192806. lajstromszámú szabadalom • Rejtett vér kimutatására alkalmas tökéletesített teszlemez és eljárás a vér kimutatására
6 192806 7 hogy a gvajakolos papír mintafelvitelt megelőző savas kezelése meggátolja a sav-labilis peroxidázok által katalizált téves pozitív reakciók fellépését. A savval kezelt papír pufferolt kifejlesztő oldat alkalmazása esetén hemoglobin-tartalmú minták jelenlétében kék színűvé válik, a kezelés hemoglobin meghatározását newm zavarja. 2 egység/ml tisztított tormaperoxidázt tartalmazó, pH 6,5-ős szintetikus gyomorfolyadék például „Hemoccult” lemezen vizsgálva téves pozitív reakciót adott. Ha ugyanezt a mintát savval kezelt gvajakolos papírra visszük és a kifejlesztés előtt 5 percig hagyjuk a savval reagálni, a pozitív reakciót jelző kék szín nem jelenik meg. A gvajakolos papír kezelésére megfelelőnek bizonyult a hidrogén-klorid, a kénsav, a citromBav, a foszforsav és az oxálsav. Ezeken kívül más erős szerves és szervetlen savak is használhatóak. A kővetkezőkben a gvajakolos papír összetételét és savas kezelését ismertetjük. I. oldat 7.8 g gvajakol 92.2 g izopropanol II. oldat 800 g I. oldat 768 g citromsav 432 g izopropanol 300 g víz A II. oldatot az abszorbens papírra impregnálással vagy nyomással visszük fel. A kifejlesztő oldatot bármely ismert puffer-rendszerrel, például citromsav/nátrium-citrát, citromsav/dinátrium-hidrogén-foszfát, trisz/maleát vagy EDTA pufferrel, pufferolhatjuk. A pufferolt kifejlesztő oldat előnyösen 1-5% hidrogén-peroxidot tartalmaz. Találmányunkban előnyösen a kővetkező, 0,2 mól/1- es pH 5,8-a8 citromsav/citrát pufferrel pufferolt kifejlesztő oldatot alkalmazzuk: 2.17 g hidrogén-peroxid 32.87 g etil-alkohol 0.75 g citromsav 4.37 g nátrium-citrét 58.80 g viz 1.04 g Triton X-100 A pufferolt kifejlesztő oldathoz előnyösen nemíonos detergenst adunk, mivel ez is hozzájárul a peroxidáz gátlásához. Legelőnyösebben Triton X detergenst, polietiléngli- 5 költ vagy p-izooktil-fenil-étert alkalmazunk. Savval kezelt gvajakolos papír szubsztrátum és pufferolt kifejlesztő oldat alkalmazása esetén a teBztlemez rejtett vérnek alacsony pH-jú oldatokból, például gyomorfolya- 10 dákból történő kimutatására is alkalmas. Ezen kívül megszűnnek a cimetidin, a peroxidáz és a fémionok, például réz- és vasionok jelenléte folytén fellépő téves pozitív reakciók. 15 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Rejtett vér kimutatására alkalmas gvajakolt tartalmazó tesztlemez, azzal jelle-20 mezve, hogy tesztreagensként gvajakolt tartalmazó, savval kezelt abszorbens szubsztrátumból áll. 2. Az 1. igénypont szerinti tesztlemez, azzal jellemezve, hogy a szubsztrátum ab-25 szorbens papírt tartalmaz. 3. Az 1. igénypont szerinti tesztlemez, azzal jellemezve, hogy savként citromsavat tartalmaz. 4. Eljárás rejtett vér kimutatására gyo- 30 morfolyadékból, azzal jellemezve. hogy a gyomorfolyadékot savval kezelt, gvajakol reagenst tartalmazó abszorbeáló szubsztrátumra visszük fel és 5,5-6,0 pH tartományba pufferolt kifejlesztő oldattal kezeljük, a ki- 35 fejlődő kék szint értékeljük. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kifejlesztő oldatként hidrogén-peroxid tartalmú reagenst alkalmazunk. 6. Rejtett vér kimutatására alkalmas 40 teszt-készlet, azzal jellemezve, hogy gvajakol reagenst tartalmazó, savval kezelt abszorbens szubsztrátumot és a gvajakol-tartalmú szubsztrátumot vér jelenlétében kékre színező kifejlesztő oldatot tartalmazó tartályból 45 áll. 7. Gvajakol-tartalmú szubsztrátumot vér jelenlétében kékre színező vizes kifejlesztő oldat, azzal jellemezve, hogy 0,2 mól/l-es pH 5,5-6,0 közötti citromsav/nátrium-citrát ol-50 dattal pufferolt, 1-5% hidrogén-peroxidot és kívánt esetben egyéb adalékanyagot tartalmaz. 8. A 7. igénypont Bzerinti oldat azzal jellemezve, hogy adalékanyagként nemionos 55 detergenst tartalmaz. Rajz nélkül A kiadásért felel a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó iguzgatója 88.310.66-4 Alföldi Nyomda Debrecen - Felelős vezető: Benkő István vezérigazgató 5
