193151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gangliozid-származékok és ilyen hatóanyagokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
193151 metanol és 0,3% kalcium-klorid 55:45:10 térfogatarányú elegye. A belső észterek elegyének Rt értéke 0,7—0,85. A végtermékek Rt értéke meghaladja a kiindulási vegyületek elegyének Rf értékét. A kromatográfiás vizsgálattal ilyen módon kimutatható a kiindulási anyag távolléte. Ha a terméket 0,1 n nátrium-karbonátoldattal kezeljük 60°C-on 1 órán át, az észterkötések elhasadnak, és visszakaphatjuk a kiindulási gangliozid vegyületek eredeti keverékét. 2. példa 9 g gangliozid keveréket (nátriumsó) 80 ml desztillált vízben oldunk, és az oldatot 20 g Dowex 50 w x 8 gyantával töltött oszlopon vezetjük át (a gyanta trietil-ammónium alakban van, s 100—200 mesh méretű részecskékből áll). A terméket nagy vákuumban vízmentesítjük, és 200 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldjuk, amely 8 ml trietil-amint tartalmaz. A kapott oldatot lassan, állandó keverés közben hozzáadjuk 600 ml vízmentes tetrahidrofuránhoz, amely 40 mM 2-klór-l-metilpiridiniumsót tartalmaz, ahol az anion például jodid, toluol-4-szulfonát, trifluor-metánszulfonát stb. lehet. Az adagolás mintegy 4 órán át tart, és közben 45 °C-os állandó hőmérsékletet tartunk fenn. A reagáltatást 18 órán át végezzük 45 °C- on. A reagens feleslegét szűrjük, a szűrletet nitrogénáramban bepároljuk, a maradékot ismét feloldjuk kloroform és metanol 1:1 arányú, 90 ml mennyiségű elegyében, és a terméket 450 ml aceton hozzáadásával kicsapjuk, végül nagy vákuumban szárítjuk. 7,9 g (89,7%) belső észter-származékot kapunk. Vékonyrétegkromatográfia: a vizsgálatot szilikagél réteget tartalmazó lemezeken végezzük, az oldószerelegy a futtatásnál kloroform, metanol és 0,3°/o-os kalcium-klorid 55:45:10 arányú elegye. A belső észterek Rf értéke 0,7—0,85 között van. A végtermékek Rí értéke meghaladja a kiindulási vegyületek elegyének Rf értékét. A kromatográfiás vizsgálat eredményei így a kiindulási anyag távollétét jelzik. Ha a terméket 0,1 n nátriumkarbonát-oldattal kezeljük 60 °C-on 1 órán át, az észterkötések elhasadnak, és visszakaphatjuk az eredeti gangliozid vegyületeket. A gangliozid -keverék belső észtereinek infravörös spektruma kálium-bromid pasztilla alkalmazásakor 1750 cm-1 értéknél mutatja a jellemző észter-abszorpciót. 3. példa 8 g GMrgangliozidot (nátriumsó) 80 ml desztillált vízben oldunk, és az oldatot átvezetjük 10 g Dowex 50 w x 8 gyantával töltött oszlopon. (A gyanta trietil-ammónium alakban van, és 100—200 mesh méretű szemcsékből áll). 7 A kapott terméket nagy vákuumban víztelenítjük, majd 4 ml trietil-amint tartalmazó 200 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldjuk. Az oldatot lassan, folyamatos keverés közben hozzáadjuk 600 ml vízmentes tetrahidrofuránhoz, amely 20 mM 2-klór-1 -metil-piridiniumsót tartalmaz, ahol az anion például jodid, toluol-4-szulfonát, trifluor-metán-szulfonát stb. lehet. Az adagolás mintegy 4 órán át tart, és közben a hőmérsékletet állandó értéken tartjuk 45 °C-on. A reagáltatást 18 órán át végezzük 45 °C- on, majd a reagens feleslegét szűrjük, a szürletet nitrogénáramban bepároljuk, a maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú, 80 ml mennyiségű elegyében oldjuk, és a terméket 400 ml acetonnal kicsapjuk. Végül a terméket nagy vákuumban szárítjuk. 7.0 g (88,4%) belső észtert kapunk. Vékonyrétegkromatográfia: a vizsgálathoz szilikagél réteget tartalmazó lemezeket használunk, a futtató elegy kloroform, metanol és 0,3%-os kalcium-klorid 55:45:10 arányú elegye. A végtermék Rf értéke (0,70) nagyobb a kiindulási vegyület Rf értékénél (0,65). A kromatográfiás vizsgálat így azt mutatja, hogy kiindulási anyag nincs jelen. Ha a terméket 0,1 n nátrium-karbonát-oldattal kezeljük 1 órán át 60°C-on, az észterkötés elhasad, és megkaphatjuk az eredeti gangliozidot. A GMj belső észterének infravörös spektruma kálium-bromid pasztilla alkalmazásakor jellegzetes észter abszorpciót mutat 1750 cm"1 értéknél. 4. példa 9 g gangliozid keveréket (nátriumsó) 80 ml desztillált vízben oldunk, és az oldatot átvezetjük 20 g Dowex 50 w x 8 gyantával töltött oszlopon, ahol a gyanta piridinium alakban van, és 100—200 mesh méretű részecskékből áll. A nagy vákuumban víztelenített terméket 800 ml vízmentes tetrahidrofurán és 4,2 g (60 mM) etoxi-acetilén elegyében oldjuk. Az oldatot 3 órán át forraljuk visszafolyató hűtő alatt. A visszafolyató hűtőt — 10°C-ra hütjük, és előzetesen víztelenítő szeleppel látjuk el. Az oldószereket és az etoxi-acetilén feleslegét eltávolítjuk, a maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú és 80 ml mennyiségű elegyében oldjuk, és a terméket 400 ml aceton hozzáadásával kicsapjuk. 8.1 g (92,0%) terméket kapunk. Vékonyrétegkromatográfia: a vizsgálatot szí ikagél réteget tartalmazó lemezeken végezzük, a futtató oldószerelegy kloroform, metanol és 0,3%-os kalcium-klorid 55:45:10 arányú elegye. A belső észterek keverékének Rf értéke 0,7—0,85 között van. A végtermékek Rf értéke nagyobb a kiindulási vegyületek Rf értékénél. A kromatográfiás vizsgálat eredményei tehát azt mutatják, hogy kiindulás: anyag nincs jelen. Ha a terméket 0,1 n 8 5 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
