192819. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibakteriális hatású peném-származékok előállítására

41

192819

12

pufferban mostunk. Dekantálás után a feldarabolt és mosott szövetdarabokaL 10 ml 7,4 pH-értékű TRIS/EDTA-pufferbe vittük és kétszer homogenizáltuk. Az első

homogenizálást nagy rotorfejű ultra-Turrax("> berendezésben 4-5 másodpercig, a másodikat Teflon1"' homogenizátorban 5-6 ütésig végeztük. A kapott homogenizátumot steril ampullába töltöttük a használatig jégen tartottuk.

a) 50 a] oldatot adtunk 3 ml friss patkány máj-homogenizátumhoz, alaposan összekevertük és 1 órán át 37 °C hőmérsékleten tartottuk.

b) a maradék 50 pl oldatot 3 ml steril desztillált vízhez adtuk, 1 órán ót 37 °C hőmérsékleten tartottuk, ez szolgált kontrollként.

3. A MIC-értékek meghatározása

2. Dezacilezés

6 mg vegyületet felvittünk desztillált vízben. Ezután

100 pl steril 15

A MIC-értékek meghatározására szolgáló ismert módszert használtuk az a) és b) esetben az 1 órás inkubációs periódus végén.

MIC-érték (pgml-1)

(1)

ve(2)

ve(3)

ve(4) ve(5) ve(6) vegyület

gyület

gyület

gyület

gyüld

gyület

*

*

*

*

*

Str. Pyogenes

77A

0.05

0.05

0.1

0.1

0.05

0.05

0.05

0.05

0.1

0.19

308A

0.05

0.05

0.1

6.25

0.05

0.05

0.05

0.05

0.05

0.1

Str.faecium

D

6.25

6.25

6

0.1

12.5

6

6

6.25

6.25

12.5

Staph.aureus SG511

0.05

0.05

0.19

0.19

0.1

0.05

0.05

0.1

0.05

0.19

285

0.1

0.1

0.39

0.19

0.05

0.19

0.1

0.1

0.19

0.39

503

0.1

0.1

0.19

0.19

0.05

0.19

0.1

0.1

0.1

0.39

E. coli 055

1.56

1.56

50

3.12

50

1.56

0.78

0.39

0.78

1.56

DCO

12.5

12.5

>100

25 ->100

12.5

12.5

0.39

0.39

6.25

DC2

0.39

0.39

12.5

1.56

6

0.39

0.19

0.39

0.78

0.78

TEM

6.25

6.25

>100

50

>100

12.5

12.5

1.56

1.56

6.25

1507E

6.25

6.25

>100

12.5

>100

6.25

6.25

1.56

1.56

6.25

Ént.Cloacae P99

0.39

0.39

25

3.12

12.5

0.78

0.19

12.5

12.5

3.12

1321E

0.78

0.39

25

1.56

12.5

0.78

0.19

1.56

1.56

3.12

A szérumszint

Idő

A szérumszint Idő

(pgml-1) a

10’

0.60

1.22

3.98

1.08

(pgml'1) a:

z 10’

<3

19

patkányokban

20’

0.72

1.75

4.24

1.59

egerekben

20’

<3

20

10 mgkg-1 p.o.

GO

O

0.57

1.19

3.27

1.59

500 mgkg'

» 30’

<3

15

p.o

hatóanyag40’

0.33

1.62

3.50

1.59

hatóanyag

40’

<3

14

adagolás után

60’

0.16

(NA)

(NA;

(NA)

adagolás

60’

<3

11

után

90’

<3

6

* patkanymá j-homogenizátum jelenlétében

50

A táblázat adatai alapján a következőket állapíthatjuk meg.

A 6-hidroxi-etil-vegyületeknél a kétféle vizsgálat között nincs lényeges eltérés, azaz a máj-homogenizátum nincs számottevő hatás- 55 sál a MIC-értékre.

A találmány szerinti vegyületek MlC-értéke lényegesen magasabb gram-negatív törzsek esetén, ugyanakkor a máj homogenizátummal végzett vizsgálatban közel azonosan 50 viselkednek, mint a megfelelő 6-hidroxi-etilvegyületek.

A találmány szerinti vegyületek szérumszintje p.o. adagotás után lényegesen magasabb, mint a megfelelő 6-hidroxi-vegyületeké, 55

azt mutatja, hogy a találmány szerinti vegyületek orálisan adagolva előnyösebbek.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás az (I) általános képletû penémszármazékok - a képletben R jelentése fémkation vagy p-nitro-benzil-csoport vagy hidrogénatom,

R1 jelentése halogénalommal, cianocsoporttal, 1-4 szénatomos alkil-szulfonil-csoporttal, 1-4 szénatomos alkil-szulfinil-csoporttal, 1-4 szánatomos alkil-tio-csoportlal helyettesített fenilcsoport vagy 1-4 szénalomos alkil-szulfinil-csoporttal, 1-4 szénatomos alkil-szulfonil-csoporttal, 1-4 szénatomos alkil-tio-csoporl-22