193039. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-21978C ciklusos peptid N-szubsztituált származékainak előállítására

31

193039

32

31. példa

Nrrp-lauraldehid Schiff-bázis és NnP,Ní?fn-dilauraldehid Schiff-bázis, valamint a megfelelő redukált Schiff-bázisok előállítása (22. és 23. vegyület) 5

A-21978C magot (1 g) vízben (50 ml) oldunk, és dodecil-aldehid (500 pl) metanollal (200 ml) készült oldatát adjuk hozzá. A reakzióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 50 percig redukáljuk natrium- 10 -ciano-bór-hidridet (291 mg) hozzáadva. A reakciókeveréket vákuum alatt Whatman 1. szűrőpapírt használva átszűrjük az oldhatatlan részek eltávolítása céljából. A felülúszót bepárolva vizes oldatot kapunk, melyet liofi- 15 lizálunk. A kapott 1,256 g terméket analitikai HPLC-vel elemezzük és részletekben fordított fázisú HPLC-vel tisztítjuk. Minden részletet (350 mg) 50%-os vizes metanolban (6 ml) oldunk, az anyag oldódását szonikálás- 20 sál és melegítéssel segítjük elő. Ezután az oldatot 1,5 x 80 cm-es LP-1 /C,8 oszlopon bocsátjuk át, 0,2% piridint és 0,2% ecetsavat tartalmazó CH3OH/CH3CN/H20 (25:40:35) eleggyel eluálva, mintegy 7,5 ml/min áram- 25 lási sebességet alkalmazva. Az elúciót 280 műnél UV detektorral követjük. A kívánt termékeket tartalmazó frakciókat egyesítve összesen 104 mg Nrrp-/n-dodecil/-A-21978C magot (22. vegyület) és 19,2 mg Nrrp-/n-dodecil/- 30 -Norn-/n-dodecil/-A-21978C magot (23. vegyület) kapunk.

VII. tábláz

Az előállított vegyületek aminosav-analízise az alábbi:

22. vegyület

23. vegyület

Asp

3,93x

3,99*

Thr

0,91

0,90

Gly

2,03

2,12

Alá

1,00

1,00

Ser

0,88

0,89

3MeGlu

0,90

0,87

Kyr

1,26

0,97

Orn

0,97

0,31

*A vizsgálati körülmények között az aszparagin aszparaginsawá (Asp) alakul.

32. példa

Az 1 általános képletű vegyületek antibakteriálís hatékonyságát in vitro mutatjuk ki. Egyes jellemző 1 általános képletű vegyületek antibakteriális vizsgálatának eredményeit—melyekhez agarlemezen végzett standard diffúziós eljárással jutottunk — a VII. táblázatban közöljük. A VII. táblázatban az aktivitást a megfigyelt gátlási zónák méretével (átmérő mm-ben) fejezzük ki, melyekben a vizsgálandó vegyület a mikroorganizmus növekedését gátolja.

vegyül e_tek__anc£bakte;r’iáXi;S_aktivitásaL omezen_d if f uz ios __£^r;óbáva.l meghatároz va _

Vegyület Gátlási zóna mérete (ram)a'

száma

R

R1

R1

Staphylococcus

aureus ATCC 6738P

Bacillus

subtilis ATCC 6633

Micrococcus B. subtilis luteus

ATCC 9341 ATCC 6633®

1.

cui(cuz)sco-H

H

17

15

21

16

2.

CH3 (CH,)S COH

H

23

18

23

20

3.

CH, (CH2)7 COH

H

20

16

18

27

4.

CH, (CH,), COH

H

24

20

22

29

5.

CH, (CH, )g COH

H

19

19

21

21

6.

CH, (CH, )ro COH

H

25

20

19

32

7.

CH, ( CH, ),, COH

H

2:

17

19

29

8.

CH,(CH,)„ COH

H

22

21

21

28

9.

CH,(CH,)„ COH

H

20

19

19

24

10.

CH,(CH,)I4 COB

H

19

17

17

23

1 1 .

CH,=CH-(CH,), COH

H

2 I

17

20

25

12.

CH, (CH,), CH=CH(CH,)7 COH

H

22

19

20

30

13.

CHj CHj, CH^CHCHj CH-CH«-CH,CH=CH(CH,),COH

B

n

13

20

14

14.

CH,CH, CH(CH„) (CH, )„ COH

CH^CO-2 I

18

20

25

15.

CH, CH, CH (CH,) (CH,)„ COH

HOCO(CH,), CO- -2!

18,

19

25

16.

CH, (CH,)e CO -H

CH, (CH, ). CO-1 I

nyc

10

17

17.

CH, (CH,), COH

CH, (CH, ), CO-17

13

14

20

18.

CH, (CH, )f, C0-H

CH,(CH,)fl CO- 12

ny-13

19.

CH, CH. CH ( CH ,) ( CH,)., COB

t-BOC

1 ♦

1 1

10

22

'0.

Cbz

H

CH,(CH^),0 CO- 1 3

10

17

23

aA

vegyüleceket vízben szuszpendáljuk 1 mg/ml

Konc entrációban;

7 mm-es korongot bemartunk

a szuszpenzióba, majd az agar felületére helyezzük, inkubálás: 24-48 h

25-37*C

bPor-tápagaron (minimal nutrient agar) tenyésztve cny = nyomokban

Jellemző 1 általános képletű vegyületek antibakteriális próbájának eredményeit - standard agar-hígításos- próbát alkalmazva — a Vili. táblázatban foglaljuk össze. A VIII. táblázatban a hatékonyságot a minimális gátló

koncentrációval (MIC) mérjük, azaz azzal a legkisebb koncentrációval, amelynél a vizsgálandó vegyület gátolja a mikroorganizmu- 65 sok növekedését.

17