193269. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-oxo-delta-4,9 és 3-oxo-delta-9,11-epoxi-19-norszteroidok előállítására

Két görbét rajzolunk meg a következők szerint. A kötött tritiált hormon százalékát ($■) a hideg referencia-hormon koncentrációja logaritmusának, illetve a hideg találmány szerinti vegyület koncentrációja logaritmusának függvényében ábrázoljuk. Az I50=(^-max+-Ç-min))/2 egyenlet egyenes vonalát meghatározzuk.-|-max=a kötött tritiált hormon %-a a tritiált hormonnak (T) koncentráció melletti inkubálása során

£-min=a kötött tritiált hormon %-a (T) koncentráció mellett nagy feleslegben alkalmazott (2500.10'® mól) hideg hormon jelenlétében történő inkubálás során

Az I50 egyenes vonal és a görbék metszéspontjából meghatározható a hideg referencia-5 -hormon (CH) és a hideg találmány szerinti vegyület (CX) koncentrációja, amely 50%-ban gátolja a receptor tritiált hormonjának a kötését.

10 A vizsgált vegyületek kötésének relatív affinitását (RAB) a következő egyenlet szerint határozzuk meg:

RAB=l°0|g-15 A kapott eredmények a következők:

VIII. táblázat

Inkubációs Minerál-kortikoid Androgén Progesztogén Glukokor- ösztrogén idő 0°C-on tikoid

Előállítási --------------------------------------------------------------------páldaszám \

4. 1 6

24 ó

1/2 ó

24 ó

2 ó

24 ó

4 6

24 d

2 ó (25°C)

X

66

56

Y

36

55

z

71

136

58

0,9

0,01

1.3

3

274

536

213

217

<0,01

59

1

0.1

11,5

1

160

80

274

249

<0,01

60

3,4

0,4

9,6

0,3

63

126

189

125

<0,01

71

0,4

0,04

6,3

12,4

236

910

210

227

<0,01

74

3, 1

0,2

7.7

2,0

33

129

210

106

<0,01

76

<0,01

<0,1

0,6

108

513

164

204

<0,01

80

',9

0,7

1.1

3,0

66

230

42

27

<0,01

82

0,5

0,1

0,4

1,6

38

176

65

43

<0,01

83

0,02

0,02

0,6

0,4

11

9

186

128

<0,01

89

0,3

0,1

18

6,4

8,2

3,6

171

117

<0,01

92

1,4

0,1

13

5,6

41

67

136

140

<0,01

93

0,5

0,07

8,3

2,4

24

62

40

64

<0,01

95

0, 35

0.04

0,13

0,05

19

16

160

100

3,5 0,80

2

46

216

10

274

213

11

160

274

12

63

189

14

136

279

19

105

167

23

236

210

26

33

210

28

108

164

34

105

167

A vizsgált vegyületek, különösen a 71. példa szerinti vegyület jelentős affinitást mutat a glükokortikoid és a progesztogén receptorokkal szemben, kisebb az affinitása az androgén receptorokkal szemben.

Az eredmények alapján látható, hogy a találmány szerinti vegyületek agonisztikus és antagonisztikus hatásúak is a glükokortikoidokkal, progesztogénekkel és androgénekkel szemben.

Antiglükokortikoid aktivitás

A vizsgálatban egerek thymociiájának meghatározását Dausse és Coll (Moleculai

22

Pharmacolgy 13948-955(1977), „The relationship between glucocoticoid structure and ef- 55 lects upon Thymocytes") szerint határozzuk meg.

Mellékveséjüktől megfosztott patkányok thymocitáit 37°C hőmérsékleten 3 órán át inku- Dáljuk olyan tápközegben, amely 5.10’8 mól 60 dexamethasont tartalmaz különböző koncentrációjú találmány szerinti vegyületek jelenlétében, illetve jelenléte nélkül. Ezután tritiált uridint adagolunk és az inkubálást 1 óráig folytatjuk. Az inkubált anyagot lehűtjük, 5%-os tri- 65 klór-ecetsav-oldattal kezeljük, Whatman GF/ /A papíron szűrjük, háromszor 5%-os triklór-