193234. lajstromszámú szabadalom • Eljárás optikailag aktív 3-(3,4-dihidroxi-fenil)-szerin és származékai előállítására
193234 nyeképpen azt találtuk, hogy egyetlen ismert, a kereskedelemben jelenleg beszerezhető aciláz enzim sem képes az R3CO- képletű N-acil-védőcsoportot szelektíven az N-acil-L-3-(3,4- dihidroxi-fenil)-szerinről aszimmetriás hidrolízis révén eltávolítani. Ennek megfelelően kiterjedt vizsgálatokat folytattunk a természetben előforduló anyagok és vegyületek széles körében, és felfedeztük, hogy néhány, a Streptomyces nemzetségbe tartozó mikroorganizmus és egyes, a Streptoverticillium nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok képesek arra, hogy az N-acil-védőcsoportot szelektíven az N-acil-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-szerin L-enantiomerjéről hidrolizálják le, miáltal az (I) általános képletű DL-molekulavegyületben jelenlevő L-alak dezacileződik csak. Tehát ezek a Streptomyces, illetve Streptoverticillium nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok olyan aciláz enzimekkel rendelkeznek, amelyek képesek arra, hogy a treo- vagy eritro-N-acil-3- (3,4-dihidroxi-fenil) -szerin L-enantiomerjét hidrolizálják, ezáltal szelektíven csak az L-alakról távolítsák el az N-acil-védőcsoportot. Ennélfogva azt találtuk, hogy a találmány célkitűzésének megvalósítása céljából a következőképpen járhatunk el: az ismert módon előállított DL-treo- vagy DL-eritro-DOPS, illetve ezen vegyületek O-védett származéka, amelyben a katekolos, 3- és 4-helyzetű hidroxilcsoportok védettek, N-acilezését valamilyen aktív alkanoil-, illetve aroilcsoportot tartalmazó vegyület felhasználásával, ismert módon hajtjuk végre, és az így kapott N-acil-DL-3- (3,4-dihidroxi-fenil) - szerint vagy annak O-védett származékát, amelyben a katekolos jellegű, 3- és 4-helyzetű hidroxil.’soportok védve vannak, azután enzimes kezelésnek vetjük alá, ahol az említett szerinszármazékokkal reakcióba lépő enzimet valamely, a Streptomyces vagy a Streptoverticillium nemzetségbe tartozó mikroorganizmus lein észoldata szolgáltatja, amely a megfelelő acilázt tartalmazza. De enzimforrásként szolgálhat valamely, az említett tenyészoldat kezelése által nyert anyag is, amely az aciláz enzimet tartalmazza, így például az említett tenyészoldatból elkülönített mikroorganizmus-sejtek, vagy ez utóbbiak kezelése útján nyert enzimtartalmú anyag, vagy maga az említett mikroorganizmus által termelt és abból kivont aciláz enzim is. Az enzimes kezelés eredményeképpen, az N-acilezett szerinszármazék sztereoszelektív hidrolízise és az N-acil-védőcsoport eltávolítása következtében az L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-szerint vagy annak olyan védett származékát kapjuk, amelynek molekulájában a katekolos, 3- és 4- helyzetü hidroxilcsoportok védettek, míg az N-acil-D-3- (3,4-dihidroxi-fenil) -szerin vagy annak O-védett származéka, amelyben a katekolos, 3- és 4-helyzetű hidroxilcsoportok védettek, változatlanul visszamarad, anélkül, hogy az enzimatikus reakcióban részt vett volna. Az eljárás következő lépésében az L- 4 3-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-szerint a reagálat lanul visszamaradó N-acil-D-3- (3,4-dihidroxi-fenil) -szerin-származéktól könnyűszerrel elválaszthatjuk e vegyületek különböző oldékonyságának felhasználása révén, illetve bármilyen egyéb, eltérő fizikokémiai tulajdonságuk alapján. Ezen felismerések felhasználásával a jelen találmány célkitűzése megvalósítható. Találmányunk így - egyfelől - eljárást biztosít egy optikailag aktív, (II) általános képletű L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-szerin és -származékok előállítására, ahol a képletben R1 és R2 jelentése hidrogénatom vagy fenil-(1-4 szénatomos) alkil-, naftil-( 1 -4 szénatomos) alkilcsoport, vagy R‘ és R2 együtt (1-4 szénatomos) alkiléncsoport, továbbá optikailag aktív (III) általános képletű D-3- (3,4-dihidroxi-fenil) -szerin-származékok előállítására, ahol a képletben R1 és R2 jelentése a fenti és R3 jelentése adott esetben halogénatommal vagy hidroxilcsoporttal helyettesített (1-4 szénatomos) - alkilcsoport, vagy fenil- vagy naftilcsoport. A találmány szerinti eljárást úgy végezzük, hogy egy (I) általános képletű N-acil-DL-3- (3,4-dihidroxi-fenil) -szerin, amelynek képletében R1, R2 és R3 jelentése a fentiekben megadott, L-izomerjének aminocsoportjáról az N-acilcsoportot egy Actinomyces aureoverticillatus, Actinomyces bicotor, Streptomyces blastmyceticus, Streptomyces chartreusis, Streptomyces flavopersicus, Actinomyces flavotricini Streptoverticillium griseocarneum, Streptomyces hachijoensis, Streptomyces halstedii, Streptoverticillium hiroshimense, Streptomyces tendae, Streptomyces toyocaensis fajba tartozó mikroorganizmus által termelt aciláz-enzimmel lehidrolizáljuk. Maga a mikroorganizmus helyett a mikroorganizmusnak egy olyan kivonata is alkalmazható, amely azt az aciláz enzimet tartalmazza, amely az (I) általános képletű DL-szerin-származékban jelenlevő L-enantiomer aminocsoportjáról az N-acil-védőcsoportot szelektíven eltávolítani képes, és ezáltal egÿ (II) általános képletű L-3- (3,4-dihidroxi-fenil) -szerin-származékot képes termelni. A (II) általános képletű L-szerin-származéknak a (III) általános képletű, nem dezacileződött N-acil-D-3- (3,4-dihidroxi-fenil)-szerintől való elkülönítésének lépése zárja a reakciósort. Kívánt esetben a találmány szerinti eljárás egy további reakciólépést is magábafoglalhat: a megmaradt R1 és R2 hidroxil-védőcsoportok eltávolítását a kapott (II) általános képletű, O-védett, L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-szerin-származékról. Ez önmagában ismert eljárás segítségével történik és eredményeként az L-3-(3,4-dihidroxi-fenil)-szerint 4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
