193060. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-39079 antibiotikum S-1faktor előállítására
193060 A találmány tárgya eljárás az (I) általános képlett! (R és R' jelentése egyaránt vagy -OH vagy =0 csoport), a rifamicin csoportba tartozó új antibiotikum, az A39079 S-l faktor előállítására. A találmány tárgykörébe tartozik továbbá a fenti antibiotikumnak kloramfenikoltől, cikloheximidtől (aktidion) aktifenoltól és szeptacidintől történő elválasztása.. Az S-l faktort kloramfenikolt, cikloheximidet, aktifenolt vagy szeptacidint a lesavanyított fermentlé szOrletből extraháljuk ki poláris szerves oldószerrel, és extrakciós kromatográfiás és/vagy kristályosítási módszerekkel tisztíthatjuk tovább. Az S-1 faktor tartalmazza mind a (II ) képlett? vegyületet (a redukált forma,ahol mind R, mind R’ csoportok jelentése hidroxi-csoport), mind a (111) képletö vegyületet (az oxidált forma, ahol mind R, mind R’ jelentése=0 csoport).Jóllehet mind a (II),mind a (111) vegyület jelen van az S-l faktorban, a (111) képletö vegyület (az oxidált forma) túlsúlyban van a legtöbb készítményben. Folytonos az igény új, javított tulajdonságú antibiotikumok iránt. Jobb antibiotikumokra van szükség emberi betegségek kezeléséhez, valamint az állatgyógyászatban. Megnövelt hatékonyság, szélesebb spektrumú bakteriális gátlás, megnövelt _in_ vivo hatásosság, valamint javított farmakológiai tulajdonságok (például jobb felszívódás szájon át, magasabb vér- vagy szövet-koncentráció, hosszabb in vivo lebomlási idő, a kiválasztás előnyösebb módja és sebessége, a metabolizmus előnyösebb útja és sebessége), ez néhány példa a jobb antibiotikumok fejlesztésénél követett szempontokra. Az új antibiotikumok kutatása során az ismert aktibiotikumok szerkezeti módosítását is megkísérlik, ha csak lehetséges. Ez a megközelítés azonban a kívánt aktivitást megtartó származékokra korlátozódik. Számos antibiotikum, ideértve a rifamicin típusúakat is, olyan bonyolult szerkezetű, hogy még kis módosítást is nehéz kémiai módszerekkel végrehajtani.A fermentációs eljárásokkal előállítható új antibiotikumok feltalálásának továbbra is nagy fontossága van. Az (I) általános képletü S-l faktor az antibiotikumok rifamitin csoportjában újonnan feltalált tag. A csoport tagjai közé tartozik a rifamicin S (lásd például a 4 353 826 szá-1 mú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírást). A találmány tárgya tehát eljárás az A39079 antibiotikum S-l faktorának előállíc tására,oly módon,hogy a Streptomyces spheroides NRRL 15600 törzset, vagy annaITS-1 faktort termelő variánsát vagy mutánsát emészthető szénforrást, nitrogén-forrást és szervetlen sókat tartalmazó közegben, süllyesztettig levegőztetett fermentációs körülmények között tenyésztjük. Az S-l faktor mellett az NRRL 15600 törzs termel még kloramfenikolt, cikloheximidet, aktifenolt és szeptacidint.Tehát a találmány tárgya továbbá eljárás az S-l faktor kloramfenikoltól, ciklohexamidtől, aktifenoltól vagy szeptacidintől történő elválasztására, oly módon, hogy a Streptomyces spheroides' NRRL 15600 törzset, vagy annak variánsát vagy 2g mutánsát emészthető szénforrást,nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó közegben, süllyesztett-levegőztetett fermentációs körülmények között tenyésztjük, majd a felsorolt antibiotikumokat a fermentléből kinyer-25 Íük-A találmány foglalkozik továbbá ismert módszerekkel előállított gyógyászati készítményekkel, melyek aktív adalékanyagként az A39079 antibiotikum S-l faktorát tartalmazza, egy vagy több gyógyászatilag elfogadható 3° hordozóval vagy hígítóanyaggal. Az A39079 antibiotikum S-l faktora amorf sárga por, oldódik metanolban, acetonitrilben és acetonban, de gyengén oldódik vízben. Az S-l faktor oxidált formájának (111) az 35 összegképlete C36H43NOl2, molekulasúlya körülbelül 681. Az S-l faktor fizikai jellemzői a következők: 1) Infravörös spektroszkópia: jellemző csúcsok 3420, 3163, 1672, 1642, 1621, 1599 40 1412, 1182, 1136 és 1072 cm’1 -nél. 2) Ultraibolya spektrofotometria: abszorpciós maximum 305 nm-nél (váll) (e= 16,000), 272 nm-nél (e = 30,000) és 208 nm-nél (e=24,000) semleges és savas metanol-45 ban, valamint 312 nm-nél (e=30,000) és 250 nm-nél (e=37,000) lúgos metanolban. 3) Titrálás: 66%-os vizes dimetilformamidban: pKa 8.0. 50 4) Tömegspektrometria: A gyors-atom bombázási módban a következő eredményeket kapjuk. 2 M/Z Forma HRMS* M/Z HUMS* képlet 706 (M+Na)+ 684 (M+H) + redukált redukált 706.286 C* N0,z Na 683 (M)+ redukált 682 (M+H)+ oxidált 681 (M)+ oxidált 287 (a rifamicin kromofór fragmentjét mutatja). *HRMS: Nagy felbontóképességű tömeg-spektrum. 2
