192579. lajstromszámú szabadalom • Eljárás orálisan adagolható immunogén kompozíció előállítására
1 192 579 2 A találmány tárgya eljárás vakcinákat tartalmazó ehető kompozíciók előállítására. A találmány tárgya közelebbről olyan orális úton adagolható immunogén kompozíciók előállítása, amelyek élő, a gasztro-intesztinális rendszerben parazita protozoát, mint pl. coccidiát tartalmaznak. Az ilyen protozoák átmeneti állapotban ciszták, azaz olyan nyugalmi életciklusban vannak, amikor kemény külső burkot képeznek, amely megvédi a parazitákat a gazdaszervezet testén kívül a kedvezőtlen hatásoktól. A parazita a cisztából akkor kerül ki, amikor azt egy új gazdaszervezet lenyeli. Az az általános felfogás, hogy hatásos orális vakcinálás parazita protozoák ellen csak úgy érhető el, ha a vakcina a protozoát élő állapotban tartalmazza. A gazdaszervezet immunitását a parazitával történő ellenőrzött fertőzéssel hozzák létre. Az elölt parazita orális adagolása nem eredményez, hatásos immunitást. Az élő organizmusok legyengíthetők, azaz természetes virulenciájuk módosítható a célból, hogy vakcina formájában történő adagoláshoz jobban megfeleljenek, de a gazdaszervezet fertőzésének szükségessége továbbra is lényeges lépés marad. Annak ellenére, hogy a protozoa betokozódott formában van, életképességének fenntartása a vakcinában olyan problémát jelent, amely az egyszerűbb organizmusokat, pl. baktériumokat vagy vírusokat tartalmazó tradicionális vakcinák esetében nem vetődik fel. A protozoa például nem liofiüzálható a jobb tárolhatóság érdekében. Sőt, a betokozódott protozoa általában érzékeny a dehidrálásra. A lenyelés után a protozoa burokból való természetes kijutása az egyes gazdaszervezetek bélrendszerének emésztő mechanizmusától függ. A fertőzéshez a buroknak fel kell szakadnia, és a benne levő organizmusnak a bélrendszer olyan részébe kell jutnia, ahol az organizmus kielégítően tud fejlődni. Az ilyen természetes, burokból való kijutás bármiféle akadálya azt eredményezheti, hogy a gazdaszervezet normális emésztőfunkciói által a protozoa átjut a bélen és elhagyja a bélcsatornát anélkül, hogy fertőzést okozna. Az a szükséglet, hogy a betokozódott protozoát hatékonyan megvédjük az adagolás előtt, összeegyeztethetetlennek tűnik azzal a szükséglettel, hogy a lenyelés után a burokból való kijutás könnyen végbemenjen. Az lenne várható, hogy bármilyen kemény, robusztus burkoló anyag, amely megfelel az első követelménynek, a vakcinát hatástalanná teszi azáltal, hogy késlelteti vagy megakadályozza a burokból való kijutást. A találmány szerinti eljárás lehetővé teszi, hogy olyan javított protozoa vakcinát készítsünk, amely fenntartja az immunogén organizmus életképességét anélkül, hogy a természetes mechanizmusokat megakadályozná, amelyek által a gazdaszervezet a lenyelés után megfertőződik. A találmány tárgya tehát eljárás immunogén kompozíció előállítására, amelynek során élő, betokozódott parazita protozoa szuszpenzióját készítjük valamely gélképző anyaggal, és a szuszpenziót tömör géllé alakítjuk. A gélnek elég szilárdnak kell lennie ahhoz, hogy a kezelésnek ellenálljon, azaz lágy vagy pépes gél nem eléggé robusztus ahhoz, hogy a betokozódott protozoát megvédje a fizikai károsodásoktól. A gél az immunogén anyag beágyazása után szárítható. A találmány szerinti megoldás meglepő jellemzője, hogy a gél szárított állapotban vakcina, hordozóanyagául szolgálhat. Egy másik megoldás szerint a gél hordozóanyag nedvesen tartható addig, míg a beágyazott protozoát a gazdaszervezettel megetetjük ’ agy a tápanyaghoz hozzákeverjük. Nedves állapotban a beágyazott protozoa például vizes közegben a gélrészecskék szuszpenziójaként kezelhető. A találmány szerinti eljárásban előnyösen poliszacharid-alapú gélt alkalmazunk. Előnyösen olyan poliszacharido alkalmazunk, amely gyorsan tömörödik. A tömörödési előnyösen kémiai úton érjük el. Általában metoxipektineket alkalmazunk, de a legelőnyösebb az alginátalap í gél. A különböző alapú gélek keverve is alkalmazhatók. A poliszacharid gél önmagában történő alkalmazása viszonylag kemény anyagot eredményes dehidrálás után. Ez a keménység bizonyos körülmények között előnyös lehet, mivel fokozza a protozoa fizikai védelmét. Emellett azonban ez a keménység előnytelen is lehet, amenynyil en csökkenti a gélhordozó emészthetőségét, és így megakadályozza a protozoa kiszabadulását a lenyelcs utál . Kívánt esetben a gél kissé lágyabbá tehető úgy, hogy nedvesítő vagy lágyító anyagokat keverünk a poliszát haridhoz. Ilyen szempontból előnyös anyagok a glicercl vagy a folyékony paraffin. Ilyen anyagok előnyösen legfeljebb 75 tömeg% mennyiségben vannak jelen, a poliszacharid gélre vonatkoztatva (szárazsúlyban kifejezve). A gél hordozóanyag fizikai tulajdonságai módosíthatók egy vagy több töltőanyag adagolásával. Ilyen anyagok használata a találmány szerinti készítmény nyersanyagárának csökkentését is eredményezi, mivel ezek általában olcsóbbak mint például a tiszta alginát. A töltőanyagnak finom részecskeméretűnek kell lennie ázért, hogy az alapgél folyási tulajdonságait ne befolyásolja a tön örödés előtt. A töltőanyag előnyösen ne adjon le fén ionokat, amelyek korai tömörödést okoznának. Az olyan töltőanyagok, mint pl. kréta, fölözött tejporvág/ tejsavó-por kalciumot tartalmaznak, amely az alginát tömörödését elősegíti. Előnyös töltőanyagok a különféle lisztek, keményítők, maltodextrinek, dextrinek és a burgonyapép. Szervetlen töltőanyagok, mint pl. kaolin, szintén alkalmas. Szárított baromfi trágya, előnyt 'sen megőrölve, szintén használható. \ betokozódott protozoa mellett a gél hordozóanyag mái olyan adalékanyagokat is tartalmazhat, amelyek magát a hordozót módosítják, vagy a kompozíciót alkalmasabbá teszik az oiáiis adagolásra, például állati takarmány adalékanyagává alakítják. A beágyazódott protozor emésztés során bekövetkező kiszabadulását meg lehet gyorsítani úgy, hogy kevert gélt alkalmazunk, vagy a gélhez emulgálószert vagy felületaktív anyagot adunk. Alkalmas takarmány-adalékká történő alakítás céljából hasznos lehet, ha a kompozíció organoleptikus tulajdonságait megváltoztatjuk, éspedig színező és zamatjavító anyagokat keverünk hozzá. Kívánt esetben a protozoát tartalmazó hordozóanyagot más takarmányadalékok ho dozóanyagaként is használhatjuk, például növekedésszabályozó anyagok vagy karotinoidok is bekeverhetők. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös megvalósítási módja szerint a gél hordozóanyag élő, betokozódott paiazita protozoát és egy kemoterápiás szert tartalmaz, amely a protozoa ellen, annak közbenső életciklusában ha'ásos. A kemoterápiás szert olyan mennyiségben alkalmazzuk, amely elegendő a protozoa lenyelés utáni teljes kifejlődésének megakadályozásához a gazdaszervezetben. A parazita protozoa így lenyelés után meg tud telepedni, és így immunválaszt kiváltani a gazdaszervezetben, de a 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
