9 — 10'8 g/ml koncentrációban. A szervkultúrában tartott petefészek-állományok ovulációja 16—43 órát vett igénybe. 5 A petefészkekből in vitro spontán bekövetkezett ovulációkból és a punkcióval kinyert petesejtekből 85% volt képes a meiózis (tedukciós sejtosztódás) folytatására, és in vitro eredményesen megtermékenyífhető volt 10 kapacitált szarvasmarha spermával. Az in vitro termékenyített petesejtek első két sejtosztódását figyeltük meg a kultúrában. Ezzel az eljárással lehetőséget teremtettünk arra, hogy a világszerte elterjedten használt szarvasmarha-inszeminálási technológiához hasonlóan, közvetlenül élő embriókat „inszeminálhassunk“, azaz transzplantáljunk. A vágóhidakon az üzemi igényeket messze 20 meghaladó mennyiségű embrió előállítására van lehetőség a fenti eljárás felhasználásával. SZABADALMI IGÉNYPONT 25 Eljárás emlősök pre- és posztnatális életében, infantilis korában, prepubertásában és kifejlett állapotában nemi szerveik tevékenységének a szabályozása útján természetes \agy mesterséges megtermékenyítésre alkal- 30 más ivartermékek előállítására és adott esetten azokból utód létrehozására, valamint ez ivartermék-produkció megtöbbszörözésére a fajra jellemző életteljesítményhez képest, czzal jellemezve, hogy a médiumokat legalább 35 egy, de legfeljebb 60 alkalommal, előnyösen 1—5 alkalommal 0,01—500 pg/testsúlykilogramm, előnyösen 1 —100 pg/testsúlykilogramm (I) általános képletű vegyülettel kezeljük, és az ismételt kezelések között legalább 40 2 óra, de legfeljebb 7 nap, előnyösen 2—8 óra időtartamú szüneteket tartunk. 16 Rajz nélkül Kiadja: Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Ns 3366. Nyomdaipari vállalat, Ungvár