192646. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új N-alkil-peptid-aldehidek előállítására
1 192 646 2 10 °C-on állni hagyjuk éjszakán át. A kivált kristályokat kiszűrjük, 300 ml vízzel és 300 ml benzollal mossuk, és vákuum exszikkátorban szárítjuk foszfor-pentoxid és paraffin-forgács mellett. 60 g (70%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 122-124 °C. [a]^° = -20,7° (c= 1, piridinben). Elemzési eredmény a Q9H2806N4.H2O (426,46) képletre számolva: számított: C% = 53,51; H% = 7,09;N% = 13,14; talált: C% = 53,35;H% = 7,2; N% = 13,1. E. lépés: Na-t-butil-oxi-karbonil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin -laktám 59,7 g (0,14 mol) Na-t-butil-oxi-karbonil-Nco-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-hidrátot (1. példa, D. lépés) és 19,6 g (0,14 mol) trietil-amint feloldunk 200 ml tetrahidrofuránban. Az oldatot —10 °C-ra hűtjük, és ezen a hőmérsékleten hozzáadunk keverés közben 18,5 ml (0,14 mól) izobutil-oxi-karbonil-kloridot, majd 10 perc után 19,6 ml (0,14 mól) trietil-amint. A reakcióelegyet tovább keverjük egy órán át 0 °C-on és egy órán át hűtés nélkül, majd keverés közben egy liter jeges vízhez öntjük. A kivált kristályokat kiszűrjük, kétszer 100 ml jeges vízzel mossuk, majd feloldjuk 280 ml kloroformban. A kloroformos oldatot 100 ml jeges vízzel mossuk, és vízmentesen kalcium-kloridon szárítjuk, majd 20-25. 102 Pa nyomáson max. 40 °C-os fürdőről bepároljuk. Kristályos maradékot kapunk, amit 70 ml petroléterben szuszpendálunk, szűrünk, kétszer 30 ml petroléterrel mosunk, és vákuum exszikkátorban szárítunk foszfor-pentoxid mellett. 44 g (81%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 164—166 °C. [a]20 = —24° (c=l, tetrahidro-furánban). J Elemzési eredmény a C19H2605N4 (390,43) képletre vonatkoztatva : számított : C% = 58,44; H% = 6,71 ; N% = 14,35; talált : C% = 58,7; H% = 6,8; N% = 14,1. 2. példa NJV -Dimetil-D-fenilalanil-L-prolil-L-arginin-aldehid-szulfát előállítása 1. lépés: N,N-dimetil-D-fenilalanil-L-prolil-Ncobenzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktám-klórhidrát 4,3 g (0,011 mol) Na-t-butil-oxi-karbonil-Ncobenzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktámot (1. példa, E. lépés) az 1. példa 1. lépésében leírt módon alakítunk át arányos mennyiségű oldószerek és reagensek felhasználásával. A kapott szuszpenziót az alábbi vegyes anhidridhez adjuk. 3,26 g (0,01 mol) N,N-dimetil-D-fenilalanil-L-prolinhidrátot és 2,2 ml (0,02 mól) N-metil-morfolint feloldunk 50 ml benzol és 5 ml etanol elegyében. Az oldatot 40—50. 102 Pa nyomáson 40 °C-os fürdőről betöményítjük 10-15 ml-re, majd még négyszer 40 ml benzolt ledesztillálunk, az utolsó alkalommal szárazra párolunk. A maradékot feloldjuk 10 ml dimetilformamidban és lehűtjük -15 °C-ra. Ezen a hőmérsékleten hozzáadunk 1,32 ml (0,01 mól) izobutil-oxi-karbonil-kloridot, majd 5 perc után a fenti dimetilformamidos szuszpenziót. A reakcióelegyet egy órán át keverjük -15 °C-on és egy órán át 0 C-on, majd 40 ml etil-acetátot adunk hozzá és a kivált sókat kiszűrjük. A szűrlethez 20 ml vizet adunk a fázisokat elválasztjuk. A vizes-dimetilformamidos fázist háromszor 5 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az etilacetátos fázisokat egyesítjük, mossuk kétszer 15 ml vízzel, kétszer 15 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ismét kétszer 15 ml vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és 20—25. 102 Pa nyomáson 40 °C-os fürdőről 10—15 ml-re töményítjük. A maradék oldathoz annyi sósavas etil-acetátot adunk, hogy a gőztérben a sav kimutatható legyen, majd 30 —40 ml dietil-éterrel hígítjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, dietil-éterrel mossuk és vákuum exszikkátorban szárítjuk kénsav és kálium-hidroxid melle t. 2,7 g (45%) cím szerinti terméket kapunk. Rf =0,43 [a]20 = -56,0° (c=l, kloroformban). Elemzési eredmény a C;,0H3 . 9/5 HCl. 2H20 (666,13) képletre vonatkoztatva: számított : C% = 54,09; H% = 6,9; N% = 12,62; Cl% = 9,58; talált C% = 54,0; H% = 7,0; N% = 12,6; Cl% = 9,8. 2. épés: NjN-dimetil-D-fenilalanil-L-prolil-Noj-ben-zil-oxi-karbonil-L-arginin-aldehid-szulfát 2,4 g (0,004 mol) N,N-dimetil-D-fenilalanil-L-prolil-Nc. -benzil-oxi-karbonil-L-arginin-laktám-klórhidrátot (2. példa, 1. lépés) feloldunk 15 ml tetrahidro-furánban, lehűtjük —20 °C-ra, és keverés közben hozzáadunk 0,003 mól litium-alumínium-hidridet tetrahidro-furános oldatban. A redukció előrehaladását rétegkrcmatográfiával követjük az etil-acetát-piridinecetsav-víz (60:20:6:11) rendszerben (a laktám és az aldehil Rf értéke kb. 0,35, illetve 0,2). Szükség szerint adagolunk további litium-alumínium-hidrid-oldatot, n ajd a reakcióelegyet hűtés és keverés közben pH = 5-re savanyítjuk 1 n kénsavval. Az oldatot zavarosodásig hígítjuk vízzel (kb. 30 ml), majd kétszer 15 ml kloroformmal kirázzuk. Ezután a vizes tetrah drofurános fázist háromszor 20 ml n-butanollal kivonatjuk. A n-butanolos oldatokat egyesítjük, 10 ml n-butanollal telített vízzel mossuk, és 15-20- 102 Pa nyomáson max. 40 °C-os fürdőről 5—10 ml-re töményítjük. A maradékot 30 ml éterrel hígítjuk, a kivált csapadékot szűrjük, kétszer 10 ml dietil-éterrel és kétszer 10 ml petroléterrel mossuk, majd feloldjuk 20 ml kloroform és 5 ml metanol elegyében. A nem oldódó részt kiszűrjük, a szürletet az előbbi módon be pároljuk. A maradékként kapott olajos terméket 30 ml dietil-éterrel elkeverjük. Az így keletkező csapadékot kiszűrjük, kétszer 20 ml dietil-éterrel és kétszer 20 ml petroléterrel mossuk, vákuum exszikkátorban szárítjuk paraffin-forgács, kénsav és kálium-hidroxid mellet . 2,25 g (85%}cím szerinti terméket kapunk. R* =0 48-0,54. Elemzési eredmény a C30H3SO5 N6 ,H2 S04 (660,73) képleti e vonatkoztatva: számít )tt : C% = 54,53; H% = 6,10; N% = 12,72; S% = 4,84; talált: C% = 55,0; H% = 6,5; N% = 12,1; S% = 4,7. 3. lépés: N,N-dimetil-D-fenilalanil-L-prolil-L-argi-nin-aldehid-szulfát 1,32 g (0,002 mol) N,N-dimetil-D-fenilalanil- L-proli!-N-benzil-oxi-karbonil-L-arginin-aldehid-szulfá-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
