193607. lajstromszámú szabadalom • Eljárás természetes vagy mesterséges megtermékenyítésre alkalmas ivartermékek előállítására emlős állatokban
Egyes állatfajoknál a találmány szerinti eljárás hatására az ivartermék-produkció fokozódik, más állatoknál (klinikai esetek) a csökkent értékű vagy szünetelő nemi tevékenység normalizálódik, és eléri a fajra jellemző értéket. A találmány szerinti eljárás alkalmas a nemi szervek hiperprodukciójának kiváltására és így a fajra jellemző ivartermék mennyiségének többszörözésére is (szuperovuláció). A találmány szerinti eljárással a csírahám fokozott működésre késztetésével az ejakulátumban lévő motilis spermiumok számát növeljük. A találmány szerinti eljárás lehetőséget nyújt olyan hipofízis-hiperprodukció kiváltására, amely után a hipofízis érzéketlenné válása miatt közömbös állapot alakul ki, így az eljárás fogamzásgátlásként is alkalmazható. A találmány szerinti eljárással természetszerű és mesterséges, valamint laboratóriumi életkörülmények között is előállíthatjuk a végtermékeket. Az (I) általános képletü GnRH analógok különböző ritmusú adagolásával szabályozott, fent ismertetett nemi működési formák eddig még nem közölt, új jelenségek. A találmány szerinti eljárás főbb előnyei a következők: a. ) Az eljárás alkalmazásával a nem természetes körülmények között tartott emlősállatok gonádtevékenysége javítható, illetve normális működése helyreállítható, ezáltal utód létrehozására válnak alkalmassá. b. ) Az eljárás alkalmas a petefészek hiperprodukciójának indukálására, ami lehetővé teszi a fajra jellemző ovulációs számú petesejtek többszörösének kinyerését, amelyeket in vitro termékenyítés után mint embriókat megőrizhetünk vagy recípiens állatokkal természetszerűen kihordathatunk. c. ) Az eljárás alkalmas az emlősállatok infantilis egyedeiben gonád hiperstimuláció és ezzel szuperovuláció indukálására. fgy a médiumtól már abban az időben nyerhetünk utódokat, amikor maga a médium még nem ivarérett. d. ) Az eljárás alkalmas sajátságos laboratóriumi körülmények között szervkultúrában, intakt petefészkekből poszt mortem, in vitro termékenyíthető petesejtek előállítására. így a médium halála után is nyerhetünk pl. nagy tenyészértékű állatokból utódokat. e. ) Az eljárás segítségével kinyert ivartermékek forgalmazása lehetővé teszi a nagy földrészek közötti távolság által akadályozott fajok közötti hidridizációt, és így új haszonállatfajok kialakítására nyílik lehetőség. f. ) Az eljárás alkalmas hím és nőivarú emlősállatok bármely korcsoportjában iparszerű termelési körülmények között nagy mennyiségű petesejt, spermium vagy embrió előállítására, ami lehetővé teszi pl. embrió3 tank létrehozását és az ivadékok interkonti rentális forgalmazását. g. ) Az eljárás alkalmas emlősállatok szezonális anösztruszának és gátolt spermatogenézisének feloldására. így bármely időszakban állíthatunk elő ivadékokat, ezáltal a gazdasági létesítmények jobb kihasználását teszszük lehetővé. h. ) Az eljárás alkalmas védett természeti ritkaságok mesterséges szaporítására. i. ) Az eljárás hím- és nőivarú emlősállatokban egyformán alkalmas a hipofízis érzéketlenné válását előidézni, amivel a nem kívánt terhességet elkerülhetjük olyan esetekben is, amikor az ismert fogamzásgátló szerek nem alkalmazhatóak. A találmány szerinti eljárás az alábbi kiviteli példákkal szemléltetjük. 1. példa Szuperovuláció kiváltása infantilis nősténypatkányokban 60 db 21-életnapos, 7—8 g-os infantilis nősténypatkányt fiziológiás sóoldatban oldott D-Phe , Gln8-GnRH analóggal kezeltünk intraperitoneálisan. Az állatokat — a kezelés módjától függően — különböző csoportokba osztottuk. Az 1-től 8 napig tartó kezeléssorozatban 1, illetőleg 2 pg-os előadagokat adtunk naponta 1, ill. 2 alkalommal. A kezeléseket 5 ill. 10 pg-os adagokkal fejeztük be. A kezelések befejezése után valamennyi állatot étergőzzel megöltük, a petefészküket kipreparáltuk. A petefészek eltávolítása a halál beállta után, 24 órával az utolsó kezelést követően történt. A kiértékelést vizuálisan és szövettani minták készítésével végeztük. A kontroll állatok petefészkein több fejlődő tüszőt találtunk, de egyik sem volt Gráf-tüsző méretű, ezenkívül sem sárgatestet, sem corpus haemorrhagicum-ot nem tudtunk kimutatni. Ezzel szemben valamennyi kezelt csoportban hormonhatást lehetett igazolni, amely tüszőnövekedésben, Gráf-tüszővé alakulásban, a nagy tüszők ovulációjában és szabályos sárgatestek kialakulásában nyilvánult meg. A petevezeték, valamint a méh méretnövekedése is bekövetkezett. A 60 db kezelt állat közül összesen 4 db nem reagált a kezelésre. Abban a csoportban, amely 4 napon át napi 2 alkalommal 2 pg GnRH analógot kapott, s ezt a 4. napon a 2 pg-os kezelés után 6 órával 10 pg-os dózis követte, valamennyi állat petefészkén közvetlenül az ovuláció előtt álló, felpuhult Gráf-tüszőket találtunk nagy menynyiségben. A végső érésen átesett Gráf-tüszők száma egyedenként 60 és 90 között változott, szemben a felnőtt állatokban fiziológiásnak tekinthető 12 darabbal szemben. Ugyanezt a kezelésmódot alkalmaztuk az állatok egy másik csoportjánál, azzal a különbséggel, hogy ez esetben a kezelést 6 napon át folytattuk. Ebben a csoportban a szuperovulációs teljesítményt a petefészkeken kialakult szabályos corpus luteumok darabszámával értékeltük. A fentiekben részletesen ismertetett 4 193607 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
