193538. lajstromszámú szabadalom • Eljárás teichomycin A2 tiszta 1,2,3,4 és 5 faktorok elkülönítésére

193538

1,5 (m), 1,8—2,0 (m), 2,7—4,5 (m), 4,6— 5,7 (m), 6,2—8,0 (m);

g) sóképzésre képes sav-funkcióval rendelkezik;

h) sóképzésre képes bázis-funkcióval rendelkezik;

i) molekulasúly kb. 1877, FAB tömegspektrometriával meghatározva;

teichomycin A2 4 faktor: fehér amorf por, amely melegítés hatására kb. 210°C-on, sötétedni kezd, és teljesen elbomlik 250°C-on, mimellett

a) korlátlanul oldható vízben pH 7,0 felett vagy pH 2 alatt, dimetilformamidban, dimetilszulfoxidban és propilénglikolban; gyengén oldható metilcelloszolvban és glicerinben; rosszul oldható metanolban és etanolban, csaknem oldhatatlan kloroformban, benzolban, n-hexánban, acetonitrilben, etiléterben, acetonban, etilacetátban és széntetrakloridban;

b) UV abszorpciós spektruma a következő abszorpciós maximumokat mutatja:

— 0,1N sósavban:

lambda,TM* 278 nm (EÍ^m = 52,5)

— pH 7,4 foszfát-pufferben:

lambda,TM* 278 nm (E\fm = 52,5)

— 0,1N nátriumhidroxidban: lambdama* 297 nm (EíJfe = 75,5)

c) IR abszorpciós spektruma nujolban a következő abszorpciós maximumokat mutatja-. 3700—3100, 2960—2840 (nujol), 1645, 1590, 1510, 1460 (nujol), 1375 (nujol), 1300, 1230, 1175, 1140, 1060, 1025, 970, 890, 840, 815, 720 (nujol);

d) elem-analízise, miután a mintát előzetesen kb. 140°C-on közömbös atmoszférában szárítottuk (súlyveszteség = 9,8%), a következő közelítő százalékos összetételt mutatja (átlag): szén 56,50%; hidrogén 5,10%; nitrogén 6,50%; klór 3,80%; oxigén (a különbség alapján) 28,10%;

e) retenciós idő (ír) 25,8 perc inverz fázisú

HPLC-vel elemezve, 5p-os Zorbax^ ODS oszlopot alkalmazva, az eluálást a B oldat 0—50% lineáris grádiense mellett — az A oldatban — 40 perc alatt végezve (A oldat: 9:1 25 mM NaH2P04:acetonitril, 0,1N NaOH-dal pH 6,0-ra pufferolva; B oldat: 3:7 25 mM NaH2P04:acetonitril, 0,1N NaOH-dal pH 6,0-ra pufferolva), 2 ml (perc áramlási sebességgel) belső standard: 3,5—dihidroxi-toluoi, t*. 8,84 perc);

f) sóképzésre képes sav-funkcióval rendelkezik;

g) sóképzésre képes bázis-funkcióval rendelkezik;

h) molekulasúlya kb. 1891, FAB tömegspektrometriával meghatározva;

teichomycin A2 5 faktor: fehér amorf por, amely melegítés hatására 210°C-on sötétedni kezd, és teljesen elbomlik 250°C-on, mimellett

a) korlátlanul oldható vízben pH 7,0 felett vagy pH 2 alatt, dimetilformamidban, di-17

metilszulfoxidban és propilénglikolban: gyengén oldható metilcelloszolvban és glicerinben;

rosszul oldható metanolban és etanolban; csaknem oldhatatlan kloroformban, benzolban, n-hexánban, acetonitrilben, etiléterben, acetonban, etilacetátban és széntetrakloridban;

b) UV abszorpciós spektruma a következő abszorpciós maximumokat mutatja:

— 0,1N sósavban:

lambda,TM* 278 nm (Eu^ = 49,6)

— pH 7,4 foszfát-pufferben: lambda,TM* 278 nm (Ej* = 51,8)

— 0,1N nátriumhidroxidban: lambdaTM* 297 nm (E'TM = 78,9)

c) IR abszorpciós spektruma nujolban a következő helyeken mutat megfigyelhető abszorpciós maximumokat: 3700—3100, 2960—2840 (nujol), 1645, 1590, 1510, 1460 (nujol), 1375 (nujol), 1300, 1230, 1175, 1145, 1060, 1025, 970, 890, 840, 815, 720 (nujol);

d) elem-analízise, miután a mintát előzetesen kb. 140°C-on közömbös atmoszférában szárítottuk (súlyveszteség=10,l%) a következő közelítő százalékos összetételt mutatja (átlag): szén 56,60%; hidrogén 5,05%; nitrogén 6,63%; klór 3,85%; oxigén (a különbség alapján) 27,87%;

e) retenciós ideje (t*) 26,4 perc inverz fázisú HPLC-vel elemezve, 5 p-os Zorbax ODS oszlop alkalmazásával, az eluálást a B oldat 0—50%-os lineáris grádiense mellett — az A oldatban — 40 perc alatt végezve (A oldat: 9:1 25 mM NaH2P04:acetonitril, 0,1 N NaOH-dal pH 6,0-ra pufferolva; B oldat: 3:7 25 mM NaH2PÖ4:acetonitril, 0,1N NaOH-dal pH 6,0-ra pufferolva, (2 ml/perc áramlási sebességgel) (belső standard: 3,5-dihidroxi-toluol, tü 8,84 perc) ;

f) sóképzésre képes sav-funkcióval rendelkezik;

g) sók'épzésre képes bázis-funkcióval rendelkezik;

h) molekulasúly kb. 1896, FAB tömegspektn> metriával meghatározva —

valamint e vegyületek gyógyászati szempontból elfogadható sói, előnyösen alkálifém, alkáliföldfém- és ammóniumsói előállítására, azzal jelle mezve,hogy a teichomycin A2-t inverz fázisú megosztásos vagy ioncserélő kromatográfiával az egyes faktorokra választjuk szét és kívánt esetben a kapott vegyületeket ismert módon gyógyászati szempontból elfogadható sókká alakítjuk át.

2) Az 1) igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az elválasztást, oszlop-kromatográfiával végezzük, szilanizált szilikagél oszlop alkalmazásával és a kifejlesztést grádiens elucióval végezzük, acetonitril híg vizes ámmóniumformiátos oldatával.

3) A 2) igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az oszlopot acetonitril 0,2%-18

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

10