192752. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására mikrobiolóiai úton
7 192752 8 M.* 41/12 M. M. purpu- purpureonigra reá IM-9 M. rosea M. danubiensis M. grisea M. zyonensis M. inyoensis I)-Mannit + + + + —+ + +Inozit± ±Glicerin± ± n.v. n.v. n.v. n.v. n.v. Du le it n.v. ± ± ±-* a 461 247 sz. spanyol szabadalmi leírás szerinti töj-zs. n.v. nem vizsgált 3. táblázat NaCl-türóképesség a sziszomicin termelő törzsek körében M. M. M. M. M. M. NaCl purpuré- rosea grisea zyonensis darnibi-41/12 onigra ensis 2% ++ + ++ + 4%“ 6%“~ A fentiek alapján megállapítható, hogy a sziszomicin antibiotikumot termelő Micromonospora purpureonigra IM-9 jelű törzs a Micromonospora inyoensis, a Micromonospora grisea, a Micromonospora nigrescens, a Micromonospora rosea, a Micromonospora zyonensis és az M. 41/12 jelzésű fajoktól jelentősen eltér, tehát egy új fajhoz tartozik. A találmány egy előnyös kivitelezési módja szerint a Micromonospora purpureonigra IM-9 jelű törzs tenyésztését süllyesztett kultúrában végezzük. A sziszomicin termelésére szolgáló táptalajban a sugárgomba által asszimilálható különféle szén- és nitrogénforrások, szervetlen sók, nyomelemek és habzásgátlók lehetnek jelen. Szén- és nitrogénforrásként, ill. energiaforrásként alkalmazhatunk szójalisztet., szójaliszt-hidrolizátumot, kazein-hidrolizátumot, kukorica-lekvárt., élesztőkivonatot, zselatint és különböző szénhidrátokat, mint glükóz, maltóz, keményítő, oldható keményítő, dextrin, stb. Szervetlen sóként használhatunk különféle vas-, magnézium- és kobaltsókat. a táptalaj pufferkapacitásának növelésére előnyösen kalcium-karbonátot alkalmazhatunk. Habzásgátlóként növényi olajokat (pálma-, napraforgó- és szójaolaj), valamint 2000-es molekulasúlyú polipropilénglikolt használhatunk. Különféle táptalajkomponensek felhasználásával többféle tápközeg előállítása is lehetséges. A rázott kultúra és az inokulumfermentáció tápigénye eltér a föfermentációétól. A sziszomicin termelésére a legelőnyösebbnek a szójalisztet, peptont vagy kazein-hidrolizát.umot, burgonya- vagy kukoricakeményitót, dextrint. vagy oldható keményítőt, 35 glükózt, kalcium-karbonátot, vas- és magnézium-szulfátot., kobalt-nitrátot és pálmaolajat tartalmazó tápközeg bizonyult. A fermentáció hőmérséklete 25 °C és 10 °C között változhat., legelőnyösebbnek a 28- 40 -33 °C-on végzett fermentáció bizonyult. A keverés fordulatszáma a fermentor geometriájának függvényében percenként 200 és 750 között változhat. A levegőztetés előnyösen a ferment.orhan lévő folyadék térfogatá- 45 val azonos térfogatú levegővel történik, percenként. A fermentáció során keletkező antibiotikum (sziszomicin és minor komponensek) hatékonyságát Staphylococcus epidermidis tesztorganizmussal állapítjuk meg agardiffú- 50 zios módszerrel [J. S. Simpson: Analytical Microbiology, Acad. Press N. Y. 87-124. old. (1963.)], sziszomicin standard anyagra vonatkoztatva. 90-100 órás fermentációs idő alatt a fér- 55 me ntié összakl ivitása kb. 600-700 /ug/ml-t. élei. A találmány- szerinti eljárásban a Miciomonospora • purpureonigra IM-9 törzs állal te-'melt sziszomicin antibiotikum előnyösen a 60 179.147 számú magyar szabadalmi leírásban ismertetett módszerekkel nyerhető ki. A kapott sziszomicin bázisból kívánt esetben, ismert módon, gyógy-ászatilag elfogadható sók állíthatók elő. 65 5
