193188. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-piperazinil-kinazolin-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193188 lására] és 1 mikromól nem jelzett spiperon a nem specifikus kötés meghatározása céljából. A 3H-spiperon specifikus kötődése gátlásának meghatározása céljából a vizsgálandó vegyület 5—9 különböző koncentrációban (1 nanomól és 10 mikromól közötti koncentrációtartományban) adjuk az elegyhez, s minden mérést kétszer végzünk. Szobahőmérsékleten 40 percig végzett inkubálás után a mérőelegyet Whatman GF/B szűrőn gyorsan átszűrjük, a szűrőt kétszer, egyenként 5 ml jéghideg TRIS-pufferoIdattal átmossuk, és utána szcintillációs számlálást végzünk. Az eredményeket az alábbi táblázatban adjuk meg. 5 Példa Receptor-kötődés IC50 nM 3H-spi peron 1 344 3a 253 3b 52 3c 265 3d 150 3e 342 3f >1000 3h 690 3i 618 3 j 532 3k 460 31 565 3n 1822 A találmány szerinti vegyületek továbbá — patkányoknak 2—20 mg/kg mennyiségben orálisan adagolva — erősítik az alvás 11. fázisát, és csökkentik a paradox alvási fázist az alvás-ébrenlét ciklus során. E vizsgálatot Kleinlogel és munkatársai módszerének elvei szerint végeztük [European J. Pharmacol. 33, 159 (1975)]. Ennek következtében az alvás II. fázisa atípusos minőségi jellemző két mutat. Mindezek alapján indokolt a találmány szerinti vegyületek neuroleptikus szerekként való alkalmazása. E célra a javasolt napi dózis a találmány szerinti vegvületeknek körülbelül 25 mg tói körülbelül 600 mg-ig terjedő mennyisége, amelyet célszerűen elosztva naponta 2—4 alkalommal körülbelül 6 mgtól körülbelül 300 mg-ig terjedő mennyiségű hatóanyagot tartalmazó adagolási egység formájában vagy késleltetett felszabadulást biztosító (retard) alakban adagolunk. A találmány szerinti vegyületek továbbá a magas vérnyomást csökkentő szerekként is alkalmazhatók, amint ez standard vizsgálatok segítségével, például a 3H-prazosin ai-receptorhoz való kötődésének mérésével igazolható {Greengrass és munkatársai módosított módszere [Eur. J. Pharm. 55, 323 4 (1979)]}. E vizsgálatot a következőképpen végezzük. Friss borjúagyvelő kéregszövetét 20-szoros térfogatú TRIS hidroklorid pufferban (50 mmólos, pH 7,7) Polytron PT 20 eszközben homogenizáljuk, majd 30 000 g sebességgel 25 percen át centrifugáljuk. A centrifugálási maradékot 13-szoros térfogatú, az előbbivel azonos pufferoldatban ismét szuszpendáljuk, 15 percig 37 C°-on inkubáljuk, majd 11 percig 50 000 g sebességgel ismét centrifugáljuk. Az így kapott centrifugálási maradékot —20 C°-on megfagyasztjuk, és a kötődési kísérletben való felhasználás előtt 60-szoros térfogatú fenti pufferoldatban ismét szuszpendáljuk. A mérőelegy összetétele (össztér fogata 2 ml) a következő: 50 mmól 7,7 pH értékű TRIS hidroklorid, 30 mg eredeti szövet súlynak megfelelő membrán és 0.3 nmól 3H-prazosin. A nem specifikus kötődés mérésére szolgáló keverék ezen kívül még 10 gmól koncentrációban fentolamint tartalmaz, A hatóanyagok specifikus 3H-prazosin-kötődést gátló képességének (a teljes és a nem specifikus kötődés különbsége) mérése céljából a vizsgálandó anyagot 1 nmól és 10 pmól közötti tartományban 5—9 koncentrációban adagoljuk, s itt minden mérést ismétlőnk. Szobahőmérsékleten végzett 40 perces inkubálás után a keveréket Whatman GF/B szűrőn gyorsan átszűrjük, és a szűrőt kétszer 5 ml jéghideg TRIS pufferoldattal mossuk. A szűrök radioaktivitását szcintillációs számlálással állapítjuk meg. Ezek alapján indokolt a találmány szerinti vegyületek vérnyomáscsökkentő szerekként való alkalmazása. E célra a javasolt napi ■ adag a találmány szerinti vegyületek körülbelül 5 mg-tól körülbelül 100 mg-ig terjedő mennyisége, amelyet célszerűen napi 2—4 alkalommal körülbelül 1 mg-tól körülbelül 50 mg-ig terjedő hatóanyagot tartalmazó adagolási egység formájában vagy késlelteteti felszabadulást biztosító (retard) formába t adagolunk. A találmány szerinti vegyületek gyógyászati szempontból elfogadható savaddíciós sóik formájában is adagolhatok. E savaddíciós sók a bázisokkal azonos nagyságrendű hatással rendelkeznek. A találmány olyan gyógyszerkészítmények előállítására is vonatkozik, amelyek egy találmány szerinti vegyületeí vagy annak valamilyen gyógyászati szempontból elfogadható savaddíciós sóját a gyógyszerkészítésben, szokásos vivő- vagy hígítószerrel együttesen tartalmazzák. E készítmények például oldatok vagy tabletták lehetnek. A találmány szerinti vegyületek előnyös indikációs területe a neuroleptikus hatás. Ennek az indikációs területnek a szempontjából az 1. és 3e. példa szerinti vegyületek előnyösek. Az (I) képletü vegyületek és azok savaddíciós sói egyik előnyös csoportjában 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
