193302. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfolipid készítmények és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193302 5^ A találmány olyan új foszfolipid készítményekre vonatkozik, amelyek segítségével nagytisztaságú foszfatidil-szerin juttatható az emberi szervezetbe különböző adagolási módokkal, és idegrendszeri hatások érhetők el a véralvadás nemkívánatos megváltozása nélkül. A készítmények specifikus farmakplógiai profilja a dopaminerg kontroll modulációban áll. A készítmények ezért különösen jól használhatók az olyan patalógikus állapotok kezelésére, amelyeket a dopaminerg kontroll csökkenése jellemzi. Ilyen az öregkori pszihomotoros szindrómák hanyatlása, a vaszkuiáris cerebropátia, a krónikus és prevalens, öregkori pszihés komponens, az aggkorí dementia és a post-traumás állapotokhoz kötődő korai szindrómák, post-anoxiás cerebropátia és az extrapiramidális szindrómák. Ezeknek és egyéb patalógikus állapotoknak a kezelése során szükség van a készítmények adagolása következtében esetlegesen fellépő másodlagos hematikus koagulációs hatások kiküszöbölésére. Ismert, hogy idős korban gyakran fellépnek érrendszeri komplikációk, így ilyen betegek kezelése során számolni kell véralvadási hatásokkal. A találmány szerinti foszfolipid készítmények állati agyból extrahált Soszfatidil-szerint tartalmaznak. Ezek a speciális készítmények semmiféle nemkívánatos hatást nem gyakorolnak a véralvadásra. Részletesen vizsgáltuk a szarvasmarha agyszövetéből extrahált és tisztított foszfolipidek hatását a véralvadásra. Ezek a vizsgálatok kiterjedtek a tisztított foszfatidil-szerin, illetve a foszfatídíl-szerint valamilyen egyéb foszfolipiddel, így PE-vel, PC-vel vagy sfingomielinnel kombináltan tartalmazó biner rendszerek hatásának megfigyelésére. A kutatást azzal a céllal végeztük, hogy olyan gyógyászatilag hatásos foszfatidil-szerin készítményhez jussunk, amely nem fejt ki nemkívánatos mellékhatást a véralvadásra. Megvizsgáltuk a foszfolipidek in vivo adagolása során kapott központi idegrendszeri hatásokat és az esetleges, a véralvadásra gyakorolt mellékhatásokat. Módszerek A különböző készítmények in vivo hatását úgy vizsgáltuk, hogy a foszfolipid készítményekkel intravénásán 1,5-2 kg súlyú új-zélandi nyulakat kezeltünk, 0,5 mg/kg—50 mg/kg dózisban. A foszfolipideket Tris-EICl (50 mmól, pH 7,4) vivőanyaggal kevertünk el, majd ultrahanggal kezeltük, míg a szuszpenzió tiszta nem lett. (Az ultrahangos berendezésből min-6 den titán nyomot centriíugálással eltávolítottunk.) Kezelés után vért vettünk az állatoktól, és a mintát véralvadásra vizsgáltuk. A meghatározásokat hemokoagulációs készülékkel végeztük, amelyet a Biochemia (Boehringer, Mannheim) a Dígíclot Elvi 818 berendezéssel szállít, plazmán, amelyet 4200 percenkénti fordulatszám mellett 10 perces centrijugálással 1:9 arányú vér/3,8%-os nátrium-citrát oldatból kaptunk. A figyelembe vett paraméter a Quick szerinti protrombin idő volt. Az egyes vizsgált készítmények farmakológiái aktivitását úgy határoztuk meg, hogy mértük egerek agyi glükóz-tartalmát ugyanabban a dózistartományban, ezt a paramétert az agyi aktivitás indikátorának tekintve. Erre a célra 20-25 g súlyú svájci egereket használtunk, melyeket a kezelés után 30 perccel elpusztítottunk. A glükóz-szinteket Bruni és munkatársai (Nature, 260, 331-333 /1976/] módszerével mértük. A vizsgált készítmények a következők voltak: (1) szarvasmarha agykérgéből származó foszfatidil-szerin (PS) 90%-os titerrel; (2) foszfatidil-szerin és foszfatidil-etanol-amin (BC-PS), amely 75 tömeg% PS- ből 25 tömeg% PE-ből áll; (3) foszfatidil-szerin és íoszíatidil-etanol-amin (BC-PS,), amely 65 tőmeg% PS- ből és 35 tömeg% PE-ből áll; (4) foszfatidil-szerin és foszfatidil-etanol-amin (BC-PS2), amely 60 tömeg% PS- ből és 40 tömeg% PE-ből áll; (5) foszfatidil-szerin és foszfatidil-etanol-amin (BC-PS3), amely 50 tömeg/ PS- ből és 50 tömeg% PE-ből áll; (6) foszfatidil-szerin és foszfatidil-etanol-amin (BC-PS4), amely 40 tömeg% PS- ből és 60 tömeg% PE-ből áll; (7) foszfatidil-szerin és foszfatidil-etanol-amin (BOPS5), amely 25 tömeg% PS- ből és 75 tömeg% PE-ből áll; (8) foszfatidil-szerin és foszfatidil-etanol-amin (PC-PS6), amely 85 tömeg% PS- ből és 15 tömeg% PE-ből áll; (9) foszfatidil-szerin és foszfatidil-kolin (BC~ -PS7), amely 75 tömeg% PS-ből és 25 tömegé PC-ből áll; ( :0) foszfatidil-szerin és spingomieiín (BC-PS8), amely 75 tömeg% PS-ből és 25 tömegig SF-ből áll. A fenti vizsgálatok eredményeit az 1. és 2. táblázatokban foglaltuk össze. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 4
