192962. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nagy gonadotróp aktivítású leteinizáló és ösztron-stimulálo hormonokat felszabaditó faktor analógok előállítására

10

192962

11

mérsékleten higroszkópos port 1 M ecetsavban oldjuk és a vizet fagyasztással távolítjuk el belőle. 25 mg nyerstermékét kapunk.

Az anyagot folyadékkromatográfiásán tisztítjuk. A következő körülmények között: 5

oszlopméret: 2,5x30 cm, stacionárius fázis: módosított szilikagél, mozgó fázis: 55 tf% 55%-os vizes metanol és 45 tfX 0,2%-os vizes trifluor-ecetsav elegye.

25 mg terméket a mozgó fázis 0,5 ral-ében ol- 10 dunk és beoltunk. A detektálást 280 nm-en végezzük. A tiszta terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és a metanolt vákuumban 30 °C-on ledesztilláljuk. A tisztított terméket 10,5 mg súlyú, 98%-os tisztaságú. [oc]d = 15-45,5 ° (C = 0,1, 1 M ecetsavban)

Aminosav Ö6Bzetétel analízis:

Glu = 1,03; His = 0,94; Trp = 0,80; Ser = 0,95;

Tyr = 0,96; D-Tle = 0,90; Leu = 0,99;

Arg = 1,06; Pro = 1,01. 20

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás (I) általános képletű nagy 25 gonadotropikus aktivitású, luteinizáló és ösztron-Btimuláló hormonokat felszabadító faktor előállítására, mely képletben 1234 5 678 9

pClu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Tle-Leu-Arg-Pro-NH- 30 -Et (1)

X jelentése hidrogénatom vagy p-toluol-szulfonil-csoport,

azzal jellemezve, hogy egy (II) általános

képletű

Y- Ser-Tyr-D-Tle-Leu-Arg-Pro-NH-Et (II )

X

vegyületet, mely képletben

X jelentése a fentiekben megadottal

megegyezik,

Y jelentése hidrogénatom vagy hidrogénezéssel eltávolítható védőcsoport, előnyösen benziloxi-karbonil-csoport és a (III) képletű tripeptid pGlu-His-Trp (III)

reakcióképes származékát egymással reagáltatják, majd kívánt esetben a védőcsoportot eltávolítjuk, a terméket izoláljuk és kívánt esetben tisztítjuk.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a 8-as helyzetben lévő p-toluol-Bzulfonil-csoportot trifluor-metán-szulfonsav és trifluor-ecetsav elegyével távolítjuk el egy védő-szer, előnyösen tioglikolsav jelenlétében, majd a terméket izoláljuk és tisztítjuk.

3. A 2. igénypont szerinti eljárás azzal jellemezve, hogy a reakciókeveréket reverz-fázisú folyadékkromatográfiával tisztítjuk, mozgó fázisként vizes metanol és trifluor-ecetsav elegyét használva.

Rajz nélkül

A kiadásért felel a Közgazdasági ős Jogi Könyvkiadó igazgatója

88.569.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkő István vezérigazgató