193033. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 6-szubsztituált s-triazolo[3,4-a] ftalazin-származékok előállítására
27 193033 0,5 mol 6-klór-3- (4-metoxi-feni1) - 1,2,4-triazolo-[3,4-a] ftalazint és megömlesztett vízmentes nátrium-acetátot körülbelül egy órán át forralunk visszafolyató hütő alatt ecetsavban. Ezután az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk, a maradékot vízben felvesszük, szűréssel összegyűjtjük, majd etanol és kloroform elegyéből kristályosítjuk. így a címben szereplő vegyületet kapjuk. Kitermelés: 85%. Olvadáspont: 307-309°C. A találmány szerinti eljárással előállítható vegyületek íarmakológiai hatásait úgy határoztuk meg, hogy először benzodiazepin-receptort megkötő tesztnek vetettük alá őket in vitro. Ezt a tesztet a Möhler H. és Okada T. által a Life Sciences, 20. kötet, 2101-2110. (1977.) irodalmi helyen leírt módon végeztük, mennyiségileg meghatároztuk a vegyületek 3H-diazepam-receptor iránti affinitását, oly módon, hogy megmértük, hogy a vizsgálandó vegyületek milyen mértékben gátolják a 3H-diazepamnak a patkányagy membránjaihoz való kötődését. Az alábbi V. táblázatban felsoroljuk néhány, találmány szerinti eljárással előállítható vegyület ilyen tesztben mutatott eredményeit. Ebben a táblázatban a gátlást a K, inhibitor-állandóval fejezzük ki, K,=IC50/(1+C/K ), a képletben 1C50 a vizsgált anyagnak a specifikus 3H-diazepam-kötés 50%-ának kiszorításához szükséges koncentrációja, C a 3H-diazepam-koncentráció és Kp a 3H-diazepam-receptorával szembeni affinitási állandója (3,4-10 9 M). A receptor iránt nagy affinitást mutató vegyületek alacsony koncentrációban kiszorítják a 3H-diazepamot (alacsony IC50-érték), ezért alacsony K, -értékek jellemzik őket. A jobb öszszehasonlítás kedvéért a táblázatban megadjuk néhány ismert benzodiazepin-származék Krértékét is. V. táblázat Vegyület előállítási K,' példájának sorszáma 1 2 26, 1,6-t0's 27. 2,8-10'8 29. 1,8-10'* 30. 1,7 ■ 10'? 31 . 9.68-10"w 34. 4,6 • 10'8 35. 4,8 -10'* 40. 2,1 . 10'* 41 . 5,7 • 10'8 42 „ 1,6 • 10'® 43. 5,7 -10'® 44. 3,2. 10'* 45. 1,4 -10'® 28 V, táblázat folytatás a 1 2 46. 3,9, 10'9 50. 4,0 • 10'8 63. 2,0-10'* 66. 2,7 • 10'3 71 . 1,5 • 10'3 72. 2,1-10*7 73. 1,7-10'* 74. 2,9 • 10'® 78. 2,7-10'9 84. 7,8, 10'9 100. 2,9-10‘9 102. 4,27-10"’° 103. 8,06-10"° 104. 0,9-10'9 106. 5,65-10'* 107. 5,7.4 • 10'10 111. 6,0 • 10'8 Diazepam 1,89' 10'9 Oxazepam 5,7. • 10 9 Fluorazepam 8,58-10'9 Néhány, a fenti táblázatban szereplő vegyült tét in vivo is megvizsgáltunk olyan farmakológiái tesztekben, amelyekből arra lehet következtetni, hogy a vegyületek emberen anxiolitikus hatást mutatnak. A szorongás-ellenes hatás meghatározására szolgáló klasszikus farmakológiái teszt a feltételes elkerülés-teszt és egéren az anti-pentilén-tetrazol-teszt. A feltételes elkerülés-tesztet a Cook és Weidley által az Ann. N. Y. Acad. Sei., 1957., 66., 470. irodalmi helyen leírt és Maffii által módosított módszerrel (J. Pharm, and Pharmacol., 1959., 11., 129-139.) végeztük. Egy patkányt olyan rácsos padozattal ellátott kamrába helyeztünk, amelyen át elektromos sokkot lehetett adni. Ezt a kamrát egy jelzőcsengővel és egy elektromosan szigetelt farúddal is felszereltük, a farúd a kísérleti kamra felső oldaláról függött le. Az állat hamar megtanulja, hogy elkerüli í sokkot, ha felmászik a rúdra (feltétlen reflex, IJ.R.) és ha a jelzőcsengő hangjára mászik fel ; rúdra (feltételes elkerülési reflex, CR). A kísérletet továbbfolytatva a patkány már a jelzőcsengő megszólalása előtt felmászik a rúdra; amikor ez q reflex állandóvá válik, úgy tekintjük, hogy a patkány kifejlesztett egy másodlagos feltételes reflexet, CR2). Ezeknek a hosszú időn át tanított állatoknak adtuk be ezután a vizsgálandó anyagot, és meghatároztuk a feltételes reflexet megszünte*ő (dekondícionáló) hatást. A kísérletekhez 200—450 g súlyú, Wistar törzshöz tartozó hím patkányokat használtunk, és azt tapasztaltuk, hogy a másodlagos feltételes reflexet hatásosan meggátolták a 20., 30., 44., 53., 66., 71., 72., 92., 94., 104. és HE példa szerinti vegyü-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 16
