193522. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán proinzulint tartalmazó gyógyszertészeti készítmények előállítására
193522 A fenti vizsgálatok során tett egyik legfontosabb megfigyelés az, hogy a humán proinzulinnak a hepatikus glükóz—kibocsátásra gyakorolt hatása rendkívül lassan szűnik meg. Mivel a humán proinzulin nagyobb mértékben hat a hepatikus glükóz - kibocsátásra, mint a perifériás glükóz—felhasználásra, belátható a humán proinzulinnak a cukorbaj kezelésében való gyógyászati jelentősége. Például, a nem inzulintól függő cukorbajban (diabetes mellitus) az anyagcsere egyik lényeges rendellenessége, amely fenntartja a hiperglikémiás (kórosan magas vércukorszintű) állapotot, a megnövekedett hepatikus glükóz-termelés. Nyilvánvaló, hogy ha a humán proinzulint olyan dózisokban adagoljuk, hogy a keringésben koncentrációja körülbelül 1,5—2.10-12 mól/ml, akkor a nem inzulintól függő cukorbajban szenvedő betegekben a hepatikus glükóz-kibocsátás körülbelül 50 %-kal csökken, ily módon a hepatikus glükóz - kibocsátás a normális értékre esik vissza. A humán proinzulin dezaktiválódásával kapcsolatos megfigyelések arra utalnak, hogy ha a humán proinzulin ilyen koncentrációjával járó biológiai hatások teljesen kialakultak, akkor e hatások több órán át meg is maradnak. E megközelítés egyik lényeges előnye abban áll, hogy a humán proinzulinnak ez a szintje vagy egyáltalán nem, vagy csak kismértékben befolyásolja a perifériás glükóz-felhasználást, még abban az esetben is, ha ugyanakkor a hepatikus glükóz - kibocsátás körülbelül 50 %-kal csökkenne. Mivel a humán proinzulinnak ez a koncentrációja még nem serkenti észrevehető mértékben a glükóz - felhasználást, kicsi az esély arra, hogy hipoglikémia (kórosan alacsony vércukorszint) lépjen fel. Ha humán proinzulint folyamatos szubkután iníiízió vagy egyszeri szubkután injekció formájában adagolunk, és így körülbelül 3 órán át 1.5 — 2.10-í2 mól/ml humán proinzulinszintet tartunk fenn, a hepatikus glükóz-kibocsátás körclbelül 50%-kal csökken, a plazma glükózszintje a gyógyászatilag elfogadható értékre esik vissza, és a hipoglikémia veszélye minimális. Továbbá, a humán proinzulinnak a hepatikus glükóz-kibocsátásra gyakorolt hatásának dezaktiválási kinetikája alapján várható, hogy a hepatikus glükóz-kibocsátás és a plazma glükózszintje több órán át elfogadható értéken marad. Egy ilyen kezelés 8 — 10 órán át megfelelő értéken tartja a vércukorszintet. így többféle lehetőség kínálkozik arra nézve, hogy a humán proinzulint a táplálékkal, más orális hatóanyagokkal vagy inzulinnal együtt adagolva alkalmazzuk 13 a nem inzulintól függő cukorbaj kezelésében. Például adagolhatjuk a humán proinzulint éjszakára, és így a vércukorszintet a hipoglikémia veszélye nélkül szabályozhatjuk, és így 5 az éhezés hatására kialakuló glűkózszint reggel is elfogadható lesz. Ezenkívül a nap folyamán az étrenddel, orális hatóanyagokkal vagy akár nappal adagolt inzulinnal szabályozhatjuk a vércukorszintet, majd éjszakára újra 10 humán proinzulint alkalmazhatunk. Hasonló módon kezelhetjük az I. típusú cukorbajos betegeket is, bár így adott esetben a fentivel egyidejűleg inzulin - kezelés is szükséges lehet. Az ilyen betegeknél a humán 15 proinzulinnak a hepatikus glükóz - kibocsátásra gyakorolt erős és tartós hatása miatt a humán inzulin és a humán proinzulin kombinációjával végzett kezelés útján csökkenthetjük a szükséges inzulin mennyiségét és ami még 20 fontosabb, egyenletesebbé tehetjük az inzulinnak a vércukorszintre gyakorolt szabályozó hatását. így a vércukorszint kisebb hullámzást mutat, és ezáltal könnyebben lehet a napi egy vagy két inzulin - injekcióval kezelt, 25 I. típusú cukorbajos betegek vércukorszintjét szabályozni. Továbbá, a folyamatos szubkután inzulin - infúzióval kezelt, I. típusú betegek esetében kisebb a humán proinzulin - egyené ték és inzulin összmennyisége, amelynek 30 a szövetek ki vannak téve. Ez a hiperinzulinémia szempontjából fontos, amely a folyamatos szubkután inzulin - infúzióval kezelt betegeknél felléphet. 35 SZABADALMI IGÉNYPONT Eljárás cukorbaj kezelésére alkalmas gyógyszerészeti készítmény előállítására, melynek során 40 a) proinzulint kódoló DNS - szekvenciával rendelkező, rekombináns DNS - technikával előállított E. coli törzset fermentációs körülmények között tenyésztünk, és a kapott proinzulint elkülönítjük, 1 ) a proinzulin peptid - szekvenciájának megfelelő, a peptidkémiában ismert védőcsoportokkal védett termékről elhasítjuk a védőcsoportokat, vagy c) a proinzulin lineáris peptid -szekvenciájá- 50 nak megfelelő, -SH csoportokat tartalmazó peptidben létrehozzuk a diszulfid—kötéseket, azzal jellemezve, hogy a kapott humán proinzulint legalább egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható vivőanyaggal, adott esetben 55 xétértékű cinkion - forrással és/vagy protauinnal keverve szokásos dózisformává, célszerűen oldat vagy injekció formává alakítunk. 14 Rajz nélkül Kiadja: Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Ns 673. Nyomdaipari vállalat, Uzsgorod
