193373. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklusos 9'-tiapeptid-ergotalkaloidok előállítására

193373

ammóniaoldat eleggyel kétszer, majd 1500—

1500 ml metanollal kétszer homogenizálunk ügy, hogy minden egyes homogenizálás öt percig tartson. Az egyesített szűrletet legfeljebb 40°C-os fürdőhőmérsékleten, vákuumban bepároljuk (190 g borvörös bepárlási maradék). A bepárlási maradékot 900 ml metanolban oldjuk, és az oldatot 600 g alumínium-oxidból (bázikus, II. aktivitásfokú) álló 10 cm magas rétegen át szűrjük, 2000 ml metanollal mossuk, és a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. (108 g). Ezt a bepárlási maradékot metanolban 3000 g Sephadex LH-20 tölteten szétválasztjuk, az eluátumból 200 ml-es frakciókat veszünk, és a frakciókat bepároljuk. Egyesítjük azokat a bepárlási maradékokat, amelyek a vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint az új tiapeptid-ergotalkaloidokat tartalmazzák (526 mg), és ezt metanolban 120 g Sephadex LH-20 tölte- 20 ten újból kromatografáljuk, mire a 9’-tia-ergokrisztin/-ergokrisztinin 156 mg súlyú tiszta

9

keverékét kapjuk. Ennek a két vegyületnek az elválasztását az ismert kromatográfiás eljárással végezzük el, Kieselgel 60 (Merck) tölteten, diklór-metán + 2% metanol futtató- 5 szerrel.

9’-Tia-ergokrisztin

Egyesítjük azokat a bepárolt frakciókat, amelyek a vékonyrétegkromatográfiás analízis szerint fy értéküknek (lásd 2. táblázatot) 10 megfelelően csak 9’-tia-ergokrisztint tartalmaznak, és ezt benzolból kikristályosítjuk, így 28 mg 9’-tia-ergokrisztint nyerünk. Olvadáspontja: 146°C, lassú bomlás közben zsugorodik; [a] p° = —176° (c = 0,5, kloroformban) 15 9’-Tia-ergokrisztinin

Egyesítjük azokat a frakciókat, amelyek a vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint egységesek, és a megfelelő R/ értékűek (lásd 2. táblázatot), és ezt etanol/etil-acetát elegyből kikristályosítjuk. Olvadáspontja: 209— 210°C, bomlik; [a] |° = +344° (c = 0,51, kloroformban)

10

2. Táblázat

a vékonyrétegkromatográfiás Rf értékeket mutatja az ergokrisztinnel/Ek/ és az ergokrisztininnel /Ek-in/ összehasonlítva

Réteg és futtatószer

Tia-Lk

Ek

Tia-Ek-in

Ek-:

Alox 1/

Etil-acetát/szék. butanol 9: 1

0,68

0,63

0,78

0,70

Toluol/izopropanol 9:1

0,63

0,62

0,69

0,66

Toluol/izopropanol 19:1

0,50

0,42

0,58

0,47

2 /

Kieselgel Toluol/izopropanol 85:15

0,37

0,28

C, 56

0,48

Diklór-metán/metanol

93:7

0,47

0,41

0,70

0,60

Alumínium-oxid - Fertigplatten Merck F 254 /Typ E/ Kieselgel - Fertigplatten Merck F 254

A kromatográfiás foltok előhívását az 1. példa szerint végezzük el.

3. példa

9’-Tia-a-ergokriptin és 9’-tia-a-ergokriptinin 55

Az 1. vagy 2. példával analóg módon állíthatjuk elő a cím szerinti vegyületeket úgy, hogy ergokriptin/ergokriptinint termelő törzset alkalmazunk.

9’-Tia-a-ergokríptin qq

Olvadáspontja: 203—205°C (bomlik);

[a] |° = +46° (c = 0,7, dimetil-formamidban)

9'-Tia-a-ergokriptínin

Olvadáspontja: 228—230°C (bomlik);

[a] = —f— 2810 (c = 0,8, dimetil-formamidban) 65

6

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás az (I) általános képletű vegyületek előállítására — a képletben R, metilcsoportot és R2 izobutil- vagy benzilcsoportot jelent, vagy

Rí etilcsoportot és R2 benzilcsoportot jelent, vagy

R, izopropilcsoportot és R2 izopropil-, szék. butil-, izobutil- vagy benzilcsoportot jelent —

azzal jellemezve, hogy a megfelelő 9’-metilénvegyületet termelő Claviceps purpurea törzs folyékony táptalajú tenyészetéhez L-tiazolidin-4-karbonsavat vagy ennek a savnak sóját