193283. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-dezacetil-indol-dihidroindol alkaloidok bifunkciós észter-származékainak előállítására
9 193283 10 szobahőmérsékleten 5 órán át keverjük. (A reakciót 0 és ötTC közötti hőmérséklet-tartományban folytathatjuk le). Az illékony komponenseket vákuumban elpárologtatva eltávolítjuk, a maradékot metilén-kloridban felveszszük. A metilén-kloridos fázist 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd vízzel mossuk. A szerves fázist szárítjuk, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A cím szerinti termék fizikai állandói a következők: IR-spektrum vmax (cm-1): 1737, 1615, 1460, 1434; NMR-spektrum (CDC13) 6 (ppm): 8,05, 7,54, 7,14, 6,58, 6,11, 5,83, 5,46, 5,28, 3,80, 3,78, 3,69, 3,62, 2,71, 0,92, 0,79. A fenti vegyület szulfát-sóját úgy állítjuk elő, hogy a VLB-hemiszukcinátot vízmentes etanolban oldjuk, és a pH-t 5%-os etanolos kénsavval 3,95-re állítjuk, majd az illékony komponenseket elpárologtatjuk. A szulfát-só fizikai állandói a következők: UV-spektrum (HsO) Xmax (nm): 214, 268, 283, 312; lR-spektrum (KBr) vmax (cm'1): 3400 (széles), 1740; Titrálás (66% DMF): pKsm, = 4,80, 6,10, 7,80. A fentiek szerint eljárva állítjuk elő az alább ismertetett vegyületeket is. 1,95 g 4-dezacetil-vinkrisztinből 700 mg vinkrisztm-4-hemiszukcinátot állítunk elő, a vegyület fizikai állandói: IR-spektrum vmax (cm"1): 1740, 1684; NMR-spektrum (CDCI3) ô (ppm): 8,77, 8,15, 8,11, 7,72, 7,54, 7,18, 6,90, 6,83, 5,89, 5,39, 5,21, 4,69, 4,51, 3,86, 3,74,3,67. A fenti vegyület szulfát-sóját úgy állítjuk elő, hogy 400 rtig szabad bázis etanolos oldatához 2%-os etanolos kénsavat adunk. A sóképzés hozama 330 mg, R/ (szilikagél, metanol) =0,16 A vindezin-4-hemiszukcinátot 300 mg vlndezinből (4-dezacetil-VLB-3-karboxamid) állítjuk elő, 290 mg hozammal. A vegyület fizikai állandói: IR-spektrum vmax (cm"‘): 3450, 1733, 1693 cm"1 NMR-spektrum (CDC13): ô (ppm): 8,07, 7,52, 7,10, 6,54, 6,08, 5,92, 5,49, 5,27, 3,70, 3,59, 3,46, 2,83, 0,91, 0,78. A szulfát-sót a fentebb ismertetett módon állítjuk elő, 200 mg szabad bázisból 160 mg fehér amorf port nyerünk, vékonyréteg-kromatográfiás R/ értéke (szilikagél, metanol) = = 0,56. 1080 mg 4-dezacetil-4’-epidezoxi-VLB-ből 540 mg 4’-epidezoxi-VLB-4-hemiszukcinátot állítunk elő, R/ (szilikagél, 1:1 arányú etil-acetát-metanol elegy) = 0,08. A vinblasztinsav-4-hemiszukcinátot 4-dézacetil-vinblasztinsavból állítjuk elő, a vegyület fizikai állandói: Rf (szilikagél, metanol) =0,23 6 NMR-spektrum (CDC13) 6 (ppm): 8,05, 7,52, 7,11, 6,57, 6,06, 5,71, 5,26, 5,14, 3,75, 3,60, 2,83, 0,90, 0,76. 4-dezacetil-VLB-t a fenti módon maleinsavanhidriddel reagáltatva VLB-4-hemimaleátot kapunk. A vegyület fizikai állandói: IR-spektrum vmax (cm"1): 1730, 1590. NMR-srektrum (CHC13) à (ppm): 8,61, 8,04, 7,50, 7,12, 6,59, 6,48, 5,78, (J = = 12 Hz), 6,09, 5,7, 5,51, 5,3, 3,79, 2,70. A VLB-4-hemiglutarátot is a fenti eljárás szerint állítjuk elő, 3 g kiindulási anyagból 700 mg kívánt terméket kapunk. A vegyület fizikai állandói: IR-spektrum vmax (cm"1): 3450, 1736. NMR-spektrum (CHC13): ő (ppm): 8,07, 7,53, 7,13, 6,53, 6,13, 5,83, 5,45, 5,24, 3,80, 3,68, 3,63, 2,69, 0,91, 0,81. R/ (szilikagél, 1:1 arányú etilacetát-metanol elegy) = 0,08; A szulfát-só R, értéke (szilikagél, etil-acetát) =0,25 (hozam: 50%). A 4-dezacetil-indol-dihidroindol vinka-dimerek fenti acilezési reakcióiban esetlegesen a 3-hidroxil-csoportok is acileződnek. A 3-acil-csoportok Hargrove [3 392 173. számú amerikai egyesült államok beli szabadalmi leírás] módszere szerint nedves szilikagél lel végzett kezeléssel távolíthatók el. A célvegyületeket a melléktermékként keletkezett 3-acil-származékoktól vagy egyéb melléktermékektől kromatográfiásan is megtisztíthatjuk, a kromatografálást célszerűen szilikagélen végezzük, eluensként etil-acetát-meta^ol oldószerelegyet használunk. 2. példa Aktivált VtB-4-hemiszukcinát és konjugátum előállítása 90 mg VLB-4-hemiszukcinátot 2 ml metilén-kloridban oldunk. Hozzáadunk 15 pl N-metil-morfolint és a kapott oldatot 0°C-ra hűtjük. Ezután hozzáadunk kb. 20 pl izobutil-klór-formiátot, majd 20 mg N-hidroxi-szukcinimidet. A reakcióelegyet visszafolyató hűtő alatt 15 percen át forraljuk, majd az oldószert és az egyéb illékony komponenseket vákuumban elpárologtatjuk. A kapott gumiszerű maradékot további tisztítás nélkül használjuk fel a proteinekkel való kapcsolásra. A kapott vegyület az (1) általános képlettel jellemezhető, a képletben R jelentése-a fentebb ismertetett VLB-ből levezethető csoport. A vegyület szisztematikus neve 4-[3-(l-szukcinimid-oxi-karbonil) ] propionil-VLB, fizikai állandói: IR-spektrum (CHC13) vmax (cm-1): 1741, 1718. Második kísérlet során izoláltuk a VLB-4- -hemiszukcinát és az izobutil-karbonsav vegyes anhidridjét, A vegyület.szerkezete a (2) általános képlet szerinti, a képletben R jelentése VLB-ből származó csoport, amely C-4 helyzetben kapcsolódik a vegyes anhidrid rész5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
